细胞分析

细胞凋亡检测

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分重要。同时,了解细胞死亡和存活机制也是毒理分析和药物研发应用中一个非常关键的内容。

Sigma®联合Roche®提供多种分析细胞凋亡的研究方法。包括:Caspase活性检测;DNA片段化分析和检测;膜变化检测(AnnexinV染色、膜电位、线粒体功能完整性分析检测实验)及细胞形态学检测。

Caspase活性检测

Caspase (cysteinyl-aspartic acid proteases)是一个家族的蛋白酶,它的活化是细胞凋亡的典型特征。一旦一个Caspase 酶被激发,就会激活一系列其他的Caspas酶,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。Caspase 3 活化发生在凋亡早期,并在凋亡过程中起重要作用。Caspase 3 Activity Assay (CASP3C) 基于荧光免疫酶测定,能在体外特异性地对Caspase 3进行定量。

膜变化检测

凋亡细胞另一个生化特征是细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸从胞质转至胞外。膜联蛋白中的Annexin V,是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有强亲和力。通过使用Annexin V FLUOS Staining Kit (11988549001) 或Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit (APOAF) 方法进行凋亡细胞早期检测。可使用流式细胞仪或荧光显微镜监测。同时使用PI,根据细胞膜的通透性区分早期凋亡细胞和坏死细胞。

线粒体膜电位和膜通透性的变化也是凋亡细胞一个重要特点。可使用Cytochrome c Oxidase Assay Kit (CYTOCOX1) 试剂盒检测凋亡细胞线粒体所释放的细胞色素C。也可使用Mitochondria Isolation Kit 1 (MITOISO1) 分离凋亡细胞线粒体,其膜电位可通过Mitochondrion Membrane Potential Kit (MAK146-1KT) 检测。

DNA片段化分析

DNA降解也是细胞凋亡的典型标志之一,其降解产物可分为两种,即高分子量的单链DNA缺口以及低分子量DNA片断(单链及寡聚核小体)。单链DNA缺口有特定的检测方法,即利用酶催化,将特定核酸标记到游离的3'-OH末端,这种方法被称为 TUNEL。Roche提供的基于TUNEL法的In Situ Cell Death Kit, fluorescein 11684795910)能够在组织及单细胞中检测到低水平的凋亡,灵敏度高,背景干扰小,且可通过后续的流式、荧光显微镜、光学显微镜检测对细胞凋亡进行定量。

在凋亡细胞的细胞质中出现的组蛋白联合的DNA片断(单链及寡聚小体),可使用Cell Death Detection ELISAPLUS11774425001)高通量地检测细胞死亡,或使用Apoptotic DNA-Ladder Kit 11835246001)通过纯化及琼脂糖电泳分析这些呈现出典型的ladder状态的DNA片断。

细胞形态学检测

细胞形态的变化如胞膜皱摺或出泡、核染色质致密、胞质浓缩等,都可作为细胞凋亡的证据。一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA特异性染料有:Hoechst 33342 (B2261),Hoechst 33258 (B2883), DAPI (D9542)。三种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
 

 

细胞凋亡检测试剂盒

 
产品货号 产品名称 产品描述 次数
CASP3C Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric Caspase 3活性检测试剂盒(比色法) 1× 96孔板
CASP3F Caspase 3 Assay Kit, Fluorimetric Caspase 3活性检测试剂盒(荧光法) 1× 96孔板
CASP8C Caspase 8 Assay Kit, Colorimetric Caspase 8活性检测试剂盒(比色法) 1× 96孔板
APPA015 Caspase Activity Detection Kit Caspase活性检测试剂盒 1× 96孔板
12236869001 Homogen.Caspases Assay Caspase酶Elisa检测试剂盒,荧光法 1000
11544675001 Cell Death Detection ELISA 细胞死亡ELISA检测试剂盒(DNA片段化) 1× 96孔板
11774425001 Cell Death Detection ELISAPLUS 细胞死亡ELISA高通量检测试剂盒(DNA片段化) 1× 96孔板
11920685001 Cell Death Detection ELISAPLUS, 10 x 细胞死亡ELISA高通量检测试剂盒(DNA片段化) 10 x 96孔板
11835246001 Apoptotic DNA-Ladder Kit 细胞凋亡DNA-标记试剂盒(DNA片段化) 20
11684809910 In Situ Cell Death AP 单细胞水平检测试剂盒-AP(DNA片段化) 50
11684795910 In Situ Cell Death fluorescein 单细胞水平死亡检测试剂盒-荧光(DNA片段化) 50
11684817910 In Situ Cell Death POD 单细胞水平死亡检测试剂盒-POD(DNA片段化) 50
12156792910 In Situ Cell Death TMR 单细胞水平检测试剂盒-TMR(DNA片段化) 50
11858777001 Annexin V FLUOS Staining Kit Annexin V细胞凋亡检测试剂盒(含染色) 50
11988549001 Annexin V FLUOS Staining Kit Annexin V细胞凋亡检测试剂盒(含染色) 250
11828681001 Annexin-V-FLUOS Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 250
CS0030 Senescence Cells Histochemical Staining Kit 衰老细胞组织化学染色试剂盒 100
APOBRDU Flow Cytometry Kit for Apoptosis 细胞凋亡流式细胞术检测试剂盒 60
APOAC Annexin V-Cy3™ Apoptosis Detection Kit Annexin V-Cy3™ 细胞凋亡检测试剂盒 200
APOAF Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒 20
CS1070 Transglutaminase Assay Kit 谷氨酰胺转移酶检测试剂盒 2 × 96孔板
MITOISO1 Mitochondria Isolation Kit 1 线粒体分离试剂盒1(动物组织) 50
MITOISO2 Mitochondria Isolation Kit 2 线粒体分离试剂盒2(细胞,2-5 x 107cells/次) 50
MITOISO3 Mitochondria Isolation Kit 3 线粒体分离试剂盒3(酵母) 40
CS0390 Mitochondria Staining Kit 1 线粒体染色试剂盒1 200
CS0720 Citrate Synthase Assay Kit 柠檬酸合酶检测试剂盒 100
CYTOCOX1 Cytochrome c Oxidase Assay Kit 细胞色素c氧化酶检测试剂盒 100

 

细胞凋亡相关检测试剂 (More...)

 
产品货号 产品名称 产品描述
A4963 Annexin V Cy3.18 Conjugate from human placenta buffered aqueous solution Cy3.18标记Annexin V,来源于人体胎盘
A6014 Acridine Orange hemi(zinc chloride) salt For nucleic acid staining in cells or gels 吖啶橙,用于细胞中核酸染色
A7810 Annexin V Biotin Conjugate from human placenta buffered aqueous solution 生物素标记Annexin V,来源于人体胎盘
A9210 Annexin V FITC Conjugate from human placenta FITC标记Annexin V,来源于人体胎盘
B1155 bisBenzimide H 33258 powder, BioReagent, suitable for cell culture, ≥98% (HPLC and TLC) 赫斯特荧光染料 H33258 粉末,≥98% (HPLC and TLC)
B2261 bisBenzimide H 33342 trihydrochloride ≥98% (HPLC and TLC) 双苯酰亚胺 H 33342三盐酸化物
B2883 bisBenzimide H 33258 ≥98% (HPLC and TLC) 赫斯特荧光染料 33258 ≥98% (HPLC and TLC)
D5189 L-Asp-Asp-Rhodamine trifluoroacetate salt >98%, solid L-Asp-Asp若丹明三氟乙酸盐
D8417 4′,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride powder, BioReagent, suitable for cell culture, ≥98% (HPLC and TLC), suitable for fluorescence 4',6-二脒基-2-苯基吲哚,≥98% (HPLC and TLC)
D9542 DAPI for nucleic acid staining 4',6-二脒基-2-苯基吲哚用于核酸染色
E8751 Ethidium bromide~95% (HPLC) 溴化乙啶 ~95% (HPLC)
P4170 Propidium iodide ≥94.0% (HPLC) 碘化丙啶 ≥94.0% (HPLC)
T4427 Terminal Transferase from calf thymus buffered aqueous glycerol solution 末端转移酶,来源于小牛胸腺
11835238001 Anti-Poly (ADP-Ribose) Polymerase 抗体,特异性识别Casepase酶水解的PARP,早期凋亡
12140349001 M30 Cytodeath, 250 tests 抗体,特异性识别Casepase酶切割片段,早期凋亡
12140322001 M30 Cytodeath, 50 tests 抗体,特异性识别Casepase酶切割片段,早期凋亡
11772457001 TUNEL AP 用于细胞凋亡检测抗荧光抗体AP标记, Fab ,来源于绵羊
11966006001 TUNEL Dilution Buffer TUNEL 稀释缓冲液(DNA片段化定量检测)
11767305001 TUNEL Enzyme TUNEL 酶(DNA片段化定量检测)
11767291910 TUNEL Label Mix TUNEL 核酸标记Mix(DNA片段化定量检测)
11772465001 TUNEL POD TUNEL 抗体荧光标记抗体-过氧化物酶(DNA片段化定量检测)

 

细胞凋亡诱导剂 (More…)

 
产品货号 产品名称 产品描述
C4992 Carboxyatractyloside potassium salt ≥98% (HPLC) 羟基苍术苷钾盐,≥98% (HPLC)
E7781 Erastin ≥98% (HPLC) 铁死亡激活剂≥98% (HPLC)
G8171 Gambogic acid ≥95% (HPLC), powder 藤黄酸≥95% (HPLC), powder
P1499 Pterostilbene ≥97% (HPLC), solid 紫檀茋 ≥97% (HPLC)
R9156 Raltitrexed monohydrate ≥98% (HPLC), solid 雷替曲塞≥98% (HPLC)
SML0096 Cinnabarinic Acid ≥98% (HPLC) 朱砂精酸≥98% (HPLC)
SML0552 Tirapazamine ≥98% (HPLC) 替拉扎明 ≥98% (HPLC)
SML0580 Nutlin-3a ≥98% (HPLC) Nutlin-3a ≥98% (HPLC)
SML1372 Nifetepimine ≥95% (HPLC) Nifetepimine ≥95% (HPLC)
T2577 Temozolomide ≥98% (HPLC) 替莫唑胺≥98% (HPLC)

 

细胞凋亡抑制剂 (More…)

 
产品货号 产品名称 产品描述
B6179 Bongkrekic acid solution from Pseudomonas cocovenenans, ≥95% (HPLC), ~1 mg/mL 米酵菌酸,来源于椰毒假单胞菌 ≥95% (HPLC), ~1 mg/mL
C8999 Calpeptin ≥98% (HPLC) 细胞渗透性calpain抑制剂≥98% (HPLC)
E3876 N-Ethylmaleimide crystalline, ≥98% (HPLC) N-乙基马来酰亚胺≥98% (HPLC)
F3680 10058-F4 ≥98% (HPLC), solid 10058-F4噻唑啉酮 ≥98% (HPLC)
G9420 GNF-2 ≥98% (HPLC), solid 3-[6-[[4-(三氟甲氧基)苯基]氨基]-4-嘧啶基]苯甲酰胺≥98% (HPLC)
M0199 Mdivi-1 ≥98% (HPLC), powder 线粒体分裂抑制剂1 ≥98% (HPLC), powder
M6690 MDL 28170 ≥95% (TLC) 钙蛋白酶抑制剂3≥95% (TLC)
N9037 Necrostatin-1 ≥98% (HPLC) Necrostatin-1 ≥98% (HPLC)
P4359 Pifithrin-α ≥95% (HPLC), powder PFTα ≥95% (HPLC)
SML0221 Piperlongumine ≥97% (HPLC) 荜茇酰胺 ≥97% (HPLC)