抗体

FLAGタグ抗体入門編

 

歴史と信頼のFLAG抗体

FLAG タグシステムはFLAGタ グと呼ばれる人工的な8アミノ酸配列(DYKDDDDK、Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)を目的のタンパク質に組み込 んで発現させ、FLAGタグに対する抗体を結合させたレジ ン(アフィニティビーズ)によって精製する手法です。

FLAGタグは8アミノ酸という短さから目的のタンパク質に影響を与えにくく、アフィニティ精製ではFLAGペプチドを使うことでマイルドな条件で溶出することができ、タンパク質の機能を保ったまま目的のタンパク質が得られやすくなります。

FLAGタグシステムは抗体によるアフィニティ精製を行うことで、ポリヒスチジンなど他のタグシステムより高純度のタンパク質が得られるという特長があります。

SigmaのマウスモノクローナルFLAG M2抗体ならびにFLAG M2抗体をアガロースビーズに結合させたアフィニティビーズ(アフィニティレジン)はFLAGタグ融合タンパク質の検出、精製にもっともよく利用されています。

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お客様インタビュー

FLAGタグを導入したタンパク質を多数作製している、シスメックス株式会社 R&I事業本部 事業企画部 タンパク事業推進課長の長屋様にお話をお伺いしました。

インタビュー記事はこちら

FLAG 人気製品リスト

FLAGタグ融合タンパク質のアフィニティ精製にSigmaのFLAG M2抗体アフィニティーゲル(アフィニティーレジン)がもっともよく利用されています。抗FLAG M2抗体は従来の結合力が比較的高い製品(F3165)と特異性が比較的高いアフィニティ精製済みの製品(F1804)をご用意しています。

FLAG全製品リスト(USサイト)

FLAGタグシステムの詳細

 

FLAGタグ融合タンパク質精製

製品番号 製品名 製品情報 適用
A2220 抗FLAG M2抗体アフィニティビーズ(アフィニティレジン) N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)を認識するマウスモノクローナル抗FLAG M2抗体を共有結合させたアガロースビーズ。FLAGタグ融合タンパク質はFLAGペプチドまたは3xFLAGペプチドなどで溶出することができます。 FLAG、3xFLAG融合タンパク質の精製、免疫沈降
M8823 抗FLAG M2抗体磁気ビーズ 担体の4%アガロースビーズが磁気を帯びているため、磁石によって分離することができます。 FLAG、3xFLAG融合タンパク質の精製、免疫沈降
F3290 FLAGペプチド 抗FLAG M2抗体アフィニティレジンに結合させたFLAGタグ融合タンパク質の競合的溶出に用いられます。一般的な使用濃度100 μL/mL。3xFLAGタグ融合タンパク質の溶出には不適です。 FLAG融合タンパク質の溶出
F4799 3xFLAGペプチド 抗FLAG M2抗体アフィニティレジンに結合させた3xFLAGタグ融合タンパク質の競合的溶出に用いられます。一般的な使用濃度100 μL/mL。 3xFLAG融合タンパク質の溶出

 

FLAGタグ融合タンパク質検出

製品番号 製品名 免疫動物 抗体の精製 抗原 交差性 WB 免疫染色 免疫沈降 ELISA
F3165 モノクローナル抗FLAG M2抗体 マウス 精製イムノグロブリン DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ
F1804 モノクローナル抗FLAG M2抗体 マウス アフィニティ精製 DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ  
F7425 ポリクローナル抗FLAG抗体 ウサギ アフィニティ精製 DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ  
A8592 モノクローナル抗FLAG M2抗体-ペルオキシダーゼ(HRP)標識 マウス 精製イムノグロブリン DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ    
A9469 モノクローナル抗FLAG M2抗体-アルカリフォスファターゼ標識 マウス 精製イムノグロブリン DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ      
F4049 モノクローナル抗FLAG M2抗体-FITC標識 マウス 精製イムノグロブリン DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ      
F9291 モノクローナル抗FLAG M2抗体-ビオチン標識 マウス 精製イムノグロブリン DYKDDDDK N末端、C末端のFLAGタグ(DYKDDDDK)および3xFLAGタグ