カスタムsiRNA/一本鎖RNA MISSION In Vivo Quality and iScale Oligos siRNA　注文情報

MISSION^® In Vivo Quality, iScale Oligos™ siRNA はターゲットバリデーションやpre-clinicalのsiRNA実験など、動物のRNAi研究に適した、高品質のsiRNAであり、ミリグラムスケールおよび様々な修飾に対応が可能です。直接投与や、様々なデリバリー方法に適した品質です。

製品仕様

蛍光・化学修飾

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セミラージ(ミリグラム)スケール一本鎖RNA

関連製品

製品仕様

In Vivo Quality の仕様

• HPLC精製(90%以上の純度)
• アニーリング後に透析済
• 0.22µmのフィルターにてろ過滅菌
• エンドトキシンテスト済

クリーンルームにて管理された品質
MISSION^® In Vivo Qualityの合成と精製は高度に管理されたクリーンルームにて行われております。

合成スケール

• 3mg(50 OD): パイロット試験に最適です。
• 50mg
• 100mg

その他のスケールについては、お問い合わせください。

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蛍光・化学修飾

siRNAのトラッキングもしくは in vivo での安定性を向上させるために、MISSION^® In Vivo Qualityおよび iScale Oligos^™ siRNAでは、様々な修飾がご利用可能です。

• 5’6-FAM
• 5’リン酸化
• 5’Cy^™3
• 5’Cy^™5
• 5’アミノ化
• S化(ホスホロチオエート結合)
• 5’ or 3’コレステロール

その他の修飾につきましては、お問い合わせください。

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技術情報・参考文献

MISSION^® In Vivo Qualityは高純度のsiRNＡです

Figure 1

in Vivo での使用例

弊社ではBioo Scientific 社（TX, USA）と協力して、MISSION In Vivo Quality siRNA をバリデーション致しました。(Drug Discovery&Developmentの記事もご覧ください)

H1155luc 細胞をNOD/SCID マウスにインジェクションした。腫瘍が形成された後、MAX Suppressor^™ LANCEr II を使用し、ルシフェラーゼに対するsiRNA、non-targeting　MISSION In Vivo Quality siRNA をそれぞれインジェクションした。24 時間後、D- ルシフェリン溶液をインジェクションし、Night OWL 装置を使用して動物のイメージングを行った。ルシフェラーゼ特異的なsiRNA で処理した動物（Figure 2）は、non-targeting siRNA 処理した動物と比較して、顕著なルシフェラーゼ活性の減少が確認された。これらのデータから、LANCEr II in vivo delivery agent を使用したMISSION In Vivo Quality siRNA の有効性が示唆された。

Figure 2.　左：ルシフェラーゼ特異的 siRNA で処理した動物; 右：non-targeting siRNAで処理した動物

インジェクション後72時間で、腫瘍組織を摘出、タンパク質を抽出し、Bradfordアッセイで定量した。ルシフェラーゼの濃度は、Luciferase ELISAを用いて測定した。non-targeting siRNAで処理した動物と比較して、タンパク質発現量の減少が確認された。ルシフェラーゼ活性は、腫瘍内で、約1/2に減少していた

Figure 3.　異なるマウスを使ったレプリケート実験の結果

参考文献

• 実際に弊社製iScale siRNAを使用した論文
  Brahmamdam, P., et al. Targeted delivery of siRNA to cell death proteins in sepsis. Shock Nov 11 [Epub ahead of print] (2008). (This reference uses Sigma's MISSION In Vivo Quality siRNA.)
• 実際に弊社製iScale siRNAを使用した論文
  Watabe M, Aoyama K, Nakaki T. A dominant role of GTRAP3-18 in neuronal glutathione synthesis. J Neurosci. 2008 Sep 17;28(38):9404-13.
• Kleinman, M. E. et al. Sequence- and target-independent angiogenesis suppression by siRNA via TLR3. Nature 452, 591-7 (2008).
• Yang, Z. et al. Toll-like Receptor 3 and Geographic Atrophy in Age-Related Macular  Degeneration. N. Engl. J. Med. Aug 27 [Epub ahead of print] (2008).
• Robbins, M. et al. Misinterpreting the therapeutic effects of siRNA caused by immune　stimulation.Hum. Gene Ther. Aug 19 [Epub ahead of print] (2008).
• その他in vivo applicationに関する文献はこちらから。

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