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遺伝子機能解析

shRNA

MISSION shRNAは膨大な量のクローンコレクションとレンチウィルスデリバリーシステムによる確実な遺伝子導入が特長です。また、MISSIONシリーズにはプールドタイプ、アレイタイプのライブラリーなど様々なニーズにお答えします。クローンセットでのご購入が大変お得です。

Sigma campaign, all Sigma brand products includes.

MISSION® shRNA 特長

  • ひとつのターゲット遺伝子あたり、2～20種類（多くは5種類）の shRNA をデザイン
  • 30万クローンを超える膨大なライブラリー
  • ターゲット遺伝子はヒト1万8千種類、マウス1万6千種類
  • １遺伝子当たり、3 クローン以上で購入すると大変お得!
  • 再生可能なベクターのシステム
  • transient または stable（ピューロマイシンによる選択）なサイレンシング
  • レンチウイルスを用いることにより幅広い細胞種に利用可能
  • shRNA の配列は全て確認し、最新のロボット技術で生産

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TRC (The RNAi Consortium) とは？

Join The RNAi Consortium (TRC) and Sigma-Aldrich on a Path to Discovery

The RNAi Consortium, TRC. RNA interference represents a revolutionary approach to basic biological research as well as drug development and discovery. The ability to genetically manipulate mammalian cells with RNAi may lead to critical insights into the mechanisms underlying human disease and accelerate the development of treatments for cancer, AIDS, and a host of other disorders. A public-private consortium based at the Broad Institute is developing RNAi technologies that will enable the scientific community to probe the functions of human and mouse genes. The goal of the RNAi Consortium (abbreviated TRC) is to create widely applicable research reagents consisting of specific RNAi inhibitors targeting human and mouse genes. Partners include Harvard Medical School (HMS), the Massachusetts Institute of Technology (MIT), Dana-Farber Cancer Institute (DFCI), Massachusetts General Hospital (MGH), the Whitehead Institute for Biomedical Research (WIBR), Bristol-Myers Squibb, the Ontario Institute of Cancer Research, Sigma-Aldrich, and research institute Academia Sinica in Taiwan. The RNAi Consortium （TRC）はハーバードメディカルスクール（HMS)、マサチューセッツ工科大学（MIT)やノバルティス、イーライ・リリーなどの企業をふくめ、世界的な研究機関で構成されております。TRCでは、ヒト、マウス遺伝子の機能解析のための RNAi のツールとして、レンチウイルスのシステムを用いた shRNA ライブラリーを作成しております。シグマアルドリッチは TRC のメンバーとして、ライブラリー (MISSIONTM shRNA Librarｙ) の製造、保管、販売を行っております。

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shRNAデザイン

TRC メンバーである、ＭＩＴ，ハーバードメディカルスクールで開発されたアルゴリズムを用い、RNAi に最適なショートヘアピンをデザインしております。ヘアピン配列は、レンチウイルスベクター（pLKO．1-puro)　にクローニングされ、配列を確認しております。1遺伝子あたり、3-5箇所の shRNA をデザインし、そのうちの少なくとも１種類は70%の遺伝子発現抑制が予想されます。デザイン部位はＣＤＳだけでなく 3‘UTR も含んでおります。

Gene Silencing Using MISSION shRNA

High-throughput validation of MISSION-TRC shRNA lentiviral transduction particles. Gene silencing effect of 60 different genes was measured at the mRNA transcript level and compared to pLKO.1-puro empty control particles. For each target gene, approximately 70% or greater knockdown was achieved.

Click here to view enlarged image (259 KB PDF)

Figure 1. High-throughput validation of MISSION-TRC shRNA lentiviral transduction particles. Gene silencing effect of 60 different genes was measured at the mRNA transcript level and compared to pLKO.1-puro empty control particles. For each target gene, approximately 70% or greater knockdown was achieved.

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pLKO.1-puro Vector、TRC1/1.5とTRC2の違い

pLKO.1-puro は、transient だけでなく stable なノックダウンが可能です。pLKO.1-puro は、packaging plasmid　と同時に ＨＥＫ２９３Ｔ 等の細胞にトランスフェクションすることにより自己増幅能のないレンチウイルスパーティクルを作成できます。レンチウイルスはアデノウイルスなどにくらべると高い感染能力をもち、stable なノックダウン、幅広い細胞種（non-dividing cells や primary cellsなど）に感染可能です。

TRC1/1.5とTRC2の違い
shRNAの発現を促進するため、TRC2のVectorにはWPRE (the Woodchuck Hepatitis Post-Transcriptional Regulatory Element)を導入した点です。詳細はVector Mapをご覧ください。

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はじめてshRNAをご利用になる方のために（プロトコール）

ここでは基本的なshRNAのレンチウイルスパーティクルを用いたプロトコールと各種フォーマット（レンチウイルスパーティクル、大腸菌グリセロールストック、プラスミドDNA）の選択ガイドを掲載しております。

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納品形態・価格・納期について

別途、下記までお問合せください。価格表を送付させて頂きます。
テクニカルサポート　( TEL：03-5796-7330　e-mail : sialjpts@sial.com )

本製品はカルタヘナ法該当製品である事、また、数万遺伝子をターゲットとし、数十万クローンを持つライブラリーから、製品仕様をご選択いただくため、代理店へのご注文の他にご注文の仕様を同定するために別途、『ご注文用紙』（正確にはご注文仕様決定用紙）にご記入を頂いております。

必要な情報をご記入いただき、弊社代理店までお渡しください。

shRNA order flow and entry sheet for Japan customer. Please search your favorite gene by YFG and input the clones information and your address on entry sheet. Then, send to dealer with place order.

クローンセット、お値引きについて
shRNA製品では、同じターゲット遺伝子中、2-20クローンがあります。同一遺伝子（同一RefSeq. No.）、同一フォーマット、同一仕様で、複数のクローンをご購入いただくと大変お得です。

例：
JAK1　Human　NM_002227　においてレンチウィルスを選択
19クローン、内バリデートデータ付が18クローン　とします。

この場合、5クローン以上を一度にお買い上げ頂く場合、2クローンの金額と同等になります。

  • 各クローン単価（通常仕様）
  • レンチウイルス、バリデートデータ有　：　¥138,250- / 1クローン
  • レンチウイルス、バリデートデータ無　：　¥122,500- / 1クローン

ここで、バリデートデータ有を４クローン、バリデートデータ無を１クローン選択。

  • クローンセットのご購入時の各クローン単価（通常仕様）
  • バリデートデータ有　：　¥138,250-　ｘ　40%　＝　¥55,300- / 1クローン
  • バリデートデータ無　：　¥122,500-　ｘ　40%　＝　¥49,000- / 1クローン
  • 合計　：　 ¥55,300-　ｘ　4　+　 ¥49,000-　ｘ　1　＝　¥270,200-
※
同一遺伝子（同一RefSeq. No.） に4クローンしかない場合は、4クローン全てご購入の際に、1クローン当たり50%の金額とさせて頂きます。
※
同一遺伝子（同一RefSeq. No.） に3クローンしかない場合は、3クローン全てご購入の際に、1クローン当たり67%の金額とさせて頂きます。
※
バリデートの保証に関しましては、クローンセットをご購入頂いた場合のみ適用されます。詳しくは『バリデートデータと保証について』をご確認ください。
※
その他、オプションをご選択頂いた場合も同様の値引率とさせて頂きます。ただし、オプション選択時のクローンセットは同一仕様のみ適用になります。

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バリデートデータと保証について

保証の範囲
MISSION shRNAはBroad Instituteによって開発された独自のアルゴリズムに基づいて、クローンセット中、１クローン以上が70%以上のノックダウンレベル示す事を保証します。

保証の条件
保証の適用は下記条件を全て満たした場合のみとさせて頂いております。

  • クローンセット（通常5クローン）をご購入頂いている。
  • 適切なコントロールにてノックダウンをご確認いただいている。
  • お客様の実験系において、ノックダウンが確認されなかった場合、十分にshRNAが発現している事を確認いただいている。

もし、ノックダウンが確認されなかったら？
次の方法の何れかにおいて、対応させていただきます。

  • 別のクローンを１つ無償提供
  • 別の製品によって、金額相当の無償提供
  • 金額相当のご返金

弊社営業、もしくはテクニカルサポートにて請け賜ります。

バリデートデータとは？
shRNAにおけるバリデートデータとは、TRCへのクローン登録の際、表示のメソッド、表示の細胞において、検証されたノックダウンレベルです。お客様の実験系におけるノックダウンレベルを保証したものではありません。予めご了承ください。また、バリデートデータの表示はBroad Instituteにて、50%以上のノックダウンレベルを示したもののみを表示しております。

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カルタヘナ法該当製品について

本製品のうち、大腸菌グリセロールストックとレンチウィルスパーティクルはカルタヘナ法該当製品です。詳細は添付のPDFをご参照ください。

MISSION shRNA関連製品の法規関連について (139KB PDF)

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よくあるご質問と回答例

お客様より頂く、ご質問に関して、まとめてあります。

MISSION shRNA　FAQ

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米国コンテンツインデックス

MISSION shRNAは日々、更新されています。米国の製品情報サイトをインデックスで、簡単にご紹介いたします。

MISSION shRNA関連製品の法規関連について

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YFG（日本語紹介）

Monoclonal and polyclonal primary antibodies are focused on cell biology, neurobiology and molecular biology. Secondary antibodies targeting multiple host's IgG are conjugated to alkaline phosphatase, peroxidase, biotin, FITC and other labels. Other immunochemicals include assay development reagents, such as purified immunoglobulins, controls, blocking agents, buffers and substrates

A product resource guide for researchers in the Life Sciences. Each installment will highlight products and services tailored to the many individual areas of interest in the Life Sciences

article, Automated DNA Sequencing, Cell Biology, Cell Culture, Cell Signaling, Cloning and Expression, DNA and RNA Purification, Drug Discovery, Functional Genomics and RNAi, Gene Expression, Genomics, Innovations, issue, Life Science, origins, PCR, Protein Expression, Proteomics, publications, Quarterly, Protein Expression, Proteomics

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