Sterilitätstests

Sterilitätstestverfahren werden für Produkte in vielen Industriezweigen angewandt, einschließlich der Lebensmittel- und Getränkehersteller, aber die wichtigsten Industriezweige sind der pharmazeutische und der medizinische Sektor, wo die Sterilitätsprüfung der Produkte eine wichtige und routinemäßige Aufgabe für Mikrobiologen bleibt.

• Pharmazeutische Sterilitätstestmethoden
• Sterilitätstestmethoden für Medizinprodukte
• Workflow für Sterilitätstests

Pharmazeutische Sterilitätstestmethoden

Kompendiale Methoden für die Sterilitätstests von pharmazeutischen Produkten erfordern, dass die Proben in zwei verschiedenen Medien kultiviert werden. Bei der Sterilitätsprüfung werden zwei verschiedene Arten von Nährmedien verwendet, um das Wachstum von Restanaerobiern, Aerobiern und Pilzen zu fördern. Flüssiges Thioglykolatmedium (FTM) wird in der Regel für die Anzucht von anaeroben und einigen aeroben Bakterien verwendet, während Sojabohnenkaseinverdauungsmedium (SCDM) in der Regel für die Anzucht von Pilzen und aeroben Bakterien verwendet wird. Die Proben werden vor der Untersuchung 14 Tage lang bei 32,5 °C bzw. 22,5 °C bebrütet. Jede Trübung im Nährmedium kann auf Wachstum hinweisen und muss untersucht werden. Es gibt zwei empfohlene Methoden zur Sterilitätsprüfung von Arzneimitteln: Membranfiltration und direkte Inokulation.

Sterilitätstest durch Membranfiltration

Der Sterilitätstest durch Membranfiltration ist die Methode der Wahl für filtrierbare pharmazeutische Produkte, wie sie in der USP <71>, EU Pharmacopoeia < 2.6.1> und JP Pharmacopoeia <4.06> zitiert wird. Die Proben werden durch einen 0,45-µm-Membranfilter in einem Filtrationsbehälter geleitet, und das Kulturmedium wird zur Bebrütung hinzugefügt. Diese Methode der Sterilitätsprüfung kann im Vergleich zu anderen Methoden eine höhere Empfindlichkeit bieten, da die gesamte Probe oder eine Mischprobe durch einen einzigen Filter geleitet wird. Die Filtration bietet auch die Möglichkeit, Bestandteile in der Probe wegzuspülen, die Trübungen verursachen oder das Wachstum hemmen können, wie z. B. Antibiotika oder Konservierungsstoffe.

Direkte Inokulations-Sterilitätstests

Bei der direkten Inokulation wird ein kleines Probenvolumen aseptisch aus der Probeneinheit entnommen und vor der Bebrütung direkt in ein geeignetes Volumen eines Wachstumsmediums beimpft. Diese Testmethode ist zwar einfach, kann aber auch einige erhebliche Einschränkungen mit sich bringen. Es können nur kleine Mengen des Produkts in das Nährmedium beimpft werden, was die Empfindlichkeit des Tests einschränkt. Wenn die Probe nach der Beimpfung trüb erscheint, kann es schwierig sein, eine Trübung durch mikrobielles Wachstum am Ende der Inkubationszeit zu erkennen. Wenn das Produkt antimikrobielle Eigenschaften hat, muss die Probe außerdem neutralisiert werden, damit das mikrobielle Wachstum nicht gehemmt wird.

Sterilitätstestmethoden für Medizinprodukte

Für die Sterilitätsprüfung von Medizinprodukten wird die Sterilitätsprüfung durch direkten Transfer empfohlen. Das zu prüfende Produkt steht während der gesamten Inkubationszeit in direktem Kontakt mit dem Testmedium, in dem Mikroorganismen in oder auf dem Produkt wachsen und sich vermehren können. Darüber hinaus wird die Sterilitätsprüfung durch Spülung des Produkts bevorzugt bei Produkten mit Hohlröhren, wie Transfusions- und Infusionssystemen, bei denen der Flüssigkeitsweg als steril gekennzeichnet ist. Das Produktlumen wird mit einer Spülflüssigkeit gespült, das Eluat wird membranfiltriert und zur Inkubation in ein geeignetes Medium gegeben.

Arbeitsablauf der Sterilitätsprüfung

1. Testvorbereitung - Schließen Sie den Schlauch des Membranfiltrationsgeräts an die Pumpe an

2. Vorbefeuchtung des Filters - Befeuchten Sie das Membranfiltrationsgerät, um die Filtration zu optimieren und die Bindung des Produkts an den Filter zu minimieren.

3. Probenfiltration - Filtern Sie eine gleiche Menge des Produkts in beide Behälter. Die Mikroorganismen werden von einem Filter mit einer Porengröße von 0,45 µm zurückgehalten.

4. Spülung-Alle hemmenden Verbindungen werden mit einer geeigneten Spüllösung(en) gespült.

5. Befüllung mit Kulturmedien - Die Membranfiltrationsgeräte werden mit sterilen TSB- und FTM-Kulturmedien befüllt.

6. Inkubationszeit-14 Tage.

7. Endgültige Testergebnisse - Visuelle Trübungsprüfung/keine Trübungsprüfung.