DIUTPS-RO

Digoxigenin-11-dUTP, alkalibeständig

• Synonym(e): Digoxigenin-11-dUTP, alkalilabil
• UNSPSC Code: 41105500
• NACRES: NA.54
• Assay: ≥85% (HPLC)
• Form: solution
• Storage temp.: −20°C

Eigenschaften

• assay: ≥85% (HPLC)
• form: solution
• mol wt: M_r 1090.7
• packaging: pkg of 125 μL (11558706910 [1 mM]), pkg of 5 × 125 μL (11570013910 [5x1 mM]), pkg of 25 μL (11093088910 [1 mM])
• manufacturer/tradename: Roche
• λmax: 222 and 292 nm, 22430 and 8780
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Digoxigenin-11-dUTP, alkalibeständig, wird als Lösung in 1 mM Tetralithiumsalz angeboten.

Application

Digoxigenin-11-dUTP, alkalibeständig, wird verwendet für die Markierung von Sonden für
Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH)[1] und Polymerasekettenreaktionen (PCR)[2]
Hinweis: Wenn das Nukleotid bei +15 bis +25 °C 0,1 – 0,5 NaOH ausgesetzt wird, bleibt der DIG-Teil gebunden. Es eignet sich daher hervorragend für die Verwendung in DIG-markierter DNA, die einer Alkalisierung widerstehen muss. Wenn Sie jedoch eine DIG-markierte Sonde herstellen möchten, die durch Alkalidenaturierung entfernt werden kann (z. B. bei der Ablösung und Neuverprobung von Blots), sollte dieses alkaliresistente Präparat nicht verwendet werden. Verwenden Sie stattdessen die nicht alkaliresistente Form DIG-11-dUTP.

Biochem/physiol Actions

Digoxigenin (DIG)-11-Desoxyuridintriphosphat (dUTP) ersetzt Desoxythymidintriphosphat (dTTP) in der random-primed DNA-Markierungsreaktion bzw. in der Nick-Translation in einem Verhältnis von 35 % DIG-11-dUTP und 65 % dTTP. DIG-11-dUTP kann zudem dTTP bei der Markierung während Polymerasekettenreaktionen (PCR) (z. B. mit Taq-DNA-Polymerase), 3′-Tailing (mit terminaler Transferase) und cDNA-Synthese (z. B. mit Transkripteur oder reverser M-MuLV-Transkriptase) ersetzen. Es ist hervorragend geeignet als Substrat für DNA-Polymerase, Taq-DNA-Polymerase, terminale Transferase und reverse Transkriptase.

Features and Benefits

Digoxigenin ist über eine alkaliresistente Etherbindung mit dem Desoxyuridintriphosphat verbunden.

Alkaliresistenz: Das Präparat ist bei +15 bis +25 °C in Gegenwart von 0,1 – 0,5 M NaOH stabil.

Preparation Note

Arbeitslösung: Es wird empfohlen, eine Desoxynukleotid-Mischung mit dATP, dCTP, dGTP, dTTP (jeweils 10 mM) herzustellen; (z. B. geben Sie für die Herstellung von 100 μl Nukleotid-Mischung (je) 10 μl dATP, dCTP, dGTP, dTTP zu 60 μl Wasser, PCR-Qualität).
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Es ist innerhalb von 4 Wochen bei 15 bis 25 °C eine Zersetzung von etwa 5 % zu erwarten.

Analysis Note

Typische Analyse: Mindestens 85 % DIG-11-dUTP (HPLC, Flächenprozent).
Funktionsgeprüft durch RPL.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash