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Chromatin-Immunpräzipitations-Kit EZ-Magna ChIP^® A/G

Single day chromatin immunoprecipitation (ChIP) kit containing all necessary reagents to perform 22 individual chromatin immunoprecipitation (ChIP) reactions using magnetic A/G beads. Control primers included.

• Synonym(e): Magnetic ChIP Kit
• UNSPSC Code: 12161503
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32161000

Eigenschaften

• Quality Level: 100
• manufacturer/tradename: Magna ChIP^®
• technique(s): immunoprecipitation (IP): suitable
• shipped in: dry ice

Beschreibung

General description

Die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) ist eine leistungsstarke Methode zur Kartierung der In-vivo-Verteilung von Proteinen, die mit chromosomaler DNA assoziiert sind. Bei diesen Proteinen kann es sich um Histon-Untereinheiten und posttranslationale Modifikationen sowie andere Chromatin-assoziierte Proteine wie Transkriptionsfaktoren, Chromatin-Regulatoren etc. handeln. Zusätzlich kann ChIP verwendet werden, um mit diesen Proteinen assoziierte Regionen des Genoms zu identifizieren, oder umgekehrt, um mit einer bestimmten Region des Genoms assoziierte Proteine zu identifizieren. Die ChIP-Methodik beinhaltet häufig eine Protein-DNA- und Protein-Protein-Vernetzung, eine Fragmentierung des vernetzten Chromatins und eine anschließende Immunpräzipitation des Chromatins mit einem für ein Zielprotein spezifischen Antikörper. Die im Komplex mit dem Zielprotein isolierten DNA-Fragmente können mit einer Vielzahl von Methoden wie PCR, DNA-Microarray und DNA-Sequenzierung identifiziert werden. Mit einer Standard-PCR oder quantitativen PCR kann überprüft werden, ob eine bestimmte DNA-Sequenz (das Gen oder die Region des Genoms) mit dem jeweiligen Protein assoziiert ist. Die Kombination von ChIP und Promoter Microarrays oder Genomic Tiling Microarrays (ChIP-Chip) ermöglicht die genomweite Identifizierung von DNA-Bindungsstellen für Chromatin-assoziierte Proteine mit präziser Auflösung. Die Hochdurchsatz-Sequenzierung von Bibliotheken, die aus immunpräzipitierter chromosomaler DNA (ChIP-Seq) konstruiert wurden, ist eine leistungsstarke Alternative zum ChIP-Chip bei der Kartierung der Protein-DNA-Interaktionen bei Säugetiergenomen.

Im Gegensatz zu Standard-ChIP-Protokollen, die mühsam und zeitaufwendig sein können, kann das Magna-ChIP-Kit-Protokoll den erforderlichen Zeitaufwand für die Durchführung eines ChIP-Experiments von drei auf einen Tag verringern. Zusätzlich erhöht das kleinere Magna-ChIP-Reaktionsvolumen die relative Konzentration des Antikörpers, weshalb die ChIP-Reaktion mit geringeren Mengen des Antikörpers und des gescherten Chromatins durchgeführt werden kann. Und da bei diesem Kit eine Mischung aus Protein-A- und Protein-G-Beads zum Einsatz kommt, kann ein breiteres Spektrum an Antikörper-Isotypen als nur A oder G verwendet werden. Dadurch kann eine größere Bandbreite an Antikörpern genutzt werden und es brauchen keine separaten Kits für die auf Protein A und Protein G basierende Immunpräzipitation erworben werden. Da Magna-ChIP-Kits paramagnetische Beads verwenden, sind sie mit automatisierten Hochdurchsatz-Plattformen kompatibel, so dass zahlreiche ChIP-Reaktionen gleichzeitig durchgeführt werden können. Eigenschaften & Vorteile:

• Mit dem auf magnetischen Beads basierenden Schnellprotokoll kann ChIP innerhalb nur eines Tages durchgeführt werden
• Mit der Protein-A+G-Bead-Mischung kann bei ChIP ein breiteres Spektrum an Antikörpern als nur A oder G verwendet werden
• Antikörper zur Negativ- und Positivkontrolle und ein Kontroll-Primer-Set zur Vereinfachung der Validierung des experimentellen Verfahrens
• Enthält Spin-Säulen, um die DNA-Aufreinigung einfacher und zuverlässiger zu machen – keine unsauberen Phenol-Chloroform-Extraktionen mehr
• Komplett-Kit mit allen erforderlichen Reagenzien für zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse
• Kompatibel mit ChIPAb+-validierten Antikörper- und Primer-Sets

Die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) ist eine wichtige Methode, mit der In-vivo-Interaktionen von Proteinen mit genomischer DNA analysiert werden können. Mit dieser Methode kann jedes Chromatin-assoziierte oder DNA bindende Protein analysiert werden, sofern ein guter Antikörper gegen das Protein vorhanden ist. Man kann verschiedene Proteine, die in einer bestimmten Region des Genoms lokalisiert sind, oder die genomweite Verteilung eines bestimmten Proteins messen. Eine weitere leistungsstarke Anwendung dieser Methode ist die Analyse von Veränderungen in Histonmodifikationen, die mit Prozessen wie Transkription, Mitose oder DNA-Reparatur korrelieren.

Application

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Zur Entdeckung/Quantifizierung von: Protein A+G

Packaging

Kit-Kapazität: 22 Chromatin-Immunpräzipitations-Assays

Physical form

Zwei Packungen mit allen notwendigen Reagenzien zur Durchführung von 22 einzelnen Chromatin-Immunpräzipitations(ChIP)-Reaktionen. Die mitgelieferten Puffer reichen aus, um Chromatin aus bis zu fünf 15-cm-Platten mit kultivierten Zellen zu erzeugen, wobei jede Platte bis zu 10 Chromatinpräparationen enthält (variiert je nach Zell- und Assay-Typ).

Preparation Note

Die Komponenten nach Erhalt bei den auf den Etiketten angegebenen Temperaturen lagern. Die Kit-Komponenten sind bei vorschriftsmäßiger Lagerung ab Versanddatum ein Jahr lang haltbar.

Other Notes

Magnetische Protein-A/G-Beads

ChIP-Verdünnungspuffer

Salzarmer Waschpuffer

Waschpuffer mit hohem Salzgehalt

LiCl-Waschpuffer

TE-Puffer

Zelllyse-Puffer

Puffer für nukleare Lyse

ChIP-Elutionspuffer (ohne Proteinase K)

Proteinase K

RNase A

10x Glycin

10x PBS

Protease-Inhibitor-Cocktail II

Anti-RNA-Polymerase II, Klon CTD4H8

Normales Maus-IgG

Kontroll-Primer

Spinfilter

Sammelröhrchen

Bindungsreagenz A

Waschreagenz B

Elutionsreagenz C

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• signalword: Danger
• Lagerklasse: 3 - Flammable liquids
• flash_point_f: 55.4 °F
• flash_point_c: 13 °C
• wgk: WGK 3
• pictograms: GHS02,GHS08,GHS07,GHS09
• hcodes: H225,H302,H315,H319,H334,H411,EUH430
• pcodes: P201 - P202 - P210 - P273 - P391 - P405 - P501
• Hazard Classifications: Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2