Albumine und Transportproteine
Viele Moleküle sind instabil oder unlöslich, wenn sie in nicht-komplexer Form vorliegen. In vitro werden häufig Albumine und andere Trägerproteine verwendet, um eine Reihe wichtiger kleiner Moleküle und Proteine zu binden, zu isolieren und zu stabilisieren. Albumine sind einfache wasserlösliche Proteine, die in tierischen Flüssigkeiten und Geweben und in geringerem Maße auch in Pflanzen vorkommen. Albumine werden in der Bioproduktion von therapeutischen monoklonalen Antikörpern und rekombinanten Proteinen verwendet.
Wir bieten Albumine für umfassende Anwendungsbedürfnisse, einschließlich Zellkultur, Proteinquantifizierung, Enzymstabilisierung, ELISA und antikörperbezogene Prozesse. Neben Albuminen aus verschiedenen Quellen bieten wir diese essentiellen Proteine in unterschiedlichen Formaten und Formulierungen an.
Produkte
Albumine in der Zellkultur
Albumine, insbesondere aus Rinderserum (BSA), sind ein wichtiger Bestandteil vieler serumfreier Zellkultursysteme, insbesondere solcher, die Hybridoma- oder Chinese Hamster Ovary (CHO) Zellen verwenden. In Zellkulturmedien funktioniert Albumin, indem es andere wichtige Moleküle bindet und an die Zellen in der Kultur abgibt. Da nicht alle Albumine die gleiche Wirksamkeit in Kulturmedien haben, ist es ratsam, diejenigen zu wählen, die für Zellkulturanwendungen getestet wurden.
Rinderserumalbumin (BSA) ist ein globuläres Protein (~66 kDa MW), das aufgrund seiner Stabilität und der Tatsache, dass es biologische Reaktionen nicht stört, in zahlreichen biochemischen Anwendungen eingesetzt wird. Die BSA-Struktur ist eine einzelne Polypeptidkette, die aus etwa 583 Aminosäureresten und keinen Kohlenhydraten besteht. Erfahren Sie mehr über die BSA-Proteinstruktur, das BSA-Molekulargewicht, die Eigenschaften und Anwendungen in unserem BSA-Leitfaden zu physikalischen Eigenschaften und Anwendungen.
BSA ist das klassische Arbeitspferd unter den Albuminprodukten, das in zahlreichen Anwendungen eingesetzt wird. Unsere verschiedenen Formate für Albumin aus Rinderserum umfassen Reinheiten von 95-99%. Wir produzieren und vertreiben BSA, das mit verschiedenen primären Methoden gereinigt wurde, darunter die echte Cohn-Fraktionierungsmethode, modifizierte Ethanol-Fraktionierungsmethoden, Hitzeschock und Chromatographie. Zusätzliche Reinigungsschritte können Kristallisation oder Kohlefiltration umfassen. Der Einfachheit halber sind unsere BSAs nach der Art ihrer Herstellung definiert:
- Die chromatographische Reinigung von Albumin führt in der Regel zu einer stärker konservierten nativen Proteinkonformation als die Ethanol- und Hitzeschockfraktionierungsmethoden.
- Bei der Ethanol- und Hitzeschockmethode werden beide Verfahren kombiniert, wobei die anfängliche Reinigung durch Cohn-Fraktionierung erfolgt, gefolgt von einem Hitzeschritt zur weiteren Reinigung des Albumins auf ≥ 99 % durch Agarose-Elektrophorese.
- Die Ethanol-Fraktionierung ist eine Fraktionierungsmethode, bei der die Ethanolkonzentration, der pH-Wert und die Temperatur eingestellt werden. Im Gegensatz zur Hitzeschock-Methode wird dieser Prozess bei einer niedrigen Temperatur gehalten, wodurch eine nicht denaturierende Bedingung für die Proteine gewährleistet wird und die native Albuminstruktur und -funktion erhalten bleibt.
- Der Hitzeschockfraktionierungsprozess der Hitze- und pH-Einstellung beruht auf dem Zusatz eines Proteinstabilisators. Dieser Zusatz ermöglicht es dem Albumin, die erhöhte Temperatur von > 65 °C zu tolerieren. Die meisten anderen Plasmaproteine denaturieren und fallen während dieses Prozesses aus, wodurch ein Albumin mit höherer Reinheit entsteht.
Humanserumalbumin (HSA)
Humanserumalbumin (HSA) ist das am häufigsten vorkommende Protein im menschlichen Plasma mit einem Molekulargewicht von ~66 kDa (basierend auf der Aminosäurezusammensetzung). Serumalbumin kann als Cohn-Fraktion V bezeichnet werden. Diese Bezeichnung geht auf die ursprüngliche Cohn-Methode zur Fraktionierung von Serumproteinen durch Kaltethanolfällung zurück, da Serumalbumin bei Cohns Methode in der fünften Ethanolfraktion gefunden wurde. Seitdem wird der Begriff "Cohn-Fraktion V" von einigen verwendet, um Serumalbumin zu beschreiben, unabhängig von der Methode der Herstellung. Wir stellen Humanserumalbumine mit Hilfe eines Kaltalkoholfraktionierungsverfahrens her, das von der traditionellen Cohn-Methode sowie von der Hitzeschockmethode abgeleitet ist, und bieten sowohl native als auch rekombinante Versionen von HSA in Pulver- und Lösungsformaten an.
Sonstige Albuminprodukte
Unser Portfolio umfasst weitere Albuminprodukte für spezifische Anwendungen, die menschliche und andere nicht-rindliche Proteine erfordern. Rekombinante menschliche Albumine und tierisches komponentenfreies (ACF) Albumin werden in wässrigen Puffern oder als lyophilisiertes Pulver geliefert. Albumine anderer Spezies sind u. a. aus den folgenden Quellen erhältlich:
- Hühnereiweiß
- Mäuseserum
- Rattenserum
- Porcinserum
- Rinderserum
Unsere Albumine sind von hoher Reinheit und hervorragender Löslichkeit, um einen geringen Hintergrund in Proteinquantifizierungstests zu gewährleisten und Störungen in Bioprozessen zu minimieren.
Transferrine und Transferrin-Ersatzstoffe
Zellen benötigen Eisen, um verfügbaren Sauerstoff aus der extrazellulären Umgebung zu binden.Transferrine sind einkettige Glykoproteine, die im Serum vorkommen und die Aufnahme von Eisen in das Kulturmedium und seinen anschließenden intrazellulären Transport erleichtern.Obwohl Transferrin die physiologisch optimale Methode ist, um Zellen in Kulturen mit Eisen zu versorgen, und daher bei der Herstellung von Biopharmazeutika wie monoklonalen Antikörpern eine wichtige Rolle spielt, haben risikoärmere, tierfreie Systeme dazu geführt, dass in der Bioproduktion einige Alternativen zu Transferrin in Form von kleinen Molekülen eingesetzt werden. Viele dieser Transferrin-Alternativen sind Eisenchelatoren, die mit geeigneten Protokollen in Kultursystemen verwendet werden müssen, da viele von ihnen den Redox-Zyklus von Eisen nicht steuern und daher zu oxidativem Stress beitragen können. Unsere Zellkulturreagenzien umfassen eine vollständige Auswahl an Transferrinen und Transferrin-Ersatzstoffen.
Verwandte Ressourcen
- Albumin in Cell Culture
Explore serum albumin's role in serum-free cell culture systems for biomanufacturing.
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