Extração em fase sólida (SPE)

A extração em fase sólida (SPE) é uma técnica projetada para a preparação e purificação rápida e seletiva de amostras antes da análise cromatográfica (por exemplo, HPLC, GC, TLC). Na SPE, um ou mais analitos de uma amostra líquida são isolados por extração, partição e/ou adsorção em uma fase estacionária sólida.  

A preparação de amostras por SPE altera a matriz original de uma amostra para um ambiente de matriz mais simples. Isso torna a amostra mais adequada para a cromatografia analítica subsequente, muitas vezes simplificando e melhorando a análise qualitativa e quantitativa final. A matriz de amostra mais simples também reduz a demanda imposta a um sistema analítico, aumentando potencialmente a vida útil do sistema.

Um procedimento de SPE ideal pode permitir que você:

• Altere as matrizes de amostra para que sejam mais compatíveis com o método cromatográfico de destino.
• Concentrar os analitos (enriquecimento de traços) para aumentar a sensibilidade.
• Remover interferências que causam alto fundo, picos enganosos e/ou baixa sensibilidade durante a análise cromatográfica.
• Proteger a coluna analítica de contaminantes.
• Automatizar o processo de extração.

Como o SPE funciona?

Na SPE, a fase estacionária (um sorvente ou resina) se liga ao analito ou à impureza por meio de interações fortes, mas reversíveis, para extrair de forma confiável e rápida o analito de interesse de uma amostra complexa.

A SPE é seletiva e versátil, pois muitos sorventes e condições de eluição diferentes estão disponíveis para analitos e matrizes diferentes. Os sorventes comuns de SPE incluem:

• À base de sílica
  • Fase reversa (C18, C8, ciano, fenil)
  • Fase normal (sílica, diol, NH₂)
  • Troca iônica (SAX, WCX, SCX)
• Baseado em carbono
• Baseado em polímeros (várias composições, diferentes funcionalidades)
• Outros, por exemplo, Florisil^® (silicato de magnésio) ou Alumina
• Cama mista: Combinações de quase todos os itens acima em camadas sequenciais

Estratégias para SPE

Na "Bind-Elute SPE", o analito de interesse é capturado pelo adsorvente e as interferências da matriz passam pelo cartucho. No "SPE de remoção de interferências", as interferências da matriz são capturadas no sorvente e os analitos de interesse passam por ele. Os métodos HybridSPE e QuEChERS SPE funcionam por meio da Remoção de Interferências.

O método SPE ideal depende da estrutura, solubilidade, polaridade e propriedades lipofílicas (coeficientes de distribuição) do analito. Guias de seleção estão disponíveis para ajudar a escolher a fase estacionária e o solvente mais favoráveis para a aplicação de interesse.

Aplicações comuns da SPE

A SPE é usada com frequência nos setores farmacêutico, clínico e de testes de diagnóstico de alto rendimento, forense, ambiental e de alimentos/agroquímicos para análises relacionadas a:

• Compostos farmacêuticos e metabólitos em fluidos biológicos
• Drogas de abuso em fluidos biológicos
• Poluentes ambientais em águas potáveis e residuais
• Pesticidas, antibióticos ou micotoxinas em matrizes alimentares/agrícolas
• Dessalinização de proteínas e peptídeos
• Fracionamento de lipídios
• Vitaminas solúveis em água e gordura