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Cromatografia em camada fina

Placas para TLC com gel de sílica mostrando pontos coloridos claramente separados

A cromatografia em camada fina (TLC) é um método com base em afinidade usado para separar os compostos em uma mistura. A TLC é um método de separação altamente versátil que é amplamente utilizado para análise qualitativa e quantitativa de amostras. A TLC pode ser usada para analisar praticamente qualquer classe de substância, incluindo pesticidas, esteroides, alcaloides, lipídios, nucleotídeos, glicosídeos, carboidratos e ácidos graxos.  

Na TLC, a fase estacionária é uma camada fina de material adsorvente, geralmente gel de sílica ou óxido de alumínio, que reveste a superfície de uma placa inerte, em geral de vidro, plástico ou alumínio. A amostra é aplicada em uma extremidade da placa de TLC e colocada verticalmente em uma câmara fechada com um solvente orgânico (fase móvel). A fase móvel percorre o trajeto em direção ao topo da placa por forças capilares e os componentes da amostra migram distâncias variáveis com base em suas afinidades diferenciais pelas fases estacionária e móvel. Quando o solvente atinge a parte superior da placa, ela é removida da câmara de revelação e seca. Os componentes separados aparecem como pontos na placa e o fator de retenção (Rf) de cada componente é avaliado.


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Processos e princípios da TLC

A TLC se baseia no princípio da cromatografia clássica, em que os componentes da mistura são separados entre uma fase estacionária fixa e uma fase móvel líquida por afinidades diferenciais entre as duas fases. 

Fator de retenção para TLC (Rf)

O fator de retenção (Rf) é usado para medir o movimento de compostos ao longo da placa de TLC. Rf é definido como a distância percorrida por um componente individual dividida pela distância total percorrida pelo solvente. Seu valor é sempre entre zero e um.

Rdistância percorrida pelo componente
distância percorrida pelo solvente


Em geral, quanto mais forte for a ligação de um componente ao adsorvente da fase estacionária, mais lentamente ele percorre o trajeto em direção ao topo da placa de TLC. Como os adsorventes de TLC são tipicamente polares, compostos não polares tendem a realizar o trajeto até o topo da placa mais rapidamente, resultando em valores de Rf maiores, enquanto os compostos polares tendem a se mover lentamente e têm valores de Rf menores.

Aplicações da TLC

A TLC é amplamente usada em diversos setores e áreas de pesquisa, inclusive farmacêuticos, testes clínicos, toxicologia ambiental, alimentar, análise de água e pesticidas, além de cosméticos. As aplicações típicas da TLC incluem:

  • Análise de resíduos de medicamentos e antibióticos em alimentos e amostras ambientais
  • Identificação e quantificação de cores, ingredientes, conservantes e adoçantes em produtos alimentícios e cosméticos
  • Controle de qualidade e teste de pureza de formulações farmacêuticas
  • Triagem rápida e de alto rendimento antes de HPLC
  • Exame de reações químicas para conclusão



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