Análise de imagens e imagens de células vivas

Sistemas de imagem de células vivas

Uma variedade de técnicas é utilizada para visualizar as estruturas complexas e o comportamento das células. Nas análises estáticas, as células são fixadas e coradas, o que requer a morte das células e, portanto, a captura de um único instante no tempo celular. Embora as técnicas estáticas sejam adequadas para algumas aplicações, elas não fornecem informações sobre as atividades celulares. Abordagens dinâmicas com células vivas facilitam a visualização da estrutura, do comportamento ou da composição em células vivas, sem a coragem tradicional. Essas técnicas são ideais para aplicações que precisam simular condições in vivo, bem como para o desenvolvimento de ensaios preditivos para triagem de medicamentos.

Os sistemas de imagem de células vivas utilizam óptica avançada, controle ambiental e reagentes que permitem estudos de longo prazo de células de mamíferos, bactérias e leveduras. Os sistemas de cultura e imagem que também empregam microfluídica permitem o controle preciso do microambiente de cultura, como fluxo, mistura de gases e temperatura, ao mesmo tempo em que limitam o estresse físico nas células. A imagem e a análise de células vivas são adequadas para uma variedade de aplicações, incluindo hipóxia, migração celular, cultura celular 3D, dinâmica do citoesqueleto e tráfego de proteínas. Sistemas avançados automatizam as condições de cultura, a administração e a retirada de tratamentos e os intervalos de imagem para criar imagens que podem ser apresentadas como imagens estáticas ou dados de vídeo.

Reagentes para imagem de células vivas

Os meios e suplementos para imagem de células vivas são projetados para proteger as células contra danos celulares induzidos pela luz durante experimentos com intervalos de tempo. Esses reagentes também são formulados para apresentar baixa autofluorescência e fotodescoloração, o que melhora significativamente a qualidade das imagens fluorescentes de células vivas.

Está disponível uma variedade de corantes para células vivas, destinados ao estudo dos processos dinâmicos das células vivas. Os corantes fluorescentes para organelas em células vivas permitem a coloração seletiva de organelas específicas, como a membrana celular, o núcleo, o citoplasma, as mitocôndrias, os lisossomos, o retículo endoplasmático (RE), o aparelho de Golgi e as proteínas do citoesqueleto, tudo isso sem aumento da citotoxicidade. O uso de corantes para organelas como contra-corantes na imagem de células vivas também é útil em estudos funcionais.

Biossensores com GFP e RFP podem ser usados para detectar uma proteína específica, bem como a localização subcelular dessa proteína em células vivas, seja por meio de microscopia de fluorescência ou captura de vídeo em time-lapse. Os sistemas de vetores lentivirais são uma ferramenta popular para a introdução de genes e produtos gênicos nas células, com muitas vantagens em relação à transfecção baseada em agentes químicos. Além da detecção de organelas, corantes permeáveis às células vivas são utilizados para aplicações como detecção de apoptose, viabilidade celular, saúde celular, hipóxia, estudos de espécies reativas de oxigênio, imagem com indicadores de cálcio e experimentos com células neurais ou-tronco.