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Kit de imunoprecipitação da cromatina EZ-Magna ChIP^® A/G

Single day chromatin immunoprecipitation (ChIP) kit containing all necessary reagents to perform 22 individual chromatin immunoprecipitation (ChIP) reactions using magnetic A/G beads. Control primers included.

• Sinônimo(s): Magnetic ChIP Kit, Magnetic Chromatin Immunoprecipitation
• UNSPSC Code: 12161503
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32161000

Propriedades

• Quality Level: 100
• manufacturer/tradename: Magna ChIP^®
• technique(s): immunoprecipitation (IP): suitable
• shipped in: dry ice

Descrição

General description

A imunoprecipitação de cromatina (ChIP) é uma técnica poderosa para mapear a distribuição in vivo de proteínas associadas ao DNA cromossômico. Essas proteínas podem ser subunidades de histona e modificações pós-traducionais ou outras proteínas associadas à cromatina, como fatores de transcrição, reguladores de cromatina etc. Além disso, a ChIP pode ser usada para identificar as regiões do genoma associadas a essas proteínas ou, ao invés disso, identificar proteínas associadas a uma região específica do genoma. A metodologia de ChIP muitas vezes envolve a reticulação proteína-DNA e proteína-proteína, fragmentação da cromatina reticulada e posterior imunoprecipitação da cromatina com um anticorpo específico para uma proteína-alvo. Os fragmentos de DNA isolados no complexo com a proteína-alvo podem ser identificados por vários métodos, incluindo PCR, microarranjo de DNA e sequenciamento de DNA. PCR padrão ou quantitativa pode ser realizada para verificar se uma sequência específica de DNA (o gene ou região do genoma) está associada à proteína de interesse. A combinação de ChIP e promotor ou microarranjos de mosaico genômico (ChIP-chip) permite a identificação em todo o genoma de sítios de ligação ao DNA para proteínas associadas à cromatina com resolução precisa. Alternativamente, o sequenciamento de alto rendimento de bibliotecas construídas a partir do DNA cromossômico imunoprecipitado (ChIP-Seq) é uma alternativa poderosa ao ChIP-chip para mapear as interações entre proteínas e o DNA nos genomas de mamíferos.

Diferentemente dos protocolos de ChIP padrão, que podem ser trabalhosos e demorados, o protocolo do kit de ChIP Magna pode reduzir o tempo necessário para realizar um experimento de ChIP de três dias para um. Além disso, quanto menor o volume de reação de ChIP do Magna, maior a concentração relativa do anticorpo, o que permite que a reação de ChIP seja realizada com quantidades menores de anticorpo e de cromatina cisalhada. Por fim, uma vez que este kit usa uma mistura de esferas de proteína A e proteína G, pode ser usada uma gama mais ampla de isotipos de anticorpos que com A ou G isoladamente. Isso permite que uma variedade maior de anticorpos seja usada e evita a necessidade de comprar kits separados para imunoprecipitação baseada em proteína A e proteína G. Como os kits de ChIP Magna usam esferas paramagnéticas, eles são compatíveis com plataformas automatizadas de alto rendimento, possibilitando, assim, que seja realizado um grande número de reações de ChIP simultaneamente. Características e benefícios:

• O protocolo rápido baseado em esferas magnéticas permite a realização de ChIP no prazo de apenas 1 dia
• A mistura de esferas de proteínas A+G permite que a realização de ChIP com uma gama mais ampla de anticorpos que com a proteína A ou G isoladamente
• Anticorpos de controle negativo e positivo e conjunto de primers de controle para simplificar a validação do procedimento experimental
• Inclui colunas para centrífuga para facilitar a purificação do DNA e torná-la mais confiável, eliminando a necessidade de extrações confusas com fenol-clorofórmio
• Kit completo com todos os reagentes necessários para produzir resultados confiáveis e reprodutíveis
• Compatível com conjuntos de anticorpo e primers validados para ChIPAb+

A imunoprecipitação da cromatina (ChIP) é uma técnica importante que permite a análise de interações in vivo entre proteínas e o DNA genômico. Qualquer proteína que se liga ao DNA ou associada à cromatina pode ser analisada com esta técnica, contanto que exista um bom anticorpo para a proteína. É possível medir proteínas diferentes localizadas em uma região específica do genoma ou a distribuição de uma proteína específica em todo o genoma. Outra aplicação poderosa dessa técnica é analisar as alterações nas modificações de histonas que se correlacionam com processos, como transcrição, mitose ou reparo do DNA.

Application

Categoria de pesquisa
Epigenética e função nuclear

Usado para detectar/quantificar: Proteínas A+G

Packaging

Capacidade do kit: 22 ensaios de imunoprecipitação da cromatina

Physical form

Duas caixas contendo todos os reagentes necessários para realizar 22 reações de imunoprecipitação da cromatina (ChIP) individuais. Os tampões fornecidos são suficientes para gerar cromatina de até cinco placas de 15 cm com células cultivadas, sendo que cada placa fornece até 10 preparados de cromatina (varia com o tipo de célula e de ensaio).

Preparation Note

Após o recebimento, armazene os componentes nas temperaturas indicadas nos rótulos. Os componentes do kit são estáveis por 1 ano a partir da data de envio quando armazenados conforme indicado.

Other Notes

Esferas magnéticas de proteínas A/G

Tampão de diluição para ChIP

Tampão de lavagem com baixo teor de sal

Tampão de lavagem com alto teor de sal

Tampão de lavagem com LiCl

Tampão TE

Tampão de lise celular

Tampão de lise nuclear

Tampão de eluição para ChIP (sem proteinase K)

Proteinase K

RNase A

Glicina 10X

PBS 10X

Coquetel inibidor de proteases II

AntiRNA polimerase II, clone CTD4H8

IgG de camundongo normal

Primers de controle

Filtros de centrifugação

Tubos de coleta

Reagente de ligação A

Reagente de lavagem B

Reagente de eluição C

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.

Informações de segurança

• signalword: Danger
• Classe de armazenamento: 3 - Flammable liquids
• flash_point_f: 55.4 °F
• flash_point_c: 13 °C
• pictograms: GHS02,GHS08,GHS07,GHS09
• hcodes: H225,H302,H315,H319,H334,H411,EUH430
• pcodes: P201 - P202 - P210 - P273 - P391 - P405 - P501
• Hazard Classifications: Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
• wgk: WGK 3