Marcadores de proteínas
![O gráfico exibe as diferenças de peso molecular (kDa) do padrão de proteínas colorido mPAGE® quando separado em diferentes químicas de gel. O padrão de proteínas colorido mPAGE® consiste em 10 bandas coloridas. São exibidos os padrões de migração e o peso molecular aparente para quatro químicas de gel: géis pré-moldados mPAGE® Bis Tris, mPAGE® LUX Bis-Tris, mPAGE® TurboMix Bis-Tris e Tris-Glicina. O peso molecular aparente para todas as químicas de gel Bis-Tris é apresentado para o tampão de corrida MOPS e MES. As faixas de separação e o peso molecular aparente do padrão de proteínas colorido dependem da química do gel e da escolha do tampão de corrida; gel pré-moldado mPAGE® com tampão de corrida MOPS [242 kDa–10 kDa], gel pré-moldado mPAGE® com tampão de corrida MES [257 kDa–10 kDa], gel moldado à mão mPAGE® LUX com tampão de corrida MOPS [288 kDa–10 kDa], gel moldado à mão mPAGE® LUX com tampão de corrida MES [291 kDa–10 kDa], gel moldado à mão mPAGE® TurboMix com tampão de corrida MOPS [259 kDa–10 kDa], gel moldado à mão mPAGE® TurboMix com tampão de corrida MES [275 kDa–10 kDa] e géis moldados à mão Tris-Glicina com tampão Tris-Glicina [259–10 kDa]. O padrão de proteínas colorido separado em géis Bis-Tris usando o tampão de corrida MOPS normalmente migra mais para dentro do gel do que com o tampão de corrida MES para uma determinada química de gel. Para um cálculo mais exato do peso molecular, sempre utilize um marcador de peso molecular sem coloração.](/deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/protein-electrophoresis-and-western-blotting/migration-differences/migration-differences.jpg "Migration differences of mPAGE Color Protein Standard on 12% gel chemistries (kDa)")
Diferenças de migração do padrão de proteínas colorido mPAGE® em químicas de gel a 12% (kDa)
Marcadores de peso molecular de proteínas, às vezes chamados de padrões de proteínas ou marcadores de proteínas, são usados para estimar o peso molecular de proteínas de interesse e monitorar o progresso da separação eletroforética ou transferência em western blot. Os marcadores de peso molecular não corados, de modo geral, consistem em uma mistura de proteínas nativas ou recombinantes purificadas de pesos moleculares definidos. Visualizar sua localização em um gel ou membrana requer uma etapa de coloração. Os marcadores de proteínas pré-corados permitem o fácil rastreamento da separação eletroforética e eficiência de transferência. Padrões individuais de proteínas também estão disponíveis para aplicações de eletroforese de proteínas, focalização isoelétrica e PAGE bidimensional.
| Visão geral da seção | |
Produtos
| Se você gostaria de… | Usar.... | Faixa de peso molecular | Pré-corado | Fornecido como | |
|---|---|---|---|---|---|
| Separar proteínas muito pequenas | Marcador de cores de faixa ultrabaixa (C6210) | 1-27 kDa | (6 bandas) | Sim, multicolorido | Líquido |
| Marcador de peso molecular de faixa ultrabaixa (M3546) | 1-27 kDa | (6 bandas) | Não | Líquido | |
| Separar proteínas muito pequenas e médias | SigmaMarker (baixo) (S8445) | 7-66 kDa | (7 bandas) | Não | Pó |
| SigmaMarker (amplo) (M3913) | 7-200 kDa | (12 bandas) | Não | Pó | |
| Acompanhe facilmente a progressão do gel para proteínas de gama média | Padrão de proteína de cor mPAGE® (MPSTD4) | 10-203 kDa | (10 bandas) | Sim, multicolorido | Líquido |
| Marcador de eletroforese ColorBurst™ (C1992) | 8-220 kDa | (8 bandas) | Sim, multicolorido | Líquido | |
| Marcador de proteína pré-corada BLUeye (94964) | 11-245 kDa | (12 bandas) | Sim, multicolorido | Líquido | |
| Marcador de peso molecular pré-corado (SDS7B2) | 27-180 kDa | (7 bandas) | Sim, cor única | Pó | |
| Medir com precisão o tamanho da proteína usando a coloração Coomassie | Padrão de proteínas não coradas mPAGE® (MPSTD3) | 10-200 kDa | (12 bandas) | Não | Líquido |
| Marcadores de proteína Perfect, 10-225 kDa (69079) | 10-225 kDa | (9 bandas) | Não | Líquido | |
| Marcadores de proteína Perfect, 15-150 kDa (69149-M) | 15-150 kDa | (7 bandas) | Não | Líquido | |
| Visualizar o marcador ao usar reagentes HRP-ECL | Padrão de proteína para western blot mPAGE® (MPSTD2) | 20-120 kDa | (7 bandas) | Não | Líquido |
| Marcadores de proteínas Perfect para western blot (69959) | 15-150 kDa | (7 bandas) | Não | Líquido | |
| Estudar proteínas biotiniladas | Marcador de peso molecular biotinilado (B2787) | 7-180 kDa | (9 bandas) | Não | Pó |
| Separar proteínas muito grandes | Kit para pesos moleculares 14000-500000 não desnaturante (MWND500) | 14-545 kDa | (7 bandas) | Não | Pó |
Padrões de proteínas coloridos mPAGE®
Padrões de proteínas mPAGE®
- Os padrões de proteínas para western blot mPAGE® consistem em sete proteínas recombinantes com 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa e 120 kDa, com um sítio de ligação à IgG que se liga à maioria dos anticorpos. Isso possibilita a visualização tanto do marcador de proteína quanto das proteínas da amostra no mesmo western blot, sem reagentes adicionais.
- Os padrões de proteínas coloridos mPAGE® incluem uma mistura de dez proteínas pré-coradas, altamente purificadas, que variam de 10 kDa a 203 kDa, acopladas por ligações covalentes a diferentes cromóforos. Os padrões de proteínas coloridos mPAGE® são projetados para possibilitar a observação da separação das proteínas durante a análise por SDS-PAGE, verificar a eficiência de transferências de western blot nas membranas e determinar aproximadamente o tamanho de proteínas.
- Os padrões de proteínas não corados mPAGE® incluem uma mistura de doze proteínas recombinantes não coradas que variam de 10 kDa a 200 kDa. As bandas de 85 kDa, 25 kDa e 10 kDa têm maior intensidade para servir como pontos de referência. Os padrões de proteína não corados mPAGE® são adequados para determinar o peso molecular após análises de SDS-PAGE ou western blot e servem como padrões para calibrar a mobilidade de marcadores pré-corados.
Marcadores de proteínas pré-corados BLUeye
Marcadores de proteínas ColorBurst™
Marcadores de proteínas ColorBurst™
Os marcadores ColorBurst™ são compostos de oito polipeptídeos que foram quimicamente reduzidos e conjugados a corantes de cores brilhantes. Os marcadores ColorBurst™ podem ser usados para estimar pesos moleculares das amostras, monitorar o progresso de uma corrida eletroforética ou confirmar a conclusão de eletroblots.
Marcadores de proteínas SigmaMarker™
Os marcadores de proteínas SigmaMarker™ são projetados para uso com SDS-PAGE e abrangem o intervalo de pesos moleculares comuns à maioria das proteínas ou suas subunidades. Estes marcadores de amplo alcance na faixa alta e baixa são liofilizados com tampão de amostra para que estejam prontos para uso após a reconstituição com água desionizada. Os marcadores são formulados para produzir uma distribuição de bandas bem definidas de intensidade aproximadamente igual após a eletroforese e coloração com azul de coomassie.
Marcadores de proteínas de alcance na faixa ultrabaixa
Marcadores de proteínas Perfect
Os marcadores de proteínas Perfect foram projetados para uso de rotina em SDS-PAGE para permitir a determinação de tamanho de amostras desconhecidas com alta precisão. Ao contrário de muitos marcadores convencionais (p. ex., ovalbumina, albumina sérica), os marcadores de proteínas Perfect não contêm oligossacarídeos que causam migração anômala, bandas heterogêneas "difusas" ou induzem a estimativas imprecisas de tamanho. Estes marcadores são otimizados para uso com o corante azul de coomassie, mas quantidades ajustadas também podem ser usadas com outros métodos de coloração de gel, incluindo coloração com prata e coloração com corantes fluorescentes.
Marcadores de proteínas de alcance na faixa ultrabaixa
Marcadores de peso molecular na faixa ultrabaixa (P.M. de 1.060 a 26.600 Da foram usados como marcadores de proteínas em SDS-PAGE e western blot. Recomenda-se uma etapa de fixação.
Marcadores de proteínas não desnaturantes
Os marcadores não desnaturantes foram usados como padrões para PAGE nativa, bem como para calibrar colunas para cromatografia de exclusão em gel.
Marcadores biotinilados
A mistura padrão de pesos moleculares biotinilados contém proteínas que são conjugadas com biotina para uso tanto como padrões para SDS-PAGE quanto como padrões para western blot. A visualização é realizada usando estreptavidina-peroxidase com um substrato colorimétrico ou luminescente apropriado. Esses marcadores podem ser detectados simultaneamente com procedimentos de imunocoloração.
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