A purificação de proteínas recombinantes por cromatografia de afinidade por cauda específica é uma tecnologia comprovada que resulta no reconhecimento e purificação altamente específicos de proteínas recombinantes. A expressão, purificação e detecção de proteínas recombinantes pode ser um empreendimento longo e demorado. Dependendo da proteína de interesse e do sistema de expressão, caudas de proteínas podem ser adicionadas para melhorar o desfecho de etapas comuns, incluindo a solubilidade das proteínas durante a expressão, purificação por cromatografia de afinidade ou imunodetecção após isolamento e purificação. Oferecemos colunas de afinidade e resinas para várias caudas de fusão em vários formatos, incluindo esferas magnéticas, colunas empacotadas e pastas de resina de agarose, de modo a garantir a disponibilidade de produtos para todas as escalas e aplicações.
Uma ampla gama de meios para cromatografia Cytiva™ Amersham está disponível para purificar proteínas usando métodos manuais ou automatizados. Os formatos pré-empacotados incluem colunas por gravidade, colunas para centrífuga, placas de 96 poços e colunas pré-empacotadas para uso com sistemas de cromatografia automatizados.
Esferas de agarose e géis de afinidade possibilitam a purificação de proteínas marcadas por fusão usando ligantes reticulados com agarose em esferas. Boas para uso em purificações de pequena a grande escala em condições nativas, desnaturantes ou levemente redutoras, essas resinas são adequadas para purificação em colunas de fluxo por gravidade, centrifugação em baixa velocidade em processamento em lotes e procedimentos de cromatografia sob baixa pressão, pois as esferas e géis são projetados para pressões mais baixas. Os géis de afinidade EZview™ incorporam um corante vermelho que permite ao usuário diferenciar facilmente o pélete do sobrenadante, diminuindo a perda de proteína durante a purificação do lote. Os kits de imunoprecipitação incluem géis de afinidade, minicolunas para centrífuga e reagente de lise, e são especialmente projetados para possibilitar recuperação máxima de proteínas a partir de imunoprecipitados.
Os géis de afinidade de alta vazão e de agarose Superflow usam esferas de agarose altamente reticuladas que podem suportar pressões mais altas em comparação com as resinas de esferas de agarose padrão. Isso torna essas resinas adequadas para métodos de purificação por cromatografia líquida de proteínas rápida (FPLC). Os géis de afinidade de alta vazão e de agarose Superflow são recomendados para purificação de escala média a grande.
As esferas magnéticas são usadas para purificar proteínas recombinantes marcadas por fusão usando um suporte ou plataforma magnética para separar as esferas das frações de lavagem e eluição. Este procedimento possibilita o processamento rápido em condições nativas ou desnaturantes em segundos, e é adequado para operações de baixo rendimento usando tubos de microcentrífuga únicos, ou de rendimento mais alto, usando placas de 96 poços e automação.
Os kits de purificação BugBuster® combinam resina de afinidade, tampões de lavagem, tampões de eluição e reagente de extração para o preparo conveniente de extratos de células solúveis e purificação por afinidade de proteínas de fusão marcadas provenientes de E. coli.
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