[Accéder au contenu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr) Produits Panier0 CAFR Produits ProduitsApplicationsServicesRessourcesSoutien [Connexion / S'inscrire](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Recherche de commande](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/order-lookup) [Commande rapide](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/quick-order) Panier0 [Accueil](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr)[Applications](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/applications)[Génomique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/applications/genomics)Applications de la réaction en chaîne par polymérase # Applications de la réaction en chaîne par polymérase (PCR)  La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une technique fondamentale et puissante de biologie moléculaire qui constitue une méthode *in vitro* efficace et rapide pour l’amplification enzymatique de séquences spécifiques d’ADN ou d’ARN provenant de diverses sources. Une PCR standard comprend l’ADN cible, un ensemble d’amorces oligonucléotidiques synthétiques qui encadrent la séquence d’ADN cible, une ADN polymérase thermostable (généralement la Taq polymérase) et des nucléotides. À l'aide de thermocycleurs, chaque cycle d'amplification comporte trois étapes : la dénaturation de l'ADN double brin (ADNdb) en deux brins simples distincts, l'hybridation des amorces à la séquence d'ADN cible, et l'extension, au cours de laquelle l'ADN polymérase prolonge l'ADN à partir des amorces, créant ainsi un nouvel ADN double brin composé d'un ancien brin et d'un nouveau brin. Les brins synthétisés au cours d’un cycle servent de matrice pour le cycle suivant, ce qui permet de multiplier par un million la quantité d’ADN en seulement 20 cycles. * * * ## Produits associés Slide 1 of 9 1 of 2 [ \ Roche \ RNAINH-RO \ Inhibiteur de RNases Protector](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/rnainhro) Aperçu rapide [ \ Sigma-Aldrich \ AMPD1 \ DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/sigma/ampd1) Aperçu rapide [ \ Sigma-Aldrich \ RDRT \ ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/sigma/rdrt) Aperçu rapide [ \ Sigma-Aldrich \ STR1 \ Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/sigma/str1) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSUPMMRO \ Mélange maître FastStart Universal Probe (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/fsupmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSUSGMMRO \ Mélange maître SYBR Green universel FastStart (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/fsusgmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSSGMMRO \ FastStart SYBR Green Master](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/fssgmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSTMPMMRO \ FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/fstmpmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ EAGLETMMRO \ EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/product/roche/eagletmmro) Aperçu rapide * * * ## Catégories à la une [](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [Clonage moléculaire et expression protéique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) Méthodes et protocoles de clonage moléculaire et d'expression protéique permettant un clonage fiable et une expression protéique robuste à partir de vecteurs d'expression protéique issus d'insectes, de bactéries et de mammifères. [Produits de la boutique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [Épigénétique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) Réactifs et ressources épigénétiques destinés à l'étude des espèces d'ARN, de la méthylation de l'ADN, des modifications de la chromatine et des modifications des histones. [Produits de la boutique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) [Microbiome](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) Analyse complète du microbiome intestinal : découvrez une solution globale couvrant la préparation des échantillons, le séquençage, la bio-informatique et les statistiques. Du séquençage 16S au séquençage du génome complet (WGS). [Produits de la boutique](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) * * * Présentation générale Articles et protocoles connexes Assistance ## PCR par transcriptase inverse (RT-PCR) La RT-PCR, ou PCR par transcriptase inverse, est une variante de la technique PCR standard qui permet l'amplification d'ARNm spécifiques obtenus à partir d'échantillons de très petite taille. Elle élimine le besoin du fastidieux processus de purification de l'ARNm requis par les techniques de clonage conventionnelles. Avec la RT-PCR, on utilise, en plus des réactifs PCR standard, une transcriptase inverse et un échantillon d'ARN. Le mélange réactionnel est chauffé à 37 °C, ce qui permet la production d’une copie d’ADNc complémentaire à partir de l’échantillon d’ARN par la transcriptase inverse. Cet ADNc s’hybride ensuite à l’une des amorces, ce qui conduit à la synthèse du premier brin. La PCR standard se poursuit ensuite, aboutissant finalement à la production d’ADN double brin. La RT-PCR est souvent associée à la PCR en temps réel (qPCR), largement utilisée pour la quantification des niveaux de transcrits dans les cellules et les tissus. ## PCR « Hot Start » La PCR «Hot Start» est une technologie qui inhibe l’activité de la Taq polymérase en mode «Hot Start» ou l’incorporation de dNTP modifiés pendant la mise en place de la réaction, jusqu’à ce qu’une étape d’activation thermique ait lieu. Diverses méthodes permettent d’inhiber l’activité de la polymérase en mode «Hot Start», notamment les méthodes par modification chimique, par anticorps et par aptamères.  ## PCR en point final pour une amplification longue et précise des cibles La PCR en point final est souvent utilisée pour détecter la présence de cibles et déterminer leur abondance relative à la fin de la réaction. La longueur limitée des séquences produites lors d’une PCR standard, environ 5 kb, est en partie surmontée grâce à l’incorporation de facteurs supplémentaires qui assurent une activité de « correction ». La PCR longue et précise (LA) intègre l’utilisation d’une deuxième polymérase thermostable dotée d’une exonucléase 3′→5′ pour réparer les erreurs d’incorporation de nucléotides terminaux, ce qui se traduit par une fidélité considérablement accrue et la capacité d’amplifier des cibles d’ADN pouvant atteindre 40 kb de longueur. [](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [Vous recherchez des informations plus précises ?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Consultez notre moteur de recherche de documents pour trouver des fiches techniques, des certificats et de la documentation technique. [Rechercher des documents](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Articles connexes - [Troubleshooting PCR and RT-PCR Amplification](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) This page shows PCR and RT-PCR amplification troubleshooting. - [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. - [Ethidium Bromide](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide is a well-known and widely used fluorescent dye in biotechnology research. - [Réaction en chaîne par polymérase (PCR)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est l'une des techniques les plus couramment utilisées en biologie moléculaire. Le procédé de PCR implique trois étapes principales : la dénaturation, l'hybridation des amorces et l'élongation - [Hot Start PCR](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/hot-start-pcr) The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields. - [Tout afficher (62)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Protocoles associés - [Protocole PCR standard](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/technical-documents/protocol/genomics/pcr/standard-pcr) Découvrez les étapes du protocole standard de PCR et consultez les listes de réactifs ou les paramètres de cycle. Cette méthode d'amplification de l'ADN par PCR de routine utilise la Taq ADN polymérase standard. - [Protocole d'hybridation d'oligonucléotides](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/technical-documents/protocol/genomics/pcr/annealing-oligos) L'hybridation est l'opération qui consiste à chauffer puis à refroidir deux oligonucléotides monocaténaires de séquences complémentaires. - [Oligonucleotide Melting Temperature](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/oligos-melting-temp) Learn about methods for calculating oligonucleotide melting temperature (Tm). - [PCR/qPCR/dPCR Assay Design](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design) PCR workflow's variability influenced by sample source, reverse transcription, and assay design, impacting reproducibility. - [REDExtract-N-Amp™ Tissue PCR Kit Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/redextract-n-amp) Extract-N-Amp kit protocol provides rapid DNA extraction yielding PCR-ready samples in 15 minutes with optimized PCR ReadyMix. - [Tout afficher (61)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### Découvrez d'autres articles et protocoles Saisir des mots-clés Rechercher ## Comment pouvons-nous vous aider ? Si vous avez des questions, veuillez envoyer une [demande d'assistance](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/support/customer-support) ou contacter notre service client : Envoyez un e-mail à [custserv@sial.com](mailto:custserv@sial.com) ou appelez le +1 (800) 244-1173 ## Assistance supplémentaire - [Recherche de chromatogrammes](https://www.sigmaaldrich.com/chromatogram-search) Utilisez la fonction « Recherche de chromatogrammes » pour identifier les composés inconnus présents dans votre échantillon. - [Calculatrices et applications](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/support/calculators-and-apps) Web Toolbox - outils et ressources de recherche scientifique pour la chimie analytique, les sciences de la vie, la synthèse chimique et la science des matériaux. - [Demande d'assistance client](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/support/customer-support) Support client, y compris l'aide pour les commandes, les produits, les comptes et les problèmes techniques du site Web. - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Consultez notre Foire aux questions pour trouver les réponses aux questions les plus fréquentes concernant nos produits et services. * * * __Articles à la une__ [Troubleshooting PCR and RT-PCR Amplification](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) This page shows PCR and RT-PCR amplification troubleshooting. [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. [Ethidium Bromide](https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide is a well-known and widely used fluorescent dye in biotechnology research. [Réaction en chaîne par polymérase (PCR)](https://www.sigmaaldrich.com/CA/fr/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est l'une des techniques les plus couramment utilisées en biologie moléculaire. 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