Contrôle de stérilité

Les procédures de contrôle de stérilité sont appliquées aux produits dans de nombreux secteurs, notamment chez les fabricants de produits alimentaires et de boissons, mais les principaux secteurs concernés sont ceux de l'industrie pharmaceutique et du secteur médical, où le contrôle de stérilité des produits reste une tâche essentielle et courante pour les microbiologistes.

• Méthodes de contrôle de stérilité dans le secteur pharmaceutique
• Méthodes de contrôle de stérilité pour les dispositifs médicaux
• Processus de contrôle de stérilité

Méthodes de contrôle de stérilité des produits pharmaceutiques

Les méthodes officielles de contrôle de stérilité des produits pharmaceutiques exigent que les échantillons soient mis en culture dans deux milieux distincts. Deux types de milieux de culture différents sont utilisés dans les essais de stérilité afin de favoriser la croissance des anaérobies résiduels, ainsi que des aérobies et des champignons. Le milieu fluide au thioglycolate (FTM) est généralement utilisé pour cultiver les bactéries anaérobies et certaines bactéries aérobies, tandis que le milieu à base de digest de caséine de soja (SCDM) est généralement utilisé pour cultiver les champignons et les bactéries aérobies. Les échantillons sont incubés pendant 14 jours à 32,5 °C et 22,5 °C respectivement, avant d'être examinés. Toute turbidité dans les milieux de culture peut indiquer une croissance et doit faire l'objet d'une analyse. Il existe deux méthodes recommandées pour les essais de stérilité des produits pharmaceutiques : la filtration sur membrane et l'inoculation directe.

Test de stérilité par filtration sur membrane

Le test de stérilité par filtration sur membrane est la méthode réglementaire de choix pour les produits pharmaceutiques filtrables, comme indiqué dans l'USP <71>, la Pharmacopée européenne <2.6.1> et la Pharmacopée japonaise <4.06>. Les échantillons sont passés à travers un filtre à membrane de 0,45 µm dans une cartouche de filtration, puis un milieu de culture est ajouté pour l'incubation. Cette méthode de contrôle de stérilité offre une sensibilité accrue par rapport aux autres méthodes, car l'échantillon entier ou un échantillon composite est passé à travers un seul filtre. La filtration permet également d'éliminer les composants de l'échantillon susceptibles de causer une turbidité ou d'inhiber la croissance, tels que les antibiotiques ou les conservateurs.

Test de stérilité par inoculation directe

Dans le cas de l'inoculation directe, un petit volume d'échantillon est prélevé de manière aseptique de l'unité d'échantillonnage et inoculé directement dans un volume approprié de milieu de culture avant incubation. Bien que simple, cette méthode de test peut présenter des limites importantes. Seuls de petits volumes de produit peuvent être inoculés dans le milieu de culture, ce qui limite la sensibilité du test. Si l'échantillon semble trouble ou opaque après l'inoculation, il peut être difficile de distinguer la turbidité due à la croissance microbienne de celle due au produit à la fin de la période d'incubation. De plus, si le produit possède des propriétés antimicrobiennes, l'échantillon doit être neutralisé afin de ne pas inhiber la croissance microbienne.

Méthodes de test de stérilité pour les dispositifs médicaux

Le test de stérilité par transfert direct est recommandé pour les dispositifs médicaux. Le dispositif à tester est en contact direct avec le milieu d'essai pendant toute la période d'incubation, au cours de laquelle tout micro-organisme présent dans ou sur le dispositif se développera et proliférera. Par ailleurs, le test de stérilité par rinçage du produit est privilégié pour les produits comportant des tubes creux, tels que les dispositifs de transfusion et de perfusion, dont le circuit de fluide est étiqueté comme stérile. La lumière du produit est rincée avec un fluide de rinçage, l'éluat est filtré sur membrane et placé dans un milieu approprié pour l'incubation.

Déroulement du test de stérilité

1. Préparation du test — Placer le tube du dispositif de filtration sur membrane dans la pompe

2. Pré-humidification du filtre — Pré-humidifiez le dispositif de filtration sur membrane afin d'optimiser la filtration et de minimiser l'adhérence du produit au filtre.

3. Filtration de l'échantillon — Filtrer une quantité égale de produit dans les deux cartouches. Les micro-organismes sont retenus par un filtre à pores de 0,45 µm.

4. Rinçage — Tous les composés inhibiteurs sont éliminés à l'aide d'une ou plusieurs solutions de rinçage appropriées.

5. Remplissage des milieux de culture — Les dispositifs de filtration sur membrane sont remplis de milieux de culture stériles TSB et FTM.

6. Durée d'incubation — 14 jours.

7. Résultats finaux du test — Contrôle visuel de la turbidité / absence de turbidité.