CAS9GFPPRO

Sigma-Aldrich

Cas9-GFP-Protein

from Streptococcus pyogenes, fused with enhanced GFP, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS

Synonym(e):
Cas9-EGFP, SpCas9-GFP, SpCas9-EGFP

recombinant

expressed in E. coli

assay

≥90% (SDS-PAGE)

form

lyophilized powder

packaging

pkg of 1 kit (3 components)

reporter gene

GFP

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

Verwandte Kategorien

General description

Rekombinantes Cas9-GFP-Protein aus Streptococcus pyogenes (~194 kD) ist ein gebrauchsfertiges Reagens für Genome-Engineering-Experimente. In Kombination mit zielspezifischer Guide-RNA agiert Wildtyp Streptococcus pyogenes-Cas9-GFP-Protein als eine gerichtete Nuklease, die sich für die Transfektion von Zellkulturen und die beschleunigte Entwicklung von genetisch modifizierten Tieren mittels Injektion eines einzelligen Embryos eignet.
Ein am N-Terminus kondensiertes, verbessertes, grün fluoreszierendes Protein mit einem Anregungspeak bei 488 nm und Emissionspeak bei 509 nm ermöglicht die Visualisierung von transfiziertem RNP-Komplex zusätzlich zu dem Nutzen in Durchflusszytometrieanwendungen.  Das Protein enthält außerdem drei verschiedene nukleare Lokalisierungssequenzen, die für optimale Aktivität positioniert sind.

Application

  • Funktionelle Genomik
  • Targetvalidierung
  • Genome Editing
  • Fluoreszenzmikroskopie
  • Durchflusszytometrie

Features and Benefits

  • Hochspezifisch
  • Hochaktiv
  • Bereit zur Injektion/Transfektion

Packaging

  • Pkg. zu 50 μg (≥260 pmol)
  • Pkg. zu 250 μg (≥1300 pmol)

Components

Jedes Kit umfasst
  • ein Fläschchen mit lyophilisiertem rekombinantem Cas9-GFP-Protein
  • ein Fläschchen mit 1 ml 1× Verdünnungspuffer
  • ein Fläschchen mit 1 ml nukleasefreiem Wasser mit Glycerin

Principle

CRISPR/Cas-Systeme werden von Bakterien und Archaeen als Schutz vor angreifenden Viren und Plasmiden eingesetzt. Kürzlich wurde das CRISPR/Cas-System Typ II aus dem Bakterium Streptococcus pyogenes genetisch modifiziert, um in eukaryotischen Systemen unter Verwendung von zwei molekularen Komponenten zu funktionieren: ein einzelnes Cas9-Protein und eine nichtcodierende Guide-RNA (gRNA). Die Cas9-Endonuklease kann mit einer gRNA, die einen DNA-Doppelstrangbruch (DSB) an einer gewünschten Genomstelle steuert, programmiert werden. Ähnlich wie bei DBS, die durch Zinkfingernukleasen (ZFN) ausgelöst werden, aktiviert die Zelle anschließend den DNA-Reparaturprozess, entweder Non-homologous end-joining (NHEJ) oder homologe Reparatur, um den entsprechenden DSB zu heilen.

Reconstitution

Lyophilisiertes S. pyogenes Cas9-GFP-Protein sollte erneut in der Rekonstitutionslösung suspendiert werden, um die gewünschte Konzentration bereitzustellen. Tippen Sie sanft gegen das Röhrchen, um das lyophilisierte Pulver vollständig zu lösen, anschließend 10 Minuten auf Eis inkubieren und das Röhrchen schleudern, um das Material an den Boden des Röhrchens zu bringen.

Legal Information

MISSION is a registered trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

WGK Germany

WGK 3

Protokolle
Sigma-Aldrich® sgRNA, crRNA and tracrRNA come HPLC purified as standard with our performance guarantee—even for custom designs.
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Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.
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Verwandter Inhalt
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