Tris

Tris HCl

Tris HCl oder Tris-Hydrochlorid (auch bekannt als Trizma HCl) ist ein Puffermittel (saurer Puffer), das in der Molekularbiologie und Biochemie häufig verwendet wird, um den pH-Wert einer Lösung einzustellen oder zu stabilisieren. Ähnlich wie die Tris-Base ist auch Tris-HCl ein weißes kristallines Pulver mit der Summenformel C₄H₁₂ClNO₃ und einem etwas höheren Molekulargewicht von 157,60. Der entscheidende Unterschied liegt in der Zugabe von Salzsäure zur Tris-Base, die zur Bildung von Tris-HCl führt. Während Tris-Base einen pKa-Wert von etwa 8,1 hat und somit als Puffer im pH-Bereich von 7-9 fungiert, enthält Tris-HCl bereits Salzsäure. Dieser Zusatz senkt den pH-Wert, so dass Tris HCl zur Pufferung im pH-Bereich von 7,0-8,6 geeignet ist.

Tris-Base dient als vielseitiger Puffer über einen breiten pH-Bereich, während Tris HCl aufgrund seines Salzsäuregehalts einen spezifischeren pH-Bereich bietet. Die Wahl zwischen Tris und Tris HCl hängt von dem gewünschten pH-Bereich und den spezifischen Versuchs- oder Anwendungsanforderungen ab.

Tris gepufferte Kochsalzlösung (TBS)

Tris gepufferte Kochsalzlösung (TBS) ist ein Puffer, der häufig in biologischen und biochemischen Anwendungen verwendet wird. Er enthält in der Regel Tris(hydroxymethyl)aminomethan, kurz Tris, ein Puffermittel, das den pH-Wert konstant hält, und Natriumchlorid, das die notwendige Ionenstärke liefert. TBS hat einen relativ neutralen pH-Wert (etwa 7,4) und wird häufig für Anwendungen wie Western Blotting, Immunhistochemie und ELISA-Tests verwendet. TBS wird auch als Waschpuffer verwendet, um ungebundene Antikörper oder andere Reagenzien aus der Probe zu entfernen. Die Konzentration von Tris und Natriumchlorid kann je nach spezifischer Anwendung variieren, eine häufig verwendete Formulierung ist jedoch 50 mM Tris und 150 mM Natriumchlorid.

Tris-Acetat-EDTA (TAE)

TAE-Puffer ist ein weiterer häufig verwendeter Puffer in der Molekularbiologie, der Elektrophorese und für Northern und Southern Blotting. In TAE-Puffer fungiert Tris als Puffermittel, Essigsäure trägt zur Pufferkapazität bei, und EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure) wirkt als Chelatbildner. TAE wird häufig als Laufpuffer in der Agarosegel-Elektrophorese, der DNA-Fragmentanalyse, der Impulsfeld-Gelelektrophorese (zur Bestimmung der Größe von DNA-Fragmenten), der RNA-Elektrophorese und dem Nukleinsäuretransfer verwendet.

Tris-Borat-EDTA (TBE)

TBE-Puffer wird häufig zur Trennung und Analyse von DNA-Fragmenten verwendet, insbesondere um eine höhere Auflösung bei der Trennung kleinerer DNA-Fragmente zu erreichen. Im FSME-Puffer spielt die Borsäure eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung der Pufferkapazität der Lösung. FSME-Puffer wird in verschiedenen Techniken eingesetzt, darunter Agarosegel-Elektrophorese, DNA-Sequenzierung, Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Produktanalyse, Oligonukleotidanalyse, denaturierende Gelelektrophorese und in native Gelelektrophorese.

Tris-Glycin-Puffer

Tris-Glycin-Puffer ist ein häufig verwendetes Puffersystem in der Molekularbiologie, insbesondere bei der Proteinelektrophorese. Im Tris-Glycin-Puffer trägt Glycin wesentlich zur Pufferkapazität der Lösung bei und hilft, den gewünschten pH-Wert zu erreichen. Der pH-Wert des Puffers kann durch die Zugabe von HCl eingestellt werden. Tris-Glycin-Puffer wird verwendet, um Proteinproben zu resuspendieren, Proteinextrakte für die anschließende Analyse oder Lagerung zu verdünnen und ist besonders nützlich bei nicht-denaturierenden Proteinelektrophorese-Techniken, bei denen die Erhaltung der nativen Konformation der Proteine entscheidend ist. Es dient auch der isoelektrischen Fokussierung und fungiert als Puffermittel für verschiedene Proteinexperimente.

Tris-Glycin-Natriumdodecylsulfat (SDS)

Tris-Glycin-SDS-Puffer dient als Standard-Laufpuffer für SDS-PAGE, eine Technik zur Trennung und Analyse von Proteinen auf der Grundlage ihres Molekulargewichts. Dieser Puffer wird für die Quantifizierung von Proteinen, die Denaturierung von Proteinen, Western Blotting und als Teil der Probenvorbereitung für nachfolgende Analysen eingesetzt.