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Die Wahl des richtigen biologischen Puffers

Wählen Sie einen Puffer auf der Grundlage Ihrer pH-Anforderungen sowie des pKa-Werts, einem Maß für die Säurestärke, das den pH-Wert, die Konzentration und die Temperatur berücksichtigt. Darüber hinaus sind die gesetzlichen Vorschriften und Reinheitsanforderungen für Ihre Anwendung zu berücksichtigen. Die folgenden Tabellen unterstützen Sie bei der Herstellung vieler gängiger Pufferlösungen anhand von pH-Wert und pKa.

Zusätzlich zu den nachstehenden Tabellen haben wir mehrere Pufferrezepturenrechner entwickelt, die Sie bei der Herstellung Ihrer Puffer unterstützen.

TBE und TAE für die Gelelektrophorese verfügen über etwas aufwändigere Rezepturen. Wir helfen Ihnen bei der Auswahl des richtigen Produkts.

Was sind Pufferqualitäten?

Die Pufferqualität gibt die Qualität und den Grad der Verunreinigung an, die für die verschiedenen Verwendungen geeignet sind. Wir bieten sechs verschiedene Pufferqualitäten an, die für den allgemeinen Laborgebrauch, die pharmazeutische Endformulierung und -herstellung sowie für dazwischen liegende Anwendungen geeignet sind, bei denen Spurenmetalltests oder Materialien mit einem bestimmten Reinheitsgrad erforderlich sind.

Nutzbare pH-Bereiche ausgewählter biologischer Puffer Tabelle (25 °C, 0,1 M)

PufferNutzbarer pH-BereichpKa
(bei 20 °C)		pKa
(bei 25 °C)		pKa
(bei 37 °C)		ReagenzqualitätBioPerformance-zertifizierte Qualität
MES5,5–6,76,166,105,97M8250M2933
Bis-Tris5,8–7,2n/a6,506,36B9754B4429
ADA6,0–7,26,656,596,46A9883n/a
ACES6,1–7,56,886,786,54A9758A3594
PIPES6,1–7,56,806,766,66P6757P1851
MOPSO6,2–7,6n/a6,906,75M8389n/a
Bis-Tris Propan6,3–9,5n/a6,8, 9,0n/aB6755B4679
BES6,4–7,87,177,096,90B9879B4554
MOPS6,5–7,97,287,207,02M1254M3183
TES6,8–8,27,507,407,16T1375T5691
HEPES6,8–8,27,557,487,31H3375H4034
DIPSO7,0–8,2n/a7,607,35n/an/a
MOBS6,9–8,3n/a7,60n/aM3295n/a
TAPSO7,0–8,2n/a7,607,39T9269n/a
Tris oder Trizma®7,0–9,08,208,067,72T1503T6066
HEPPSO7,1–8,5n/a7,806,66n/an/a
POPSO7,2–8,5n/a7,807,63P3405n/a
TEA7,3–8,3n/a7,80n/an/an/a
EPPS7,3–8,7n/a8,00n/aE9502E0276
Tricin7,4–8,88,168,057,80T0377T5816
Gly-Gly7,5–8,9n/a8,20n/aG1002G3915
Bicin7,6–9,08,358,268,04B3876n/a
HEPBS7,6–9,0n/a8,30n/aH6903n/a
TAPS7,7-9,18,498,408,18T5130T5316
AMPD7,8–9,7n/a8,80n/aA9754n/a
TABS8,2–9,6n/a8,90n/an/an/a
AMPSO8,3–9,7n/a9,009,10A6659n/a
CHES8,6–10,09,559,499,36C2885n/a
CAPSO8,9–10,3n/a9,609,43C2278n/a
AMP9,0–10,5n/a9,70n/an/an/a
CAPS9,7–11,110,5610,4010,02C2632n/a
CABS10,0–11,4n/a10,70n/aC5580n/a

Tabelle Pufferherstellung Tris- oder Trizma® – pH-Wert im Vergleich zu Temperatur

pH bei Temperatur
5 °C25 °C37 °C
7,767,206,91
7,897,307,02
7,977,407,12
8,077,507,22
8,187,607,30
8,267,707,40
8,377,807,52
8,487,907,62
8,588,007,71
8,688,107,80
8,788,207,91
8,888,308,01
8,988,408,10
9,098,508,22
9,188,608,31
9,288,708,42
9,368,808,51
9,478,908,62
9,569,008,70
g/l für 0.05 M Lösung
Trizma® HCLTrizma® Base
7,020,67
6,850,80
6,610,97
6,351,18
6,061,39
5,721,66
5,321,97
4,882,30
4,442,65
4,022,97
3,543,34
3,073,70
2,644,03
2,214,36
1,834,65
1,504,90
1,235,13
0,965,32
0,765,47

Tabelle Herstellung Phosphatpuffer – 0.2 M-Lösung

Kaliumphosphat
monobasisch, wasserfrei g/l		Natriumphosphat dibasisch, Heptahydrat g/l23 °C pH
22,43,495,7
22,084,295,8
21,605,375,9
21,056,606,0
20,408,056,1
19,569,936,2
18,6012,076,3
17,6414,226,4
16,4416,906,5
15,0020,126,6
13,5623,346,7
12,2426,296,8
Kaliumphosphat, monobasisch,
wasserfrei g/l		Natriumphosphat,
dibasisch, Heptahydrat g/l		23 °C pH
10,8029,516,9
9,3632,737,0
7,9235,957,1
6,7238,637,2
5,5241,317,3
4,5643,467,4
3,8445,077,5
3,1246,687,6
2,5248,557,7
2,0449,097,8
1,6849,897,9
1,2750,818,0

Pufferherstellung Citronensäure – Na2HPO4, pH 2,6–7,61

Citronensäuremonohydrat, C6H8O7 • H2O, MW 210,14; 0.1 M enthält 21,01 g/l. Na2HPO4, MW 141.98; 0.2 M enthält 28,40 g/l, oder Na2HPO4 • 2H2O, MW 178,05; 0.2 M enthält 35,61 g/l.

x ml 0.1 M Citronensäure und y ml 0.2 M-Na2HPO4 gemischt

pH-Wertx ml 0.1 M Citronensäurey ml 0.2-Na2HPO4
2,689,1010,90
2,884,1515,85
3,079,4520,55
3,275,3024,70
3,471,5028,50
3,667,8032,20
3,864,5035,50
4,061,4538,55
4,258,6041,40
4,455,9044,10
4,653,2546,75
4,850,7049,30
5,048,5051,50
5,246,4053,60
5,444,2555,75
5,642,0058,00
5,839,5560,45
6,036,8563,15
6,233,9066,10
6,430,7569,25
6,627,2572,75
6,822,7577,25
7,017,6582,35
7,213,0586,95
7,49,1590,85
7,66,3593,65

Pufferherstellung Citronensäure – Natriumcitrat, pH 3,0-6,21

Citronensäuremonohydrat, C6H8O7 • H2O, MW 210,14; 0.1 M enthält 21,01 g/l. Trinatriumcitrat-Dihydrat, C6H5O7Na3 • 2H2O, MW 294,12; 0.1 M enthält 29,41 g/l.

x ml 0.1 M Citronensäure und y ml 0.1 M Trinatriumcitrat gemischt

pH-Wertx ml 0.1 M Citronensäurey ml 0.1 M Trinatriumcitrat
3,082,018,0
3,277,522,5
3,473,027,0
3,668,531,5
3,863,536,5
4,059,041,0
4,254,046,0
4,449,550,5
4,644,555,5
4,840,060,0
5,035,065,0
5,230,569,5
5,425,574,5
5,621,079,0
5,816,084,0
6,011,588,5
6,28,092,0

Pufferherstellung Natriumacetat – Essigsäure, pH 3,7– 5,61

Natriumacetat-Trihydrat, CH3COONa • 3H2O, MW 136,09; 0.2 M enthält 27,22 g/l.

x ml 0.2 M-NaOAc und y ml 0.2 M-HOAc gemischt

pH-Wert bei 18 °Cx ml 0.2 M-NaOAcy ml 0.2 M-HOAc
3,710,090,0
3,812,088,0
4,018,082,0
4,226,573,5
4,437,063,0
4,649,051,0
4,859,041,0
5,070,030,0
5,279,021,0
5,486,014,0
5,691,09,0

Pufferherstellung Na2HPO4 – NaH2PO4, pH 5,8-8,0 bei 25 °C1

Na2HPO4 • 2H2O, MW 178,05; 0.2 M enthält 35,61 g/L. Na2HPO4 • 12H2O, MW 358,22; 0.2 M enthält 71,64 g/l. NaH2PO4 • H2O, MW 138,01; 0.2 M enthält 27,6 g/l. NaH2PO4 • 2H2O, MW 156,03; 0.2 M enthält 31.21 g/l.

x ml 0.2 M Na2HPO4, y ml 0.2 M NaH2PO4; verdünnt zu 100 ml mit H2O

pH-Wert bei 25 °Cx ml 0,2 M-Na2HPO4y ml 0.2 M-NaH2PO4
5,84,046,0
6,06,1543,85
6,29,2540,75
6,413,2536,75
6,618,7531,25
6,824,525,5
7,030,519,5
7,236,014,0
7,440,59,5
7,643,56,5
7,845,754,25
8,047,352,65

Pufferherstellung Imidazol (Glyoxalin) – HCl, pH 6,2–7,8 bei 25 °C1

Imidazol, C3H4N2, MW 68,08

25 ml 0.2 M Imidazol (13,62 g/l), x ml 0.2 M HCl, zu 100 ml verdünnt mit H2O

pH-Wert bei 25 °Cx ml 0.2 M-HCl
6,221,45
6,419,9
6,617,75
6,815,2
7,012,15
7,29,3
7,46,8
7,64,65
7,83,0

Pufferherstellung Natriumcarbonat – Natriumbicarbonat, pH 9,2-10,81

Na2CO3 • 10H2O, MW 286,2; 0.1 M enthält 28.62 g/l. NaHCO3, MW 84,0; 0.1 M enthält 8.40 g/l.

x ml 0,1 M-Na2CO3 und y ml 0,1 M Na2HCO3 gemischt

20 °C37 °C
x ml 0,1 M-Na2CO3y ml 0,1 M-Na2HCO3
9,28,81090
9,49,12080
9,59,43070
9,89,54060
9,99,75050
10,19,96040
10,310,17030
10,510,38020
10,810,69010

Formeln und Gleichungen für die Pufferherstellung

Gewichtsprozent (w/v)

(% gewünschter Puffer / 100) × finales Puffervolumen (ml) = g benötigtes Ausgangsmaterial.

Molare Lösungen

gewünschte Molarität × Formelgewicht × finales Volumen Lösung (L) = Gramm benötigt

Henderson-Hasselbach-Gleichung

Henderson ph

Literatur

1.
Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..
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