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Zweifach markierte Sonden

Dual-Labeled Probes sind der häufigste Sondentyp für die qPCR. Es handelt sich um lineare Hydrolyse-Sonden, die im 5'-Nuklease-Assay mit 5'-Reporterfarbstoffen und Quenchern am 3'-Ende, an einer internen Position (zwischen den Basen 9 und 10), an einer internen Position (zwischen den Basen 9 und 10) und am 3'-Ende bzw. mit MGB, das mit EDQ am 3'-Ende verknüpft ist, verwendet werden.

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Applications of Dual-Labeled Probes

  • Microarray validation
  • Multiplexing von Zielgenen / wenige Proben
  • Pathogen detection
  • Multiplexing
  • Quantifizierung der Viruslast
  • Genexpressionsanalyse
  • Genkopiebestimmung

Perfekt für die Validierung von MISSION® siRNA und shRNA Knockdowns.

VORTEILE DES EINSATZES VON DUAL-LABELED PROBES

  • Einfaches Design für Sequenzspezifität
  • Umfangreiche Verfügbarkeit von Reporter/Löscherkombinationen
  • Erhöhte Empfindlichkeit

ADD LOCKED NUCLEIC ACID OR MGB:EDQ TO YOUR PROBE

Vorteile von Locked Nucleic Acid mit BHQ™

  • Erhöhte thermische Stabilität und Hybridisierungsspezifität
  • Größere Genauigkeit bei der SNP-Detektion, Allel-Diskriminierung und in vitro Quantifizierung oder Detektion
  • Einfachere und empfindlichere Sondendesigns für problematische Zielsequenzen 
  • Hat keine native Fluoreszenz (emittiert Wärme statt Licht), was zu einer geringeren Hintergrundfluoreszenz führt
    • /li>
  • Erhöhtes Signal-Rausch-Verhältnis und damit höhere Empfindlichkeit
  • Ermöglicht eine größere Auswahl an Reportern für das Multiplexing

Vorteile von MGB:EDQ

  • Erhöhte Spezifität der Sonden-Target-Hybridisierung, wodurch die Wahrscheinlichkeit unspezifischer Bindungen verringert wird
  • Höhere Empfindlichkeit ermöglicht die Verwendung kürzerer Sonden, was die Empfindlichkeit von qPCR-Assays erhöht
  • Die Einstellung der Schmelztemperatur ermöglicht eine Tm-Anpassung der Sonde, was für das Design von qPCR-Sonden mit optimalen Tm-Werten von Vorteil sein kann
  • Das reduzierte Hintergrundsignal trägt zu einer Verringerung der Hintergrundfluoreszenz bei, was zu einem verbesserten S:N oder Signal-Rausch-Verhältnis
  • Erhöhte Stabilität kann die Stabilität des Sonden-Target-Hybrids verbessern, wodurch die Wahrscheinlichkeit des Sondenabbaus verringert wird
  • Die Designflexibilität erweitert die Optionen für das Sondendesign und erleichtert die Erstellung effizienter qPCR-Assays
  • Verbesserte SNP-Erkennung durch Mismatch-Diskriminierung

Wie funktionieren Dual-Labeled Probes

Eine Dual-Labeled Probe ist ein einzelsträngiges Oligonukleotid, das mit zwei verschiedenen Farbstoffen markiert ist. Am 5'-Ende befindet sich ein Reporterfarbstoff und am 3'-Ende ein Quencher-Molekül. Das Quencher-Molekül hemmt die natürliche Fluoreszenzemission des Reporters durch Fluoreszenzresonanzenergietransfer (FRET). Die nachstehende Abbildung veranschaulicht den Mechanismus.

Doppelt markierte Sonden funktionieren

Der Primer wird von der Polymerase verlängert und die Sonde bindet an die spezifische DNA-Vorlage. Durch Hydrolyse wird der Reporter aus dem Sonden-Target-Hybrid freigesetzt, was zu einem Anstieg der Fluoreszenz führt. Das gemessene Fluoreszenzsignal ist direkt proportional zur Menge der Ziel-DNA.

Features of Dual-Labeled Probes

  • Amounts: 1, 3, 5, und 10 OD
  • Aufreinigung: HPLC
  • Sequenzlängen: 15 - 40 Basen
  • Qualitätskontrolle: 100% Massenspektrometrie
  • Format: Trocken in Bernsteinröhrchen geliefert
  • Benutzerdefinierte Formate verfügbar (Normalisierung, spezielle Platten usw.)

Unsere Sonden werden in einem Format geliefert, das Ihre Versuchsplanung vereinfacht.

Garantierte Renditen

Garantierte
OD Ausbeute		Anzahl
von
nmol		Anzahl
von
nmol. Anzahl.
von µg		ca. Anzahl.
of Reactions*
1432800
312962.400
5201604.000
10403208.000
*Die Schätzung basiert auf 4 nmol oder 32 µg für 1 OD und 200 nM in 25 µL Reaktion (5,0 pmol/Reaktion). Die Schätzung basiert auf einer durchschnittlichen Sequenzlänge von 25 Basen.
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Tabelle der spektralen Eigenschaften

FarbstoffMax.
EX (nm)		Max.
EM (nm)		Kompatibel
Quencher
6-FAM™495520BHQ™-1, TAMRA™, MGB:EDQ
JOE™529555BHQ™-1, TAMRA™
TET™521536BHQ™-1, TAMRA™, MGB:EDQ
Cal Fluor® Gold 5401522544BHQ™-1
HEX™2535556BHQ™-1, TAMRA™, MGB:EDQ
Cal Fluor® Orange 5602 538
559BHQ™-1
TAMRA™557583BHQ™-2
Cyanin 3549566BHQ™-2
Quasar® 5703548566BHQ™-2
Cal Fluor® Rot 5904569591BHQ™-2
ROX™586610BHQ™-2
TxRd (Sulforhodamine 101-X)597616BHQ™-2
Cyanin 5646669BHQ™-3
Quasar® 6705647670BHQ™-3
Cyanin 5.5675694BHQ™-3

1JOE/TET alternativ
2VIC® alternativ
3Cyanin 3 alternativ
4TAMRA™ alternativ
5Cyanin 5 alternativ

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Zeitplan für den Versand

Menge (OD)13510
Doppelt markierte Sonden mit Standardfarbstoffen3-5 Tage3-5 Tage3-5 Tage3-5 Tage
Dual-Labeled Locked Nucleic Acid Probes mit Standardfarbstoffen7 Tage7 Tage7 Tage7 Tage
Dual-Labeled MGB:EDQ-Sonden mit 6'-FAM™, HEX™ oder TET™ (andere Farbstoffe auf Anfrage)N/A10-12 Tage10-12 Tage10-12 Tage
Doppelt markierte Sonden mit Post-Synthese-Farbstoffen,
mit/ohne Locked Nucleic Acid
7-10 Tage7-10 Tage7-10 Tage7-10 Tage
*Die Lieferzeiten können aufgrund von internationalem Versand, Verzögerungen bei der Zollabfertigung usw. länger sein. Für große Projekte wird ein Lieferplan erstellt, der sich nach den Projektanforderungen richtet.
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