[Passa al contenuto](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [![Merck](https://www.sigmaaldrich.com/static/logos/purple/merck.svg)](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it) Prodotti Carrello0 CHIT Prodotti ProdottiApplicazioniServiziRisorseSupporto [Login / Registrati](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Ricerca di ordini](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/order-lookup) [Ordine rapido](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/quick-order) Carrello0 [Home](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it)[Applicazioni](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/applications)[Genomica](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/applications/genomics)Sequenziamento # Sequenziamento Slide 1 of 3 1 of 3 ![Metodo di sequenziamento del DNA di Sanger](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/sanger-sequencing-steps-process-diagram-01.jpg "Sanger Sequencing") ![Metodo di sequenziamento del DNA di Sanger](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/sanger-sequencing-steps-process-diagram-02.jpg "Sanger Sequencing") ![Metodo di sequenziamento del DNA di Sanger](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/sanger-sequencing-steps-process-diagram-03.jpg "Sanger Sequencing") La capacità di determinare la composizione e l’ordine degli acidi nucleici in un filamento di DNA o RNA ha profonde implicazioni per la comprensione della genetica moderna e di numerosi campi essenziali per la ricerca sulle malattie e per una migliore comprensione di tutti gli organismi. La capacità di sequenziare gli acidi nucleici non solo è utile per decifrare il codice genetico di un organismo, ma fornisce anche ai ricercatori un potente strumento, in combinazione con ulteriori tecnologie molecolari, per manipolare facilmente le sequenze di DNA e verificare tali modifiche attraverso il sequenziamento. Poiché il DNA codificante funge da informazione codificata per le proteine, i ricercatori possono ora progettare su misura proteine ricombinanti che contengono una grande varietà di elementi funzionali e sono ampiamente utilizzate per rispondere a un numero altrettanto ampio di importanti questioni di ricerca. Per ulteriori reagenti e guide sul sequenziamento dell’intero genoma, visitate la risorsa [dedicata al sequenziamento di](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/applications/genomics/next-gen-sequencing) [](https://www.sigmaaldrich.com)[nuova generazione](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/applications/genomics/next-gen-sequencing). * * * ## Prodotti correlati Slide 1 of 11 1 of 3 [![Tampone Tris-borato-EDTA BioReagent, suitable for electrophoresis, 10× concentrate](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/382/350/1a38bb7f-211b-45b8-bbdc-208d9a7e1916/640/1a38bb7f-211b-45b8-bbdc-208d9a7e1916.png) \ Sigma-Aldrich \ T4415 \ Tampone Tris-borato-EDTA](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/t4415) Visualizzazione rapida [![Taq DNA Polimerasi FastStart™ , dNTPack](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/355/758/50746615-964f-4173-acfd-d9eb6748a933/640/50746615-964f-4173-acfd-d9eb6748a933.jpg) \ Roche \ FPCRN-RO \ Taq DNA Polimerasi FastStart™ , dNTPack](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/roche/fpcrnro) Visualizzazione rapida [![Sigma-Aldrich](https://www.sigmaaldrich.com/assets/images/sigmaaldrich-no-image/sigmaaldrich-no-image_w640.png) \ Sigma-Aldrich \ P5475 \ C-CMV-24 Sequencing Primer](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/p5475) Visualizzazione rapida [![Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library Human, Virus Format](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/223/950/b171f8ca-d2e9-4881-a2b4-ce4cb90ba015/640/b171f8ca-d2e9-4881-a2b4-ce4cb90ba015.jpg) \ Sigma-Aldrich \ HSANGERV \ Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/hsangerv) Visualizzazione rapida [![Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library Human, Glycerol Format](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/335/840/fe9ad593-ee16-422e-9a23-eef2651d12f1/640/fe9ad593-ee16-422e-9a23-eef2651d12f1.jpg) \ Sigma-Aldrich \ HSANGERG \ Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/hsangerg) Visualizzazione rapida [![Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library Mouse, Glycerol Format](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/634/114/807a26ff-7b34-40eb-9c04-856371494c5c/640/807a26ff-7b34-40eb-9c04-856371494c5c.jpg) \ Sigma-Aldrich \ MSANGERG \ Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/msangerg) Visualizzazione rapida [![Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library Mouse, Virus Format](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/406/135/80f3aa56-77bb-4e50-860f-66144447193b/640/80f3aa56-77bb-4e50-860f-66144447193b.jpg) \ Sigma-Aldrich \ MSANGERV \ Sanger Arrayed Whole Genome Lentiviral CRISPR Library](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/msangerv) Visualizzazione rapida [![Kit di pulizia per PCR GenElute™ sufficient for 70 purifications](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/389/321/8121e29a-8c66-459e-ae7a-1853a9bd27f0/640/8121e29a-8c66-459e-ae7a-1853a9bd27f0.jpg) \ Sigma-Aldrich \ NA1020 \ Kit di pulizia per PCR GenElute™](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/na1020) Visualizzazione rapida [![SeqSaver™ Sequencing Premix Dilution Buffer for DNA sequencing](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/201/907/97435a76-b36f-43e3-8507-cae8f056f796/640/97435a76-b36f-43e3-8507-cae8f056f796.jpg) \ Sigma-Aldrich \ S3938 \ SeqSaver™ Sequencing Premix Dilution Buffer](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/s3938) Visualizzazione rapida [![Sigma-Aldrich](https://www.sigmaaldrich.com/assets/images/sigmaaldrich-no-image/sigmaaldrich-no-image_w640.png) \ Sigma-Aldrich \ UC9604 \ UltraClear™ Sequencing Reaction Clean-Up Kit](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/uc9604) Visualizzazione rapida [![Diffinity RapidTip® for PCR Purification](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/307/028/96136917-8794-4faa-96b1-60afa367ca3b/640/96136917-8794-4faa-96b1-60afa367ca3b.jpg) \ Sigma-Aldrich \ D1947 \ Diffinity RapidTip®](https://www.sigmaaldrich.com/CH/it/product/sigma/d1947) Visualizzazione rapida * * * Panoramica Articoli e protocolli correlati Assistenza ## Sequenziamento di Sanger Fin dall’inizio, i metodi di chimica analitica erano in grado di determinare la composizione degli acidi nucleici. Tuttavia, Fred Sanger e i suoi colleghi svilupparono dei metodi – inizialmente utilizzando frammenti digeriti marcati radioattivamente e frazionamento bidimensionale – per ottenere alcune delle prime sequenze nucleiche complete. I progressi in questo campo sono proseguiti per diversi decenni, con ogni miglioramento che andava ad arricchire una libreria sempre più ampia di proteine e genomi sequenziati. Tra questi miglioramenti figurano la separazione dei nucleotidi in base alla lunghezza mediante elettroforesi su gel seguita da elettroforesi capillare. Inoltre, l’incorporazione di nucleotidi marcati con fluorescenza e l’analisi automatizzata tramite computer di ciascun frammento di acido nucleico definiscono oggi il moderno metodo di sequenziamento Sanger. ## Metodologia di sequenziamento del DNA Sebbene i metodi di sequenziamento del DNA abbiano continuato a migliorare sin dagli albori di questa tecnologia, diversi componenti fondamentali sono ancora necessari e vengono utilizzati dalle moderne piattaforme di sequenziamento del DNA. La preparazione del DNA comprende tipicamente l’isolamento e la purificazione del DNA dall’organismo ospite. Ulteriori componenti fondamentali, tra cui basi di DNA libere, primer di DNA, basi di DNA modificate contenenti marcatori fluorescenti (basi terminatrici) e DNA polimerasi, vengono aggiunti insieme in un unico recipiente. Il recipiente contenente tutti questi componenti, attraverso una serie di fasi di riscaldamento e raffreddamento, produrrà una libreria di piccole sequenze di DNA rispetto alla sequenza completa di DNA di interesse, ciascuna terminante con una base terminatrice marcata con fluorescenza all’estremità. I nuovi filamenti di DNA contenenti i nucleotidi marcati con fluorescenza all’estremità vengono separati in base alla lunghezza, fatti passare attraverso un tubo capillare e ordinati per dimensione. Viene quindi utilizzato un laser per eccitare la base fluorescente su ciascun filamento, mentre una telecamera cattura il segnale. Infine, in genere si ricorre a un computer per assemblare le informazioni raccolte nella sequenza completa di DNA. [![Ricerca documenti](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/ecommerce/document-search.png "Ricerca documenti")](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [Cerchi informazioni più specifiche?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Visita la nostra sezione di ricerca documenti per schede tecniche, certificati e documentazione tecnica. [Trova documenti](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Articoli correlati - [Validating CRISPR/Cas9-mediated Gene Editing](https://www.sigmaaldrich.com/CH/en/technical-documents/technical-article/genomics/advanced-gene-editing/validating-crispr-cas9-mediated-gene-editing) Validate CRISPR gene editing experiments easily with Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit, ensuring successful editing. - [Ultrapure vs. DEPC Treated Water for Molecular Biology Applications](https://www.sigmaaldrich.com/CH/en/technical-documents/technical-article/genomics/dna-and-rna-purification/nuclease-free-water) Understand the benefits of ultrapure water versus DEPC treatment in DNA and RNA experiments to ensure high purity and integrity without risks. - [Water for Next-Generation Sequencing](https://www.sigmaaldrich.com/CH/en/technical-documents/technical-article/genomics/next-gen-sequencing/water-for-next-generation-sequencing) Improve NGS performance and reliability by optimizing water quality at every step of the workflow, from fragmentation to cleaning to sequencing. - [Amino Acid Codon Wheel](https://www.sigmaaldrich.com/CH/en/technical-documents/technical-article/genomics/sequencing/amino-acid-codon-wheel) Amino Acid Codon Wheel for fast RNA translation. 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