Analisi della salute delle cellule
I reagenti, i kit e gli strumenti per l'analisi della salute cellulare misurano indicatori generali e specifici del vigore delle colture cellulari. I saggi di vitalità possono essere utilizzati come misura generale della salute delle cellule o per valutare gli effetti del trattamento insieme ai saggi di citotossicità. I saggi di proliferazione utilizzano spesso la sintesi del DNA e la divisione cellulare come misura dell'attività metabolica delle cellule in seguito a condizioni o trattamenti. I kit di citotossicità possono utilizzare letture di bioriduzione per valutare l'attività metabolica.
La contaminazione delle colture è uno degli ostacoli più comuni a una coltura cellulare efficiente e affidabile. Sebbene alcuni contaminanti possano essere rilevati mediante un'accurata ispezione al microscopio delle colture, contaminanti come il micoplasma sfuggono ai metodi di rilevamento visivo. Le colture devono quindi essere sottoposte a uno screening di routine utilizzando kit e reagenti in grado di rilevare in modo affidabile i contaminanti microbici. I reagenti che riducono al minimo ed eliminano la contaminazione quando si verifica sono elementi essenziali della sala colture che aumentano la tecnica sterile e le buone pratiche della sala colture.
Prodotti
Saggi di vitalità e proliferazione cellulare
I saggi per misurare proliferazione e vitalità cellulare sono utilizzate per monitorare la risposta e la salute delle cellule in coltura dopo il trattamento con vari stimoli. La scelta appropriata di un metodo di analisi dipende dal numero e dal tipo di cellule da valutare, nonché dal risultato atteso. I saggi di proliferazione cellulare possono monitorare il numero di cellule nel tempo, il numero di divisioni cellulari, l'attività metabolica o la sintesi del DNA. Il conteggio delle cellule utilizzando coloranti di vitalità come trypan blue o calcein-AM può fornire sia il tasso di proliferazione che la percentuale di cellule vitali. 5(6)-Carbossifluoresceina diacetato N-succinimidil estere (CFSE) (21888, SCT110) è una scelta popolare per misurare il numero di divisioni cellulari subite da una popolazione. Quando entra nella cellula, il CFSE viene scisso dalle esterasi intracellulari per formare il composto fluorescente e il gruppo succinimidil estere reagisce covalentemente con le ammine primarie delle proteine intracellulari. A ogni divisione, l'intensità della fluorescenza di ogni cellula figlia si dimezza, consentendo la semplice rilevazione del numero di divisioni cellulari mediante citometria a flusso.
Metabolismo della MTT a sale di formazan da parte di cellule vitali, come mostrato in una piastra a 96 pozzetti.
I nostri strumenti e soluzioni completi per la misurazione della vitalità e della proliferazione cellulare impiegano vari metodi e includono:
- Saggi di proliferazione della sintesi del DNA
- Saggi di proliferazione metabolica
- Saggi di vitalità cellulare luminescente
- Saggi di proliferazione con colorante fluorescente
- Saggio di proliferazione con colorante vivo/morto/totale Saggi di proliferazione con coloranti fluorescenti
- Triplice colorazione di cellule vive/morte/totali per colture 3D
- Conteggio della vitalità per esclusione con colorante blu di Tripan
Saggi di citotossicità
I saggi che misurano l'attività metabolica sono adatti per analizzare la proliferazione, la vitalità e la citotossicità. La riduzione di sali di tetrazolio come MTT e XTT a composti colorati di formazan o la bioriduzione della resazurina (R7017, TOX8) avviene solo nelle cellule metabolicamente attive. Le cellule che proliferano attivamente aumentano la loro attività metabolica, mentre le cellule in difficoltà, come quelle esposte alle tossine, mostrano una diminuzione dell'attività.
Saggi di apoptosi
La morte cellulare è necessaria per molte funzioni fisiologiche normali nel corso dello sviluppo e dell'omeostasi. La capacità delle cellule tumorali di eludere la morte cellulare programmata, nota anche come apoptosi, è un segno distintivo della maggior parte dei tipi di cancro. Un'ampia varietà di proteine cellulari, compresi i recettori della superficie cellulare, gli adattatori, le proteasi e i componenti mitocondriali, regolano un sottile equilibrio tra la sopravvivenza delle cellule e la morte per apoptosi. Una selezione ponderata dei saggi può aiutare ad analizzare non solo gli effetti delle condizioni di coltura e dei trattamenti sulla salute delle cellule, ma anche i meccanismi che li influenzano. Forniamo una gamma completa di prodotti di analisi per la fase iniziale, media e avanzata della rilevazione dell'apoptosi.
Rilevamento ed eliminazione della contaminazione cellulare
Il mantenimento di colture cellulari prive di contaminazione è fondamentale per la ricerca basata sulle cellule. Tra i problemi più diffusi nelle colture cellulari c'è la contaminazione da micoplasmi, un genere di batteri la cui morfologia è caratterizzata da dimensioni sub-microniche e dall'assenza di una parete cellulare, che rendono questi batteri difficili o impossibili da individuare al microscopio e resistenti a molti antibiotici. Sebbene i micoplasmi non causino di solito la morte cellulare, sono responsabili di una serie di effetti sulle cellule in coltura che includono disregolazione del metabolismo, riduzione della proliferazione e aberrazioni cromosomiche. In breve, la contaminazione da micoplasmi compromette la validità delle linee cellulari colpite per la fornitura di dati significativi per la ricerca sulle scienze della vita.
I nostri strumenti per rilevazione ed eliminazione del micoplasma include:
- LookOut® Mycoplasma PCR Detection Kit e altri kit PCR e qPCR per lo smascheramento affidabile e sensibile del micoplasma nelle colture cellulari
- Tryptose phosphate broth e altri reagenti per la rilevazione tramite coltura del micoplasma<
- Macchie di DNA per la rilevazione del micoplasma con il metodo della colorazione fluorescente del DNA
- LookOut® Mycoplasma Erase spray e reagenti per la decontaminazione del micoplasma
Risorse correlate
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Saggi basati su cellule per la proliferazione cellulare (BrdU, MTT, WST1), la vitalità cellulare e gli esperimenti di citotossicità per applicazioni nella ricerca sul cancro, sulle neuroscienze e sulle cellule staminali.
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- Apoptosis Assays
Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
- Mycoplasma Detection, Prevention, and Elimination in Cell Culture
Detect mycoplasma contamination in cell culture through the PCR, DNA stain, or culture tests. Discover mycoplasma prevention, elimination, and detection kits.
- Angiogenesis Assays
Cell based angiogenesis assays to analyze new blood vessel formation for applications of cancer research, tissue regeneration and vascular biology.
- Autophagy Assays
Cell based autophagy assays including live cell LC3 GFP/RFP lentiviral biosensors, kits for autophagy detection and autophagy activators and inhibitors.
- Protocollo del saggio di proliferazione e vitalità cellulare con MTT
Protocollo del saggio di proliferazione e vitalità cellulare e citotossicità con MTT. Istruzioni per la preparazione dei reagenti per il saggio con MTT con esempi di applicazione.
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