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Kit per l'isolamento degli organelli cellulari

Anche se lo studio di cellule derivate da tessuti in vivo è il più predittivo della biologia e della funzione cellulare, la complessità biologica può confondere i risultati a meno che non vengano isolate popolazioni cellulari mirate. Per studiare i fenotipi cellulari, si sono sviluppati diversi metodi per isolare le popolazioni cellulari in base a caratteristiche definitive. L'isolamento di popolazioni cellulari non solo aiuta la ricerca biologica, ma facilita anche i test diagnostici clinici. I metodi di isolamento più efficaci dimostrano una maggiore resa, purezza e vitalità. L'arricchimento o la purificazione delle popolazioni target possono essere ottenuti mediante selezione positiva─spesso impiegando anticorpi che legano marcatori cellulo-specifici─o mediante selezione negativa che può utilizzare proprietà biofisiche per eliminare le cellule indesiderate al fine di arricchire la popolazione target.    

Il frazionamento delle cellule nei loro componenti subcellulari è da tempo fondamentale per gli studi di biologia cellulare. Le tecniche di frazionamento subcellulare sono state ampiamente utilizzate per studiare la struttura e la funzione di organelli e compartimenti subcellulari, nonché per comprendere la localizzazione, l'elaborazione e il traffico di biomolecole. L'obiettivo della maggior parte delle tecniche di frazionamento è ottenere organelli e macromolecole cellulari in uno stato funzionale, in cui conservano le loro proprietà biochimiche intrinseche. Questo obiettivo è spesso raggiunto attraverso la lisi cellulare con mezzi meccanici delicati o con detergenti delicati, spesso seguita dal frazionamento dei componenti cellulari mediante centrifugazione differenziale.


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Le cellule sono riempite da cerchi di varie dimensioni che indicano le goccioline di lipidi. Le gocce lipidiche e le cellule visibili occupano il primo piano dell'immagine.

Gocce lipidiche visibili confermano l'isolamento dei preadipociti 7 giorni dopo la differenziazione con il kit di differenziazione 3T3-L1.

Kit per l'isolamento di organelli e complessi subcellulari

La derivazione di componenti subcellulari favorisce la comprensione della funzione degli organelli e può portare a nuove biotecnologie. Ad esempio, i nuclei isolati da cellule di mammifero possono essere utilizzati per la sintesi di trascritti primari di RNA endogeno. Il kit Nuclei EZ Prep ad alta resa (NUC101, NUC201) è stato sviluppato per l'isolamento rapido dei nuclei dalla maggior parte delle cellule di mammifero.

Per la rilevazione dell'integrità mitocondriale e del potenziale di membrana, il nostro kit di colorazione mitocondriale (CS0390, CS0760) utilizza il colorante JC-1 (420200, T4069), che si concentra nella matrice mitocondriale formando aggregati rossi fluorescenti. Eventi come l'apoptosi che dissipano il potenziale di membrana mitocondriale impediscono l'accumulo del colorante JC-1 nei mitocondri e un microscopio a fluorescenza può essere utilizzato per distinguere i mitocondri vitali da quelli compromessi.

Anche i complessi subcellulari non organellari, come i proteasomi, possono essere isolati per essere utilizzati nei saggi proteolitici. Il nostro metodo utilizza microsfere di matrice di affinità contenenti una proteina di fusione GST con un dominio ubiquitina-simile legato all'agarosio GST.



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