Albumine e proteine di trasporto
Molte molecole sono instabili o insolubili quando esistono in forme non complesse. In vitro, le albumine e altre proteine trasportatrici sono spesso utilizzate per legare, sequestrare e stabilizzare una serie di importanti piccole molecole e proteine. Le albumine sono semplici proteine idrosolubili presenti nei fluidi e nei tessuti animali e, in misura minore, nelle piante. Le albumine sono utilizzate nella produzione di anticorpi monoclonali terapeutici e di proteine ricombinanti.
Forniamo albumine per tutte le esigenze applicative, tra cui la coltura cellulare, la quantificazione delle proteine, la stabilizzazione degli enzimi, l'ELISA e i processi legati agli anticorpi. Oltre alle albumine provenienti da diverse fonti, offriamo queste proteine essenziali in diversi formati e formulazioni.
Prodotti
Albumine in coltura cellulare
Le albumine, in particolare quelle provenienti dal siero bovino (BSA), sono un componente importante di molti sistemi di coltura cellulare serum-free in particolare di quelli che utilizzano cellule di ibridoma o di ovaio di criceto cinese (CHO). Nei mezzi di coltura cellulare, l'albumina funziona legando e trasportando altre molecole essenziali alle cellule in coltura. Poiché non tutte le albumine hanno la stessa efficacia nei terreni di coltura, è consigliabile scegliere quelle che sono state testate per applicazioni in coltura cellulare.
La sieroalbumina bovina (BSA) è una proteina globulare (MW ~66 kDa) utilizzata in numerose applicazioni biochimiche grazie alla sua stabilità e alla mancanza di interferenze con le reazioni biologiche. La struttura della BSA è una singola catena polipeptidica composta da circa 583 residui aminoacidici e senza carboidrati. Per saperne di più sulla struttura della proteina BSA, sul peso molecolare, sulle proprietà e sulle applicazioni della BSA, consultare la nostra guida alle proprietà fisiche e alle applicazioni della BSA.
La BSA è il classico cavallo di battaglia dei prodotti a base di albumina, utilizzato in numerose applicazioni. I nostri diversi formati di albumina da siero bovino includono purezze che vanno dal 95 al 99%. Produciamo e distribuiamo BSA purificata con diversi metodi primari, tra cui il vero metodo di frazionamento di Cohn, i metodi di frazionamento con etanolo modificato, lo shock termico e la cromatografia. Ulteriori fasi di purificazione possono includere la cristallizzazione o la filtrazione a carbone. Per comodità, le nostre BSA sono definite in base al metodo di preparazione:
- La purificazione cromatografica dell'albumina produce in genere una conformazione proteica nativa più conservata rispetto ai metodi di frazionamento con etanolo e shock termico.
- Il metodo dell'etanolo e dello shock termico combina entrambi i processi utilizzando il frazionamento di Cohn per eseguire la purificazione iniziale seguita da una fase di calore per purificare ulteriormente l'albumina fino a ≥ 99% mediante elettroforesi su Agarosio.
- Il frazionamento con etanolo è un metodo di frazionamento che include la regolazione della concentrazione di etanolo, del pH e della temperatura. A differenza del metodo dello shock termico, questo processo viene mantenuto a bassa temperatura, garantendo una condizione di non denaturazione delle proteine e preservando la struttura e la funzione dell'albumina nativa.
- Il processo di frazionamento con shock termico, che prevede la regolazione del calore e del pH, si basa sull'aggiunta di uno stabilizzatore proteico. Questa aggiunta consente all'albumina di tollerare l'aumento della temperatura di 65 °C. La maggior parte delle altre proteine plasmatiche si denatura e precipita durante questo processo, producendo un'albumina con una maggiore purezza.
Human Serum Albumin (HSA)
L'albumina sierica umana (HSA) è la proteina più abbondante nel plasma umano con un peso molecolare di ~66 kDa (in base alla composizione aminoacidica). L'albumina sierica può essere indicata come Frazione Cohn V. Questa convenzione di denominazione deriva dal metodo originale di Cohn di frazionare le proteine del siero utilizzando la precipitazione con etanolo a freddo, poiché l'albumina sierica è stata trovata nella quinta frazione etanolica utilizzando il metodo di Cohn. Da allora, il termine "Cohn Fraction V" è stato utilizzato da alcuni per descrivere la sieroalbumina indipendentemente dal metodo di preparazione. Produciamo sieroalbumine umane utilizzando un processo di frazionamento in alcool a freddo derivato dal metodo tradizionale di Cohn, nonché dal metodo dello shock termico, e offriamo versioni native e ricombinanti di HSA in polvere e in soluzione.
Altri prodotti a base di albumina
Il nostro portafoglio comprende altri prodotti a base di albumina per applicazioni specifiche che richiedono proteine umane e di altre specie non bovine. Le albumine umane ricombinanti e le albumine prive di componenti animali (ACF) sono fornite in tamponi acquosi o in polvere liofilizzata. Le albumine disponibili di altre specie includono quelle derivate dalle seguenti fonti:
- albume d'uovo di pollo
- siero di topo
- siero di ratto
- siero di porcina
- siero di bovino<
Le nostre albumine sono di elevata purezza e solubilità superiore per garantire un basso background nei saggi di quantificazione delle proteine e per ridurre al minimo le interferenze nei bioprocessi.
Transferrine e sostituti della transferrina
Le cellule richiedono ferro per legare l'ossigeno disponibile dall'ambiente extracellulare.Le transferrine sono glicoproteine a catena singola presenti nel siero che facilitano l'assorbimento del ferro nel terreno di coltura e il suo successivo trasporto intracellulare.Sebbene la transferrina sia il metodo fisiologicamente ottimale per trasportare il ferro alle cellule in coltura e sia stata quindi parte integrante della produzione di biofarmaci come gli anticorpi monoclonali, i sistemi privi di rischi per gli animali hanno portato all'adozione di alternative a piccole molecole alla transferrina nella produzione biologica. Molte di queste alternative alla transferrina sono chelanti del ferro, che devono essere utilizzati con protocolli appropriati nei sistemi di coltura, poiché molte non gestiscono il ciclo redox del ferro e possono quindi contribuire allo stress ossidativo. I nostri reagenti per colture cellulari includono una selezione completa di transferrine e di sostituti della transferrina.
Risorse correlate
- Albumin in Cell Culture
Explore serum albumin's role in serum-free cell culture systems for biomanufacturing.
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