Marcatori proteici
![Il grafico mostra le differenze di peso molecolare (kDa) di mPAGE® Color Protein Standard quando viene separato su diversi gel chimici. Lo standard proteico mPAGE® Color è costituito da 10 bande colorate. Vengono visualizzati i modelli di migrazione e il peso molecolare apparente per 4 chimiche di gel: mPAGE® Bis Tris precast, mPAGE® LUX Bis-Tris, mPAGE® TurboMix Bis-Tris e Tris-Glicina. Il peso molecolare apparente per tutti i gel Bis-Tris è presentato per i tamponi di corsa MOPS e MES. Gli intervalli di separazione e il peso molecolare apparente per il Color Protein Standard dipendono dalla chimica del gel e dalla scelta del tampone di corsa; gel prefabbricato mPAGE® con tampone di corsa MOPS [242kDa-10kDa], gel prefabbricato mPAGE® con tampone di corsa MES [257kDa-10kDa], gel prefabbricato mPAGE® LUX con tampone di corsa MOPS [242kDa-10kDa]. gel handcast LUX con tampone di corsa MOPS [288kDa-10kDa], mPAGE® gel handcast LUX con tampone di corsa MES [291kDa-10kDa], mPAGE® TurboMix con tampone MOPS [259kDa-10kDa], mPAGE® TurboMix con tampone MES [275kDa-10kDa] e gel Tris-Glicina con tampone Tris-Glicina [259-10kDa]. Le proteine standard colorate separate su gel Bis-Tris utilizzando il tampone MOPS migrano in genere più all'interno del gel rispetto al tampone MES per una determinata chimica del gel. Per un calcolo più accurato del peso molecolare, utilizzare sempre un marcatore di peso molecolare non colorato.](/deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/protein-electrophoresis-and-western-blotting/migration-differences/migration-differences.jpg "Migration differences of mPAGE Color Protein Standard on 12% gel chemistries (kDa)")
Differenze di migrazione di mPAGE® Color Protein Standard su gel chimici al 12% (kDa)
I marcatori di peso molecolare delle proteine, talvolta indicati come standard proteici o ladder proteici, sono utilizzati per stimare il peso molecolare delle proteine di interesse e per monitorare il progresso della separazione elettroforetica o del trasferimento nel Western blotting. I marcatori di peso molecolare non colorati sono solitamente costituiti da una miscela di proteine native o ricombinanti purificate di peso molecolare definito. La visualizzazione della loro posizione su un gel o una membrana richiede una fase di colorazione. I marcatori proteici precolorati consentono di monitorare facilmente la separazione elettroforetica e l'efficienza di trasferimento. Sono disponibili anche standard proteici individuali per applicazioni di elettroforesi proteica, focalizzazione isoelettrica e 2D-PAGE.
Prodotti
| Se si desidera... | Utilizzare... | Intervallo dei pesi molecolari | Presente | Fornito come | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Separa proteine molto piccole | Color Marker Ultra-Low Range (C6210) | 1-27 kDa | (6 bande) | Sì, Multicolore | Liquido | ||
| Marcatore di peso molecolare a bassissimo range (M3546) | 1-27 kDa< | (6 bande) | No | Liquido | |||
| Separa sia le proteine molto piccole che quelle di fascia media | SigmaMarker™ (basso) (S8445) | 7-66 kDa | (7 bande) | No | Polvere | ||
| SigmaMarker™ (wide) (M3913) | 7-200 kDa | (12 bande) | No | Polvere | |||
| Traccia facilmente la progressione del gel per le proteine di fascia media | mPAGE® Color Protein Standard (MPSTD4) | 10-203 kDa | (10 bande) | Si, Multicolore | Liquido | ||
| Marcatore per elettroforesi ColorBurst™ (C1992) | Si tratta di un'analisi di tipo "atipico".td>8-220 kDa | (8 bande) | Si, Multicolore | Liquido | |||
| BLUeye Prestained Protein Ladder (94964) | 11-245 kDa | (12 bande) | Si, Multicolore | Liquido | |||
| Marcatore di peso molecolare colorato (SDS7B2) | 27-180 kDa | (7 bande) | Sì, colore singolo | Polvere | |||
| Misurare con precisione le dimensioni delle proteine utilizzando la colorazione Coomassie | mPAGE® Unstained Protein Standard (MPSTD3)) | 10-200 kDa | (12 bande) | No | Liquido | ||
| Marcatori di proteine perfette, 10-225 kDa (69079) | 10-225 kDa | (9 bande) | No | Liquido | |||
| Marcatori di proteine perfette, 15-150kDa (69149-M) | 15-150 kDa | (7 bande) | Liquido | ||||
| Visualizzare il ladder quando si utilizzano i reagenti HRP-ECL | mPAGE® Western Protein Standard (MPSTD2) | 20-120 kDa | (7 bande) | No | Liquido | ||
| Marcatori occidentali di proteine perfette (69959) | 15-150 kDa | Liquido | Notd>(7 bande) | No | Liquido | ||
| Studio delle proteine biotinilate | 7-180 kDa | (9 bande) | No | Polvere | |||
| Separare proteine molto grandi | Kit per pesi molecolari 14000-500000 non denaturanti (MWND500) | 14-545 kD | (7 bande) | No | Polvere | ||
Standard proteici colorati mPAGE®
mPAGE® Standard di proteine
- Gli standard proteici occidentali mPAGE® consistono in sette proteine ricombinanti a 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa e 120 kDa con un sito di legame IgG che si lega alla maggior parte degli anticorpi. Questo permette di visualizzare sia il marcatore proteico che le proteine del campione sullo stesso western blot senza reagenti aggiuntivi.
- mPAGE® Color Protein Standards include una miscela di dieci proteine precolorate altamente purificate che vanno da 10 kDa a 203 kDa, accoppiate covalentemente con diversi cromofori. Gli standard proteici colorati mPAGE® sono progettati per osservare la separazione delle proteine durante la SDS-PAGE, per verificare l'efficienza di trasferimento del Western blotting su membrane e per approssimare le dimensioni delle proteine.
- mPAGE® Standard proteici non colorati comprendono una miscela di dodici proteine ricombinanti non colorate che vanno da 10 kDa a 200 kDa. Le bande da 85 kDa, 25 kDa e 10 kDa hanno un'intensità più elevata e servono come punti di riferimento. mPAGE® Unstained Protein Standards sono adatti per la determinazione del peso molecolare dopo SDS-PAGE o Western blotting e servono come standard per calibrare la mobilità dei marcatori precolorati.
Scale proteiche pretrattate BLUeye
Marcatori proteici ColorBurst
ColorBurst™ Marcatori proteici
I marcatori ColorBurst™ sono composti da otto polipeptidi ridotti chimicamente e coniugati con coloranti brillantemente colorati. I marcatori ColorBurst™ possono essere utilizzati per stimare il peso molecolare dei campioni, monitorare il progresso di una corsa elettroforetica o confermare il completamento dell'elettroblotting.
SigmaMarker<I marcatori proteici SigmaMarker™ sono progettati per l'uso con SDS-PAGE e coprono la gamma di pesi molecolari comuni alla maggior parte delle proteine o alle loro subunità. Questi marcatori ad alto e basso range sono liofilizzati con tampone per campioni in modo da essere pronti all'uso dopo la ricostituzione con acqua deionizzata. I marcatori sono formulati in modo da produrre una distribuzione di bande ben definite di intensità approssimativamente uguale dopo l'elettroforesi e la colorazione con il blu di Coomassie.
Marcatori proteici a bassissima gamma
Marcatori proteici perfetti
I marcatori proteici perfetti sono stati progettati per l'uso di routine nella SDS-PAGE per consentire una determinazione altamente accurata delle dimensioni dei campioni sconosciuti. A differenza di molti marcatori convenzionali (ad esempio, ovoalbumina, sieroalbumina), i marcatori Perfect Protein non contengono oligosaccaridi che causano migrazioni anomale, bande eterogenee o una stima imprecisa delle dimensioni. Questi marcatori sono ottimizzati per l'uso con la colorazione in blu di Coomassie, ma quantità adeguate possono essere utilizzate anche con altri metodi di colorazione del gel, tra cui la colorazione all'argento e la colorazione con coloranti fluorescenti.
Ultra-low Range Protein Markers
Gli ultra-low range Molecular Weight Markers (M.W. 1.060-26.600 Da) sono stati utilizzati come marcatori proteici in SDS-PAGE e Western blotting. Si raccomanda il fissaggio.
Marcatori proteici non denaturanti
I marcatori non denaturanti sono stati utilizzati come standard per la PAGE nativa e per calibrare le colonne per la cromatografia ad esclusione di gel.
Marcatori biotinilati
La miscela di standard di peso molecolare biotinilati contiene proteine coniugate con biotina da utilizzare sia come standard SDS-PAGE che come standard per il Western blotting. La visualizzazione avviene mediante streptavidina-perossidasi con un substrato colorimetrico o luminescente appropriato. Questi marcatori possono essere rilevati contemporaneamente alle procedure di immunocolorazione.
Risorse correlate
- Handbook: Protein Blotting Tips and Tricks
This handbook represents the collective experience of our application scientists, who are actively engaged in advancing the science of protein blotting and detection.
- Brochure: Rethink Western Blotting
Explore our products designed to improve each step of the Western blotting workflow.
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