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Purificazione delle proteine biotinilate

Risorse correlate

Brochure: Refine Protein Preparation
Tools for better protein analysis.
Purification or Removal of Biotin and Biotinylated Substances
This page shows how to purify or remove biotin and biotinylated substances with Streptavidin Sepharose High Performance from Cytiva.

Sfere di agarosio e gel di affinità

Le sfere di agarosio e i gel di affinità consentono la purificazione di proteine biotinilate e anticorpi biotinilati utilizzando streptavidina o avidina reticolata all'agarosio perlato. Sia l'avidina che la streptavidina si legano alla biotina con elevata affinità, sebbene l'avidina possa presentare un elevato legame non specifico. L'agarosio Extravidin® utilizza un'avidina modificata con affinità e specificità molto elevate per la biotina. Ottime per la purificazione su piccola e grande scala, queste resine sono adatte alla purificazione su colonna a flusso gravitazionale, alla centrifugazione a bassa velocità nell'elaborazione in batch e alle procedure cromatografiche a bassa pressione. I gel di affinità EZview™ incorporano un colorante rosso che consente all'utente di distinguere facilmente il pellet dal surnatante, riducendo la perdita di proteine durante la purificazione in batch.

Sfere magnetiche

Le sfere magnetiche Streptavidin di PureProteome™ offrono un metodo rapido e riproducibile per purificare le immunoglobuline da miscele complesse come campioni di siero, plasma o surnatante di colture cellulari. Le proteine biotinilate e gli anticorpi biotinilati vengono purificati utilizzando un rack o una piattaforma magnetica per separare le microsfere dalle frazioni di lavaggio e di eluizione. Questa procedura è adatta per una bassa produttività utilizzando singole provette per microcentrifuga o per una maggiore produttività utilizzando piastre a 96 pozzetti con o senza automazione. Le particelle magnetiche di streptavidina possono essere utilizzate anche per la purificazione di proteine biotinilate e anticorpi biotinilati.

Piastre rivestite di streptavidina ad alta capacità di SigmaScreen™

SigmaScreen™ ad alta capacità rivestite di streptavidina utilizzano una tecnologia di rivestimento proprietaria che fornisce una capacità di legame con la biotina sostanzialmente maggiore rispetto alle piastre rivestite di streptavidina o ExtrAvidina standard. Con una capacità di legame di 300 pmol/pozzetto (formato 96 pozzetti) o 150 pmol/pozzetto (formato 384 pozzetti), queste piastre consentono di eluire la proteina catturata per l'analisi successiva alla cattura con vari metodi come MALDI, ICAT o SDS-PAGE. Le piastre SigmaScreen™ rivestite di streptavidina ad alta capacità sono prodotte in conformità alla norma ISO 9002 nel nostro stabilimento GMP e garantiscono un'elevata coerenza da pozzetto a pozzetto e da piastra a piastra.

Colonne e supporti per cromatografia Cytiva™ Amersham

È disponibile una varietà di colonne e supporti cromatografici Cytiva™ Amersham per la purificazione affidabile e ad alta risoluzione di proteine e anticorpi biotinilati, da piccola a grande scala.

Le colonne SpinTrap™ sono colonne spin preconfezionate e monouso per la purificazione semplice e su piccola scala di proteine biotinilate e anticorpi biotinilati.
Le colonne HiTrap™ HP sono preconfezionate con resina Streptavidin Sepharose™ ad alte prestazioni per la purificazione di routine e preparativa di proteine biotinilate e anticorpi.
Le piastre filtranti a 96 pozzetti MultiTrap™ forniscono un formato rapido e affidabile per la purificazione su piccola scala di proteine e anticorpi biotinilati, utilizzando piastre filtranti a 96 pozzetti preconfezionate e adattabili alla centrifugazione o alla filtrazione sottovuoto, manualmente o con sistemi robotici automatizzati.
I supporti Sepharose™ sono costituiti da microsfere magnetiche a base di Sepharose™ progettate per semplificare l'arricchimento di proteine target mediante immunoprecipitazione o applicazioni pull-down e possono essere utilizzate per la purificazione e lo screening rapidi e su piccola scala di proteine biotinilate e anticorpi biotinilati da surnatanti cellulari.
La resina Sepharose™ ad alte prestazioni è disponibile anche separatamente per la purificazione in scala.

Applicazioni correlate

Purificazione delle proteine

Tecniche, reagenti e protocolli per la purificazione di proteine ricombinanti mediante tecniche di cromatografia a scambio ionico, di esclusione dimensionale e di affinità.

Espressione di proteine

Tecnologie per l'espressione di proteine con vari sistemi di espressione, a supporto della ricerca e della produzione di agenti terapeutici e vaccini.

Lysis & Protein Extraction

An overview of cell lysis and protein extraction methods including detergent solubilization, freeze-thaw lysis, osmotic shock, sonication, enzymatic cell lysis, and mechanical disruption techniques such as Dounce, Polytron, and mortar and pestle homogenization.

Pull-down di proteine

Per studiare in vitro le interazioni proteina-proteina potete ricorrere a saggi di pull-down per affinità, o GST pull-down, purificazione per affinità in tandem (TAP) e co-immunoprecipitazione.

Concentrazione delle proteine & scambio di tampone

Panoramica delle tecniche utilizzate per concentrare e chiarificare campioni proteici per successive procedure di purificazione, bioprocesso o analisi. Include protocolli e video che descrivono tecniche di filtrazione e ultrafiltrazione, metodiche di arricchimento proteico, dissalazione e scambio di tampone utilizzando metodologie quali la dialisi, la diafiltrazione e la cromatografia.

Elettroforesi su gel

L'elettroforesi su gel delle proteine è una metodica utilizzata per separare le proteine al fine di poterle purificare, caratterizzare e rilevare. Metodiche come la PAGE nativa, l’SDS-PAGE, la 2D PAGE e la focalizzazione isoelettrica (IEF), consentono di separare le proteine da sottoporre successivamente ad applicazioni quali Western blotting, spettrometria di massa e analisi proteomica.

Western blotting

Una panoramica dei principi e delle applicazioni del Western blotting per la rilevazione delle proteine. Include link a protocolli dettagliati, video e altre risorse per l'estrazione, l'elettroforesi su gel, il trasferimento su membrane in PVDF o nitrocellulosa e metodi di rivelazione delle proteine chemiluminescenti, colorimetrici e fluorescenti.

Spettrometria di massa

Imparate a conoscere la spettrometria di massa ed esplorate i prodotti e le risorse per l'identificazione, la quantificazione e l'analisi accurate in tutte le applicazioni.

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