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Enzimi per l'analisi dei farmaci

Enzimi β-glucuronidasi e solfatasi per l'analisi dei farmaci

La maggior parte dei farmaci, degli ormoni e degli xenobiotici viene metabolizzata dall'organismo umano e animale in molecole idrofile e quindi rapidamente escreta nei fluidi corporei, principalmente nelle urine. Questi farmaci e molecole coniugati sono principalmente coniugati con glucuronidi o solfati (glucuronogoniugati e sulfoconiugati). Nell'uomo, la glucuronidazione è la principale via metabolica di fase II. I coniugati sono difficili da rilevare e quantificare con gli strumenti cromatografici, la gascromatografia (GCMS) e la cromatografia liquida (LCMS). L'idrolisi con la beta-glucuronidasi e/o la solfatasi scinde i legami coniugati e riporta farmaci, ormoni e xenobiotici nella loro forma libera iniziale. Gli analiti liberati sono facilmente "visibili" e misurabili dagli strumenti di laboratorio per lo screening o la quantificazione.

Gli enzimi beta-glucuronidasi sono disponibili per le industrie delle scienze della vita e della diagnostica da oltre cinque decenni, principalmente estratti dalle viscere di diversi animali (Helix pomatia o Haliotis rufescens) o da fonti batteriche (E. coli). Dal 2015 si è assistito a un passaggio alle beta-glucuronidasi ricombinanti nella tossicologia analitica e nei test di routine sulle urine. Grazie alla migliore qualità analitica, alla facilità di preparazione dei campioni, alla riduzione dei tempi di incubazione e alla capacità di automazione, i nostri enzimi beta-glucuronidasi ricombinanti (SRE0093, SRE0095) sono sempre più utilizzati in diversi campi di applicazione come enzimi analitici. 


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Campi di applicazione della beta-glucuronidasi e della solfatasi come enzimi analitici

L'esame delle droghe nelle urine (UDT) è la principale applicazione di routine della beta-glucuronidasi e della solfatasi. Gli enzimi utilizzati nell'UDT si applicano a diversi tipi di test:

  • Test antidoping forensi (giustizia penale)
  • Test antidoping umani (sport agonistici)
  • Addoping animali (gare agonistiche)
  • Test antidroga sul posto di lavoro (nuovi dipendenti)
  • Test di esposizione agli xenobiotici (esposizione ambientale)
  • Monitoraggio dei farmaci prescritti e terapeutici (conformità e test di accompagnamento)

IDROLISI CON ENZIMI

Enzimi glucuronidasi intervalli di pH ottimali da fonti comuni

Figura 1.Intervalli di pH ottimali per una serie di enzimi glucuronidasi provenienti da fonti comuni.

Un'idrolisi efficiente e completa dei metaboliti glucuronidi e solfati è cruciale per l'analisi delle droghe nelle urine, in particolare quando è necessaria la quantificazione. Una lunga storia di ricerca accademica ha trovato in natura molte forme di beta-glucuronidasi e solfatasi, ognuna con proprietà specifiche. Uno dei parametri più importanti per l'attività enzimatica è il pH. Per aiutarvi nella scelta dell'enzima, consultate la nostra tabella dell'intervallo di pH ottimale con un elenco di pH ottimali per una varietà di enzimi glucuronidasi provenienti da fonti comuni.

I nostri siti producono beta-glucuronidasi native e ricombinanti dal 1960. Tutte le nostre beta-glucuronidasi e arilsolfatasi sono prodotte nell'ambito del sistema di qualità ISO9001. Continuiamo a dedicare i nostri sforzi per rendere l'idrolisi più veloce, più facile da implementare e pronta all'uso.


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