Plynová chromatografie (GC)

Stejně jako jiné formy chromatografie zahrnuje GC stacionární fázi a mobilní fázi. Při GC je mobilní fází inertní plyn, obvykle helium nebo dusík, a stacionární fází je buď pevný adsorbent, označovaný jako chromatografie plyn-pevná látka (GSC), nebo kapalina adsorbovaná na inertní podložku, označovaná jako chromatografie plyn-kapalina (GLC nebo jen GC).

Jak funguje plynová chromatografie?

Po odběru a přípravě vzorku se uvnitř kolony oddělí sledované analyty a poté detektor změří množství složek, které kolonu opustí. Při GC se analyt vstříkne do odběrového portu přístroje a vstoupí do pece, kde se odpaří. Odpařený vzorek je transportován chromatografickou kolonou proudem inertního plynu, který tvoří mobilní fázi. Sloučeniny ve vzorku se rozdělí mezi stacionární fázi kolony a nosný plyn. Síla interakce mezi sloučeninou a stacionární fází určuje retenční čas analytu. Na výstupu z kolony vytváří detektor (MS nebo non-MS) signál při průchodu sloučenin. Chromatogram je výsledkem GC separace.

Pro měření koncentrace testovaného vzorku se do GC přístroje vstříkne standardní vzorek o známé koncentraci. Retenční čas a plocha píku standardu se porovná s výsledky testovaného vzorku a určí se neznámá koncentrace. V GC se běžně používají externí a interní standardy, aby se zajistila spolehlivá kvantifikace testovaného vzorku. Pokud se známé standardy provádějí odděleně od skutečného vzorku, který je předmětem zájmu, a odezva se porovnává s odezvou vzorku v jiném chromatogramu, označuje se jako externí standard. Pokud se standard přidává ke vzorku a analyzuje se současně, označuje se jako interní standard.

Odběr a příprava vzorků pro GC analýzu

Mnoho vzorků lze analyzovat pomocí GC, pokud jsou sloučeniny přiměřeně těkavé (lze je odpařit) a zároveň tepelně stabilní (nedegradují při vysoké teplotě). Vzorky lze odebírat z pevných, kapalných nebo plynných materiálů. Při přípravě vzorků pro GC je důležité minimalizovat složitost vzorku, protože kvalita vzorku ovlivňuje přesnost a preciznost konečných chromatografických výsledků. K dispozici je široká škála technik přípravy vzorků specifických pro matrice, které pomáhají izolovat a koncentrovat analyty a matrice vzorků před analýzou GC.

Jak si vybrat GC kolonu

V GC kolona je srdcem GC systému, kde dochází k chromatografické separaci. Výběr správné GC kolony by měl vycházet ze 4 významných faktorů: stacionární fáze, vnitřního průměru kolony (I.D.), tloušťky vrstvy a délky kolony. Tyto faktory mají vliv na účinnost kolony, rozlišení a kapacitu vzorku.

Stacionární fáze by měla být vybrána na základě prováděné aplikace.