[Přejít k obsahu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) Produkty Nákupní košík0 CZCS Produkty [Přihlášení / Registrovat se](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Dohledání objednávky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup) [Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order) Nákupní košík0 [Domů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs)[Aplikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications)[Genomika](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications/genomics)Klonování a exprese # Klonování a exprese  __Exprese rekombinantních proteinů v savčích buňkách__ Technologie klonování a genové exprese využívají výzkumníci v různých oborech ke zkoumání široké škály biologických otázek, včetně pochopení funkce genů, analýzy molekulárních drah, embryonálního vývoje, výzkumu nemocí a bioprocesingu biologických a terapeutických přípravků. Jakmile je gen nebo genetická sekvence identifikována, musí výzkumníci zvolit nejlepší strategii molekulárního klonování a systém exprese proteinů na bázi buněk na základě konkrétní potřeby aplikace. Další informace o expresi genů pomocí technologie CRISPR nebo o umlčování genů pomocí činidel RNAi naleznete na [stránku o genové expresi a umlčování genů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications/genomics/gene-expression-and-silencing).   * * * ## Související produkty Slide 1 of 17 1 of 4 [ \ Sigma-Aldrich \ B6650 \ X-GlcA](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/b6650) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ B3928 \ Blue-White Select™ Screening Reagent](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/b3928) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ B9146 \ 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/b9146) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ D9156 \ Deoxyribonucleic acid, single stranded from salmon testes](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/d9156) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ D8418 \ Dimethyl sulfoxide](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/d8418) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ YEAST1 \ Yeast Transformation Kit](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/yeast1) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ S1797 \ SOC Medium](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/s1797) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ L7533 \ LB Broth with agar (Lennox)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/l7533) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ I6758 \ IPTG](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sial/i6758) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ APAI-RO \ Apa I](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/apairo) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ NOTI-RO \ Not I](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/notiro) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ 11417959001 \ SuRE/Cut™ Buffer A](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/11417959001) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ XBAI-RO \ Xba I](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/xbairo) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ XTGHP-RO \ X-tremeGENE™ HP DNA Transfection Reagent](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/xtghpro) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ XTG360-RO \ X-tremeGENE™ 360 Transfection Reagent](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/xtg360ro) Rychlé zobrazení [ \ Roche \ XTG9-RO \ X-tremeGENE™ 9 DNA Transfection Reagent](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/roche/xtg9ro) Rychlé zobrazení [ \ Sigma-Aldrich \ OGS626 \ pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/product/sigma/ogs626) Rychlé zobrazení * * * ## Doporučené kategorie [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [Biologické nárazníky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) Naše rozsáhlé portfolio vysoce čistých biologických pufrů v různých formách složení a balení zajišťuje vynikající stabilitu roztoku a kontrolu pH v celém pracovním postupu bioprocesu. [Zobrazit produkty](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) [Agaróza](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) Nabízíme širokou škálu agarosových produktů s různou silou gelu, teplotou tání, teplotou želírování a úrovní elektroendosmózy (EEO), které podpoří vaše výzkumné aplikace. [Zobrazit produkty](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) * * * Přehled Související články a protokoly Podpora ## Vektory pro expresi proteinů Plasmidy neboli vektory pro expresi proteinů jsou kruhové kousky DNA, které obsahují řadu funkčních prvků pro klonování a expresi proteinu, který vás zajímá. Výběr vhodného expresního vektoru je částečně určen typem proteinu, organismem, který bude protein exprimovat, a konkrétní aplikací a vědeckými otázkami, které chce výzkumník řešit. Široká škála dostupných expresních vektorů umožňuje výzkumníkům vybrat si, které prvky pro klonování, výběr klonů a expresi proteinu jsou pro jejich studii nejvhodnější. Jakmile je vybrána sekvence genu, která je předmětem zájmu, a expresní vektor, výzkumní pracovníci běžně používají nukleázy k přesnému řezání vektoru na specifických místech, aby umožnili klonování genetické sekvence, která je předmětem zájmu, in-frame a nakonec její expresi v hostitelském organismu. Důležité je, že výzkumníci běžně používají chemicky kompetentní buňky a bakteriální transformaci k hostitelství plazmidů rekombinantní DNA, protože jsou stabilní při skladování ve zmrazeném stavu při teplotě -70 °C. ## Jak transfekovat buňky Buněčná transfekce označuje proces vnášení DNA nebo RNA nebo proteinů do eukaryotických buněk. K provedení této části pracovního postupu exprese proteinů mají výzkumníci k dispozici řadu fyzikálních, chemických a biologických technologií. Výzkumníci běžně používají fyzikální metody, jako je elektroporace, nebo chemické metody, včetně fosforečnanu vápenatého (CaPi), polyethyleniminu (PEI) a lipofekčních činidel. Vědci mají k dispozici také virové transdukční systémy, včetně lentivirových, onkoretrovirálních a adenovirových. Použití virových přenosových metod však často vyžaduje dodatečnou izolaci a monitorování z důvodu biologické bezpečnosti. ## Systémy pro expresi proteinů Výzkumníci používají k expresi proteinů svého zájmu různé organismy. Výzkumníci běžně používají bakterie, protože účinně přijímají expresní vektory, mají rychlou dobu zdvojení a za optimálních podmínek mohou produkovat velké množství rekombinantního proteinu. Jelikož jsou však bakterie prokaryotické organismy, nejsou schopny zajistit posttranslační modifikace proteinů, které některé proteiny vyžadují. Eukaryotické buňky, včetně kvasinek a savčích buněčných linií, umožňují posttranslační modifikaci (modifikace) bílkovin a jsou také běžně používány výzkumníky. Výběr nejlepší buněčné linie pro expresi rekombinantních proteinů a strategie exprese proteinů do značné míry závisí na konkrétních potřebách aplikace a otázkách, které chce vědec řešit. [](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [Hledáte konkrétnější informace?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Vyhledejte v našem vyhledávači dokumentů datové listy, certifikáty a technickou dokumentaci. [Vyhledat dokumenty](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Související články - [Restrikční endonukleázy - Molekulární nůžky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) Termín "restrikční enzym" pochází ze studií fága λ (lambda fág) Enterobacteria v laboratořích Wernera Arbera a Matthewa Meselsona. - [Klonování zájmových genů do plazmidového vektoru](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-cloning-manual-cloning) Tento klonovací protokol zahrnuje výběr klonovacího systému a plazmidového vektoru, restrikční štěpení plazmidu, restrikční štěpení fragmentů, excizi z gelu, defosforylaci DNA a další. - [Úvod do transfekce buněk](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/transfection-reagents) Transfekcí se do buněk zavádí genetický materiál, což napomáhá výzkumu v oblasti genové exprese a buněčné biologie. - [3xFLAG® System Expression Vectors for Ultra-Sens](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/3x-flag) The 3xFLAG system enhances fusion protein detection, offering improved sensitivity over traditional methods. - [SIG10 Chemically Competent Cells](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/sig10-chemically-competent-cells) For best results, ligation reactions must be heat inactivated at 70º C for 15 minutes before transformation. Alternately, the reactions may be purified. - [Zobrazit vše (31)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Související protokoly - [Protokol o digesci restrikčních enzymů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-digest-protocol) Kolekce restrikčních enzymů byla optimalizována pro trávení pomocí pěti jedinečných pufrů. - [pGEX Vectors](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/pgex-vectors) This page describes the characteristics of pGEX expression vectors used with Cytiva products. - [DNA Ligation Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dna-ligation-kit) Cloning process, joining linear DNA into a vector, is crucial for biotechnological experiments, enabling DNA fragment recombinant technology. - [Protokoly kompetentních buněk](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/microbial-cell-culture/competent-cells) Technický článek o kompetentních buňkách. Transformace je proces, při kterém některé bakterie přijímají cizí genetický materiál (holou DNA) z prostředí. - [Dephosphorylation Procedures for DNA and Proteins](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dephosphorylation) Dephosphorylation of DNA using Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, Shrimp Alkaline Phospha, Bovine Intestinal Alkaline Phosphatase - [Zobrazit vše (42)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### Další články a protokoly Zadejte klíčová slova Vyhledávání ## Jak vám můžeme pomoci V případě jakýchkoli dotazů odešlete [žádost o zákaznickou podporu](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/customer-support) nebo se obraťte na náš tým zákaznického servisu: Pište [[email protected]](mailto:[email protected]) nebo volejte na +1 (800) 244-1173 ## Další podpora - [Kalkulačky a aplikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/calculators-and-apps) Web Toolbox - vědecké výzkumné nástroje a zdroje pro analytickou chemii, vědu o živé přírodě, chemickou syntézu a materiálovou vědu. - [Customer Support Request](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/customer-support) Zákaznická podpora včetně pomoci s objednávkami, produkty, účty a technickými problémy s webovými stránkami. - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services. * * * __Doporučené články__ [Modrobílý screening a protokoly pro výběr kolonií](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/blue-white-screening) Seznamte se s technikou modrobílé obrazovky používanou v molekulární biologii k identifikaci rekombinantních bakteriálních klonů pro další analýzu a najděte protokoly pro tuto techniku. [Restrikční endonukleázy - Molekulární nůžky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) Termín "restrikční enzym" pochází ze studií fága λ (lambda fág) Enterobacteria v laboratořích Wernera Arbera a Matthewa Meselsona. [Bacterial Transformation Protocols](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/competent-cells) General protocols for growth of competent cells and their transformation (uptake of DNA). [Promotérský systém T7](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/t7-promoter-system) Bakteriální expresní vektory: T7 Promotorový systém. Vektory T7 pro nejvyšší úrovně exprese v bakteriích. Nejvyšší __Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.__ Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet. Přihlásit__Nemáte účet?__Registrovat Toto je strojově přeložená stránka. An unknown error has occured. - Czech - CS - English - EN [Zjistit více](https://www.sigmaaldrich.com)