Testování mykoplazmy ve farmacii
Kontaminace mykoplazmaty je rozšířeným a opakujícím se problémem mnoha systémů buněčných kultur v biologickém výzkumu a farmaceutickém průmyslu. Mykoplazmata mohou v kultivačních médiích růst do vysokých titrů, aniž by vykazovala typické znaky bakteriální kontaminace, jako je zákal. Jejich účinky na kultivované buňky zahrnují změnu metabolismu, zpomalení proliferace a chromozomální aberace. Stručně řečeno, kontaminace mykoplazmaty ohrožuje validitu údajů postižených buněčných linií a výsledků v biologickém výzkumu. Proto je testování na přítomnost mykoplazmy , a tedy udržování buněčných kultur bez kontaminace, zásadní pro výzkum založený na buňkách a pro výrobu zboží, kde je zdraví spotřebitelů hlavním zájmem.
Doporučené kategorie
Mikrobiální kultivační médium je směs látek, která podporuje růst a diferenciaci mikroorganismů.
Zkoušky sterility jsou nezbytnou součástí validace výrobků vyráběných podle SVP, které mají být sterilní.
Zajistěte bezpečnost: Pyrogenní testy jsou nezbytné pro léčiva a přístroje. Test aktivace monocytů (MAT) detekuje endotoxiny a neendotoxinové pyrogeny.
Objevte pokročilá řešení pro monitorování prostředí a simulaci aseptických procesů ve farmaceutické výrobě. Zajistěte shodu se zásadami GMP pomocí našich specializovaných nástrojů a médií pro čisté prostory, izolátory a RABS.
Služby testování biologické bezpečnosti
Služby testování biologické bezpečnosti zkoumání mAbs a materiálů pro buněčnou a genovou terapii a vakcín, aby se zajistilo, že neobsahují náhodné činitele nebo neočekávané výsledky, které mohou způsobit katastrofální selhání při následném zpracování, včetně:
O bakteriích Mycoplasma
Mycoplasma patří mezi nejmenší známé bakterie, které jsou schopny projít filtry o velikosti pórů 0,2 µm. Tyto mikroorganismy rostou aerobně nebo za fakultativně anaerobních podmínek.
Mycoplasmy jsou buď parazitické, nebo saprofytické. Některé druhy, například M. pneumoniae, jsou patogenní a způsobují u lidí zápal plic a další respirační poruchy. M. genitalium se pravděpodobně podílí na pánevních zánětlivých onemocněních. Jako bakterie, které nemají buněčnou stěnu, nejsou mykoplazmata citlivá na penicilin nebo jiná antibiotika, která na tuto strukturu působí. Ke stabilizaci své cytoplazmatické membrány potřebuje většina mykoplazmat steroly, které přijímají z okolí, obvykle ve formě cholesterolu od svých zvířecích hostitelů. Mnoho kmenů mykoplazmy je také tolerantních k řadě dalších antibiotik.
Vyhledejte v našem vyhledávači dokumentů datové listy, certifikáty a technickou dokumentaci.
Zdroje mykoplazmové kontaminace
Zdroje mykoplazmové kontaminace v laboratoři a ve výrobě jsou velmi náročné na kontrolu. Některé druhy se vyskytují na lidské kůži a mohou se do kultur dostat špatnými aseptickými postupy. Kromě toho mohou být mykoplazmata zavlečena prostřednictvím kontaminovaných doplňků, jako je fetální hovězí sérum, nebo nejčastěji přenosem z jiných kontaminovaných buněčných kultur. Jakmile buněčná kultura obsahuje mykoplazmy, mohou se tyto mikroby rychle šířit a kontaminovat další oblasti laboratoře prostřednictvím aerosolů a částic vznikajících při manipulaci s kulturami. Klíčové je přísné dodržování správné aseptické laboratorní praxe a pro úspěšnou kontrolu kontaminace mykoplazmaty ve výrobních prostorách se důrazně doporučuje rutinní testování kultur.
Proč testování mykoplazmy ve farmaceutickém průmyslu?
Biofarmaceutická zařízení, která používají eukaryotické buňky k výrobě vakcín, musí testovat své buněčné banky a osivo virů, jakož i hromadné vakcíny na kontaminaci mykoplazmou. Druhy tohoto bakteriálního rodu infikují eukaryotické buňky a narušují jejich růst a metabolismus. Pokud mykoplazmata zasahují do výroby vakcín, může to mít vliv na kvalitu a výtěžnost bílkovin, a co je důležitější, může to způsobit nežádoucí účinky u pacientů, kterým je podáván finální vakcinační produkt.
Kontaminace bioreaktorů mykoplazmaty může vést k významným ztrátám času, materiálu a příjmů, pokud není odhalena v rané fázi výrobního procesu. Bez důsledných testovacích postupů, kontaminace mykoplazmaty výrobních šarží biofarmak je velmi obtížné ji odhalit, protože přítomnost mykoplazmat obvykle nevede ke změnám pH nebo vizuálnímu zakalení kultivačního média. Kompendiální Mycoplasma testovací metoda zahrnuje jak kultivační, tak i indikátorové buněčné testy pro detekci. Pokud se k analýze používají pouze dvě média, doporučuje se použít kombinaci médií FREY a FRIIS.
Mycoplasma Testovací metody
Biofarmaka, vakcíny, buněčné kultury a virové kultury je důležité v různých fázích kontroly kvality testovat na přítomnost mykoplazmat. Tři nejběžnější testovací metody jsou následující:
- Kultivace mykoplazmat , kdy se do bakteriálního kultivačního média optimalizovaného pro mykoplazmata naočkují testované vzorky
- metody barvení DNA, při nichž se jádra mykoplazmy kontrasvětlí Hoechstem nebo DAPI a zobrazí se pomocí fluorescenční mikroskopie
- PCR (polymerázová řetězová reakce) k amplifikaci bakteriální DNA, pokud jsou ve vzorku přítomny mykoplazmy
Pracovní postup pro detekci mykoplazmat podle EP 2.6.7 & USP 63
* On days after inoculation, subculture each liquid medium by inoculating 0,2 mL on at least 1 plate of each solid medium. Repeat the procedure between the 6th and 8th day, again between the 13th and 15th day and again between the 19th and 21st day of the test. Observe the liquid media every 2 or 3 days and if a color change occurs, subculture.
Note: In addition, one positive and one negative control per solid and liquid medium is required, with an incubation time of 14 days.
Média připravená k použití pro detekci mykoplazmat
Poskytujeme kompletní portfolio tekutých a pevných kultivačních médií připravených k použití potřebných pro detekci mykoplazmat podle Evropského lékopisu 6.1 (2.6.7.) a USP 35 (63). Bez jakýchkoli dalších přípravných kroků zajišťují naše kultivační média připravená k použití Mycoplasma konstantní kvalitu produktu a úplnou sledovatelnost pomocí certifikátů analýz specifických pro danou šarži.
Vzhledem k jejich složení mají Mycoplasma média obecně mnohem kratší dobu použitelnosti než většina ostatních kultivačních médií pro mikrobiologickou kontrolu kvality. Skladovatelnost našich tekutých a pevných médií Friis, Frey a Hayflick připravených k použití byla prodloužena na 4 měsíce u agarových desek a 6 měsíců u bujónů. Vyzkoušejte naši kompletní řadu kultivačních médií připravených k použití s delší dobou použitelnosti, která vám usnadní testování mykoplazmy
.Související články
- Protokol buněčných kultur pro testování buněčných linií na kontaminaci mykoplasmou pomocí nepřímého barvení DNA s použitím Hoechstu 33342.
- Zobrazit vše (2)
Najít další články
Jak vám můžeme pomoci
V případě jakýchkoli dotazů odešlete žádost o zákaznickou podporu
nebo se obraťte na náš tým služeb zákazníkům:
Pište [email protected]
nebo volejte na +1 (800) 244-1173
Další podpora
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Kalkulačky a aplikace
Web Toolbox - vědecké výzkumné nástroje a zdroje pro analytickou chemii, vědu o živé přírodě, chemickou syntézu a materiálovou vědu.
- Customer Support Request
Zákaznická podpora včetně pomoci s objednávkami, produkty, účty a technickými problémy s webovými stránkami.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?