[Přejít k obsahu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) Produkty Nákupní košík0 CZCS Produkty ProduktyAplikaceSlužbyZdrojePodpora [Přihlášení / Registrovat se](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Dohledání objednávky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup) [Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order) Nákupní košík0 [Domů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs)[Klonování a exprese](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications/genomics/cloning-and-expression)Protokol o digesci restrikčních enzymů # Protokol o digesci restrikčních enzymů Naše kolekce restrikčních enzymů byla optimalizována pro trávení pomocí pěti jedinečných pufrů. Při štěpení DNA pomocí jednoho enzymu použijte pufr dodávaný s enzymem. ## Protokol pro digesci DNA pomocí jednoho restrikčního enzymu 1. Přidejte komponenty do čisté zkumavky v uvedeném pořadí:       1 µl DNA (koncentrace 1 µg/µl) .      2 µL 10x buffer      1 µl restrikčního enzymu      16 µl sterilní vody 2. Inkubujte reakci při teplotě trávení (obvykle 37 °C) po dobu 1 hodiny. 3. Trávení zastavte tepelnou inaktivací (65 °C po dobu 15 minut) nebo přidáním 10 mM EDTA konečné koncentrace. 4. Trávená DNA je připravena k použití ve výzkumných aplikacích. Při použití dvou restrikčních enzymů najednou nejprve zkontrolujte aktivity enzymů v jednotlivých pufrech pomocí tabulky na Referenčním materiálu pufrů restrikčních enzymů. Pokud mají oba enzymy 100% aktivitu ve stejném pufru, můžete pokračovat v protokolu dvojité digesce s použitím tohoto pufru. Případně můžete optimální pufr určit z tabulky běžných dvojitých štěpení. V některých případech se doporučuje sekvenční trávení z důvodu nekompatibility pufrů (složení nebo teplota). ## Protokol digesce DNA pomocí dvou restrikčních enzymů 1. Přidejte komponenty do čisté zkumavky v uvedeném pořadí:       1 µl DNA (koncentrace 1 µg/µl) .      2 µL 10x buffer      1 µl každého restrikčního enzymu      15 µl sterilní vody 2. Inkubujte reakci při teplotě trávení (obvykle 37 °C) po dobu 1 hodiny. 3. Trávení zastavte tepelnou inaktivací (65 °C po dobu 15 minut) nebo přidáním 10 mM EDTA konečné koncentrace. 4. Trávená DNA je připravena k použití ve výzkumných aplikacích. ## Protokol sekvenční digesce DNA 1. Přidejte komponenty do čisté zkumavky v uvedeném pořadí:       1 µl DNA (koncentrace 1 µg/µl)      2 µl 10x pufru            2 µl 10x pufrunbsp; 1 µl restrikčního enzymu      16 µl sterilní vody 2. Inkubujte reakci při teplotě trávení (obvykle 37 °C) po dobu 1 hodiny. 3. Rozklad zastavte tepelnou inaktivací (65 °C po dobu 15 minut) nebo přidáním 10 mM konečné koncentrace EDTA. 4. Znovu získejte DNA pomocí purifikační soupravy: znovu suspendujte a nařeďte DNA na 1 µg/µl. 5. Připravte druhý rozklad podle kroku 1. Pokračujte krokem 3. 6. Trávená DNA je připravena k použití ve výzkumných aplikacích. __Související články__ - [Úvod do transfekce buněk](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/transfection-reagents) - [Modrobílý screening a protokoly pro výběr kolonií](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/blue-white-screening) - [Úvod do transformace kvasinek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/introduction-to-yeast-transformation) - [Restrikční endonukleázy - Molekulární nůžky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) - [Klonování zájmových genů do plazmidového vektoru](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-cloning-manual-cloning) - [Promotérský systém T7](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/t7-promoter-system) - [Reverse Transfection of Plasmid DNA](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/xtg-reverse-transfect-pdna) - [3xFLAG® System Expression Vectors for Ultra-Sens](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/3x-flag) - [Zobrazit více](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) __Související kategorie výrobků__ - [Detekční substráty a enzymy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/protein-biology/proteins-and-enzymes/detection-substrates-and-enzymes) - [Biologické pufry](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) Nejvyšší __Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.__ Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet. Přihlásit__Nemáte účet?__Registrovat Toto je strojově přeložená stránka. Podpora[Zákaznická podpora](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/customer-support)[Kontaktujte nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices)[ČASTO KLADENÉ DOTAZY](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/)[Bezpečnostní listy (SDS)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=sds)[Certifikáty (COA/COO)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=coa)[Kvalita a regulace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/quality-and-regulatory-management)[Kalkulačky a aplikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/calculators-and-apps)[Webové semináře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/webinars) Objednávky[Vyhledávání objednávek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup)[Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order)[Vlastní produkty](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/services/custom-products)[Řešení pro elektronické obchodování](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ecommerce/ecommerce-solutions) Společnost[O nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/about-us)[Odpovědnost](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ssbi)[Události](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/events)[Tiskové zprávy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/press)[Programy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/partnership-programs)[Kariéra](https://careers.merckgroup.com/global/en)[Kanceláře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices) Sociální média [](https://www.linkedin.com/company/merck-life-science) [](https://x.com/Merck_lifesci) [](https://www.facebook.com/Merck.lifescience) [](https://www.instagram.com/mercklifescience/) [](https://www.youtube.com/@MerckLifeScience/featured) Merck __Výzkum. Vývoj.__ Jsme předním dodavatelem pro světový průmysl Life Science s řešeními a službami pro výzkum, vývoj a výrobu biotechnologií a vývoj a výrobu farmaceutických léčiv. [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) [Sigma-Aldrich® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/sigma-aldrich)[BioReliance® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/bioreliance)[Millipore® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/millipore)[SAFC® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/safc)[Milli-Q® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/milliq)[Supelco® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/supelco) © 2026 Merck KGaA, Darmstadt, Německo a/nebo její pobočky. Všechna práva vyhrazena, včetně vytěžování textu a dat pro trénink umělé inteligence a podobných technologií. Reprodukce jakýchkoli materiálů z těchto stránek je bez povolení přísně zakázána. [Podmínky používání webu](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/site-use-terms)|[Zásady ochrany osobních údajů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/privacy-statement)|[Všeobecné podmínky prodeje](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/terms-and-conditions)|[Souhlas s autorskými právy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/copyright-consent)|[Mapa stránek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/site-map) An unknown error has occured.