[Přejít k obsahu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) Produkty Nákupní košík0 CZCS Produkty ProduktyAplikaceSlužbyZdrojePodpora [Přihlášení / Registrovat se](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Dohledání objednávky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup) [Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order) Nákupní košík0 [Domů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs)[Extrakce v pevné fázi (SPE)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications/analytical-chemistry/sample-preparation/solid-phase-extraction)Metodika iontové výměny # Metodika iontové výměny Aby mohlo dojít k elektrostatické retenci, musí být funkční skupiny analytu i sorbentu ve své ionizované formě. Toho se dosáhne přísnou kontrolou pH matrice vzorku. U zásaditých analytů je třeba upravit pH alespoň o 2 jednotky pH pod pKa molekuly. U kyselých analytů je třeba upravit pH alespoň o 2 jednotky pH nad pKa molekuly. Pro eluci platí opačný postup. Úpravou pH eluantu na hodnotu alespoň o dvě jednotky pH vyšší nebo nižší než pKa analytů a/nebo sorbentu lze účinně neutralizovat jednu nebo obě funkční skupiny, čímž se naruší elektrostatická interakce a umožní se eluce. Poznámka: Protože kinetické procesy výměny mezi funkčními skupinami vzorku a sorbentu jsou u iontové výměny podstatně pomalejší než u normální a obrácené fáze, průtok by měl být kapkový (~1 kapka/sekundu). Může být také nutné zvýšit eluční a promývací objemy a poskytnout dostatečnou dobu setrvání pro interakci mobilní a stacionární fáze.  __Obrázek 1.__Metodika iontové výměny Mechanismus zadržování:Elektrostatická přitažlivost nabitých funkčních skupin analytu (analytů) k opačně nabitým funkčním skupinám na sorbentu. Kombinace reverzní fáze a iontové výměny pro smíšený režim Matrice vzorku: Vodné nebo organické vzorky s nízkou koncentrací solí (< 0.1M) - Biologické kapaliny - Reakce syntézy v roztokové fázi Vlastnosti analytu: Analyty vykazující nepolární funkční vlastnosti - Pro izolaci kyselých sloučenin použijte aniontovou výměnu: karboxylové kyseliny, sulfonové kyseliny a fosforečnany - K izolaci bazických sloučenin použijte kationtovou výměnu: Eluční schéma: Elektrostatické interakce narušeny prostřednictvím: - Modifikace pH za účelem neutralizace sloučeniny a/nebo funkčních skupin sorbentu - Zvýšení koncentrace soli (> 1M); nebo použití selektivnějšího protiiontu, který soutěží o iontově-výměnná vazebná místa Obvyklé aplikace: - Drogy zneužívané a farmaceutické sloučeniny v biologických tekutinách - Odstranění mastných kyselin ve vzorcích potravin/zemědělských produktů - Odstranění syntetických reakcí - Organické kyseliny z moči - Herbicidy v půdě Tabulka 1.Iontově výměnná a smíšená SPE ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Selektivita protiiontů & iontová výměna: Selektivita protiiontů je definována jako míra, do jaké je protiiont schopen soutěžit s jinými protiionty o funkční skupinu sorbentu iontoměniče. Retence je usnadněna tím, že sorbent a/nebo matrice vzorku jsou předem připraveny s protiiontem, který je méně selektivní než funkční skupina analytu (minimální konkurence). Eluce analytu je usnadněna použitím pufrů s protiionty selektivnějšími než funkční skupina analytu. Pro kationtové měniče: - Ca2+ > Mg2+ > K+ > Mn2+ > RNH3 .2+ > NH4+ > Na+ > H+ > Li+ Pro aniontové výměníky: - Benzensulfonát > Citrát > HSO4- > NO3-<-/sup> > HSO3- > NOsub>2- > Cl- > HCO3- > HPO4- > mravenčan > acetát > propionát > F- > OH- Chcete-li přejít na vyšší selektivní ion, propusťte přes sorbent 2-5 objemů lůžka 1N roztoku nového protiiontu. Chcete-li změnit na nižší selektivní ion, propusťte přes sorbent 5-65 objemů 1N roztoku nového protiiontu. __Poznámka__: Počet objemů lože závisí na tom, o kolik je nový protiiont méně selektivní než stávající protiiont na sorbentu. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Základní kroky 1. __Předúprava vzorku__ Koncentrace soli by měla být menší než 0,1M. Vzorek zřeďte v poměru 1:1 s pufrem o vhodném pH, abyste zajistili ionizaci funkčních skupin analytu. Příklady: - Základní sloučeniny: zřeďte s 10-25 mM pufrem (např. fosforečnanem draselným nebo octanem amonným), pH 3-6 - Kyselé sloučeniny: zřeďte s 10-50 mM pufrem (např, acetátovým pufrem), pH 7-9 Pro vzorky zatížené interferencemi (např, biologické tekutiny), které obsahují různé úrovně koncentrace solí, použijte technologii SPE se smíšeným režimem. 2. __Kondicionování/ekvilibrace__ Pokud jsou vzorky v nepolárním rozpouštědle, mělo by se ke kondicionování zařízení SPE použít stejné rozpouštědlo. V případě vodných vzorků kondicionujte 1-2 objemy zkumavky s metanolem nebo acetonitrilem. Vyrovnejte pufrem s podobným/identickým pH a koncentrací solí jako pufr použitý při předúpravě vzorku. 3. __Zatížení vzorku__ Naneste vzorek (z kroku 1) při konstantní a snížené průtokové rychlosti ~ 1-2 kapky za sekundu, abyste zajistili optimální retenci. Kinetika přenosu hmoty u iontově-výměnné SPE je pomalejší než u reverzní a normální fáze. Snížená průtoková rychlost je rozhodující pro konzistentní výtěžnost. 4. __Vymývání__ Je třeba udržovat odpovídající kontrolu pH a iontové síly, aby se zabránilo předčasnému vymývání zájmových analytů. K odstranění polárních interferencí použijte pufr o vhodném pH (např. pufr používaný při předúpravě vzorku). Hydrofobnější interference lze odstranit použitím až 100% metanolu zředěného v pufru pro předúpravu vzorku. 5. __Eluce__ Eluce probíhá při konstantní a snížené průtokové rychlosti ~1-2 kapky/sekundu, aby byla zajištěna optimální desorpce sloučenin. Nejběžnější strategií eluce je manipulace s pH. Také většina iontoměničů vykazuje určité chování ve smíšeném režimu. K narušení sekundárních interakcí na reverzní fázi je nutné přidat organický modifikátor. Příklady: - Základní sloučeniny: eluujte 2-5% hydroxidem amonným v 50-100% metanolu - Kyselé sloučeniny: eluujte 2-5% kyselinou octovou v 50-100% metanolu. Další strategie eluce: - Použijte eluát SPE o vyšší koncentraci soli (> 1M) - Použijte selektivnější protiiont, který bude soutěžit o iontově-výměnná vazebná místa/li> 6. __Dodatečná úprava eluátu__ K dispozici je řada elučních strategií. Různé eluční strategie by měly být testovány a optimalizovány, aby se minimalizovalo následné zpracování eluátu. __Související články__ - [Stanovení formaldehydu a acetaldehydu ve vzduchu pomocí DNPH kartuší a automatizované on-line desorpce s následnou HPLC](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/protocol/environmental-testing-and-industrial-hygiene/air-testing/aldehydes-air-dnph) - [Vliv přísad mobilní fáze na citlivost LC-MS, demonstrovaný pomocí kanabinoidů Spice](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/small-molecule-hplc/lcms-spice-cannabinoids) - [Metoda LC/MS/MS pro stanovení glyfosátu, AMPA a glufosinátu v obilovinách](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/solid-phase-extraction/method-for-determination-of-glyphosate) - [Effect of Container Materials on Milk Off-Flavors](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/gas-chromatography/container-materials) - [Pesticide Residue Analysis in Ginger Powder with QuEChERS](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/quechers/analysis-of-pesticide-residues-in-ginger-powder) - [Analysis of Pesticide Residues in Pistachios Using QuEChERS Extraction and Cleanup with Supel™ QuE Z-Sep+](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/quechers/analysis-of-pesticide-residues-in-pistachios) - [HybridSPE-Phospholipid Technology](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/small-molecule-hplc/hybridspe-precipitation-technology) - [Solvent Analysis for 40 Per and Polyfluoroalkyl Substances](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/small-molecule-hplc/solvent-analysis-for-40-per-and-polyfluoroalkyl-substances) - [Zobrazit více](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) Nejvyšší __Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.__ Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet. Přihlásit__Nemáte účet?__Registrovat Toto je strojově přeložená stránka. Podpora[Zákaznická podpora](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/customer-support)[Kontaktujte nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices)[ČASTO KLADENÉ DOTAZY](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/)[Bezpečnostní listy (SDS)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=sds)[Certifikáty (COA/COO)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=coa)[Kvalita a regulace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/quality-and-regulatory-management)[Kalkulačky a aplikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/calculators-and-apps)[Webové semináře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/webinars) Objednávky[Vyhledávání objednávek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup)[Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order)[Vlastní produkty](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/services/custom-products)[Řešení pro elektronické obchodování](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ecommerce/ecommerce-solutions) Společnost[O nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/about-us)[Odpovědnost](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ssbi)[Události](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/events)[Tiskové zprávy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/press)[Programy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/partnership-programs)[Kariéra](https://careers.merckgroup.com/global/en)[Kanceláře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices) Sociální média [](https://www.linkedin.com/company/merck-life-science) [](https://x.com/Merck_lifesci) [](https://www.facebook.com/Merck.lifescience) [](https://www.instagram.com/mercklifescience/) [](https://www.youtube.com/@MerckLifeScience/featured) Merck __Výzkum. Vývoj.__ Jsme předním dodavatelem pro světový průmysl Life Science s řešeními a službami pro výzkum, vývoj a výrobu biotechnologií a vývoj a výrobu farmaceutických léčiv. [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) [Sigma-Aldrich® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/sigma-aldrich)[BioReliance® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/bioreliance)[Millipore® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/millipore)[SAFC® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/safc)[Milli-Q® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/milliq)[Supelco® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/supelco) © 2026 Merck KGaA, Darmstadt, Německo a/nebo její pobočky. Všechna práva vyhrazena, včetně vytěžování textu a dat pro trénink umělé inteligence a podobných technologií. Reprodukce jakýchkoli materiálů z těchto stránek je bez povolení přísně zakázána. [Podmínky používání webu](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/site-use-terms)|[Zásady ochrany osobních údajů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/privacy-statement)|[Všeobecné podmínky prodeje](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/terms-and-conditions)|[Souhlas s autorskými právy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/copyright-consent)|[Mapa stránek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/site-map) An unknown error has occured.