[Přejít k obsahu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) Produkty Nákupní košík0 CZCS Produkty ProduktyAplikaceSlužbyZdrojePodpora [Přihlášení / Registrovat se](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Dohledání objednávky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup) [Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order) Nákupní košík0 [Domů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs)[Aplikace polymerázové řetězové reakce](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/applications/genomics/pcr)Vlastní primery LAMP ve spolupráci s New England Biolabs # Vlastní primery LAMP ve spolupráci s New England Biolabs  [NEB LAMP Primer Design Tool](https://lamp.neb.com/#!/) [Žádost o cenovou nabídku](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/campaigns/custom-lamp-primers-request) * * * - [Design primerů pro lampy](https://www.sigmaaldrich.com#primer-design) - [Zajištění kvality](https://www.sigmaaldrich.com#quality-assurance) - [SARS-CoV-2 Targets](https://www.sigmaaldrich.com#sars-targets) - [References](https://www.sigmaaldrich.com#references) V kombinaci s detekcí v reálném čase je LAMP (loop-mediated isothermal amplification) oblíbenou technologií izotermické amplifikace, která se používá k vytvoření COVID-19 [molekulární diagnostiky](https://www.360dx.com/coronavirus-test-tracker-launched-covid-19-tests). Důvodem je pravděpodobně mimo jiné to, že LAMP, konkrétně RT-LAMP (reverzní transkripční LAMP) v případě SARS-CoV-2, je robustní metoda specifické detekce nukleových kyselin. Přestože jsou tyto metody robustní, je stále nejlepší optimalizovat reakci i její složky. To platí zejména s ohledem na to, že LAMP je dobře známá tím, že produkuje falešné amplikony, které mohou vést k falešně pozitivním výsledkům1. Zatímco optimalizace reakce je na vývojáři testu, prodejci musí vést cestu optimalizace komponent. Polymeráza vytěsňující vlákna, např. *Bst* DNA polymeráza, která katalyzuje reakci LAMP, je důležitou složkou, jejíž vlastnosti podléhají přímému zlepšování, např. pomocí mutageneze řízené na místě2. Rychlým a nepřímým způsobem, jak "vylepšit polymerázu", je vylepšení další neméně důležité složky, primerů. Nejlepším způsobem, jak toho dosáhnout, je vyladit purifikační metody používané ve výrobním procesu (obrázek 1). Běžná je buď desaltová, nebo HPLC purifikace oligonukleotidů LAMP a často je možné obě metody upravit tak, aby vznikly optimalizované primery. Primery LAMP na zakázku, odvozené od našich [iScale Oligos™](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/custom-iscale-oligos), jsou určeny k maximalizaci funkce primerů LAMP v testech, které mají být použity jako nástroje pro výzkum v oblasti přírodních věd, molekulární diagnostiku a laboratorně vyvinuté testy.  __Obrázek 1.__Přehled hlavních kroků používaných ve výrobním procesu vlastních primerů LAMP (kroky před syntézou a za purifikací byly pro zjednodušení vynechány). ## __Návrh primerů LAMP__[](https://www.sigmaaldrich.com) Základní informace o návrhu primerů LAMP na zakázku a přístup k bezplatnému nástroji pro návrh naleznete ve vynikajících zdrojích dostupných na [New England Biolabs](https://www.neb.com/faqs/2016/09/28/how-do-i-design-lamp-primers1).   ## Výhody produktu - K dispozici jsou množství vyhovující potřebám od výzkumu a vývoje až po komercializaci - Konzultace s naším vědeckým týmem při stanovení konečných specifikací - Specializované čištění zajišťující vysoce výkonné primery ## Vlastnosti produktu V případě čehokoli označeného níže jako "Dotaz" nebo pokud máte potřeby, které se liší od ostatních uvedených obecných specifikací, zašlete prosím požadavek na [dnaoligos@sial.com.](mailto:sirnarequest@milliporesigma.com) ### Specifikace vlastních primerů LAMP Množství- 10 mg až 2 g (pro větší množství se ptejte) [Purifikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/dna-and-rna-purification/best-purification)\*- Desalt (nedefinováno) &; HPLC (≥85%) Délky sekvencí- 10 až 50 bází (pro delší délky poptat) [Modifikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/custom-dna-oligos-modifications)-Dotaz na proveditelnost modifikací [Kontrola kvality](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/custom-dna-oligos-qc-qa)- 100% hmotnostní spektrometrie \- K dispozici je analytická HPLC \- K dispozici je certifikát analýzy Formát- Dodává se v suchém stavu nebo v roztoku ve zkumavkách (informujte se o možnosti jiných formátů) \*Primery FIP/BIP doporučujeme čistit minimálně pomocí HPLC. ## Zajištění kvality[](https://www.sigmaaldrich.com) Základem našich výrobních procesů je robustní [Systém řízení kvality (QMS)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/oligonucleotide-quality-assurance-quality-management-system-components), který řídí dodržování našich následujících [Registrace kvality](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/custom-dna-oligos-quality-registrations): - ISO 9001:2015 pro výrobu oligonukleotidů pro výzkum - ISO 13485:2016 pro výrobu oligonukleotidů pro diagnostiku - ISO 14001:2015 pro efektivní environmentální řízení ## Primery LAMP pro SARS-CoV-2[](https://www.sigmaaldrich.com) Kromě toho, že se jedná o robustní metodu, jak je popsáno výše, obliba kolorimetrické RT-LAMP jako molekulární diagnostiky rychle roste, zejména pro SARS-CoV-2, protože umožňuje rychlou detekci s minimálním přístrojovým vybavením. V současné době používá několik testů EUA (Emergency Use Authorization) primery uvedené v tabulce 1, které jsou popsány v článku, [*Zvýšení rychlosti a citlivosti kolorimetrické smyčkové izotermické amplifikace pomocí guanidinchloridu*3](https://doi.org/10.2144/btn-2020-0078). Přímé testování několika koncovými uživateli ukázalo, že naše vlastní primery LAMP vedly k výjimečnému výkonu se sadami primerů E1, N2 a As1e. ### Cíle SARS-CoV-2 Sada sekvencí E1 Název oligoSekvenceTypické poměry primerů\*Doporučené čištění E1-F3TGAGTACGAACTTATGTACTCAT1XDesalt E1-B3TTCAGATTTTTAACACGAGAGT1XDesalt E1-FIPACCACGAAAGCAAGAAAAAGAAGTTCGTTTCGGAAGAGACAG8-10XHPLC E1-BIPTTGCTAGTTACACTAGCCATCCTTAGGTTTTACAAGACTCACGT8-10XHPLC E1-LFCGCTATTAACTATTAACG2XDesalt E1-LBGCGCTTCGATTGTGTGCGT2XDesalt | | | | | |------------------|--------------------------------------------|-------------------------|--------------------| | Sada sekvencí N2 | | | | | Název oligo | Sekvence | Typické poměry primerů* | Doporučené čištění | | N2-F3 | ACCAGGAACTAATCAGACAAG | 1X | Desalt | | N2-B3 | GACTTGATCTTTGAAATTTGGATCT | 1X | Desalt | | N2-FIP | TTCCGAAGAACGCTGAAGCGGAACTGATTACAAACATTGGCC | 8-10X | HPLC | | N2-BIP | CGCATTGGCATGGAAGTCACAATTTGATGGCACCTGTGTA | 8-10X | HPLC | | N2-LF | GGGGGCAAATTGTGCAATTTG | 2X | Desalt | | N2-LB | CTTCGGGAACGTGGTTGACC | 2X | Desalt | | | | | | |------------------------------|--------------------------------------------------|-------------------------|--------------------| | Sada sekvencí As1e | | | | | Název oligo | Sekvence | Typické poměry primerů* | Doporučené čištění | | As1e-F3/td> | CGGTGGACAAATTGTCAC | 1X | Desalt | | As1e-B3 | CTTCTCTGGATTTAACACACTT | 1X | Desalt | | As1e-FIP | Desalt | 8-10X | HPLC | | As1e-BIP | TATTGGTGAGCTAAACTTAAAGCCTTTTCTGTACAATCCCTTTGAGTG | 8-10X | HPLC | | TTACAAGCTTAAAGAATGTCTGAACACT | 2X | Desalt | | | As1e-LB | TTGAATTTAGGTGAAACATTTGTCACG | 2X | Desalt | Tabulka 1. Sady primerů E1, N2 a As1e, které se v současné době používají v několika testech EUA pro detekci SARS-CoV-2. Zahrnuty jsou typické poměry primerů a doporučené purifikace. \*Typické poměry primerů znamenají, že FIP/BIP musí být přítomny 8-10krát více než F3/B3 a LF/BF musí být přítomny 2krát více, aby chemie LAMP fungovala správně. ### Odkazy 1\. Jiang YS, Bhadra S, Li B, Wu YR, Milligan JN, Ellington AD. 2015. Robust Strand Exchange Reactions for the Sequence-Specific, Real-Time Detection of Nucleic Acid Amplicons. Anal. Chem.. 87(6):3314-3320. [https://doi.org/10.1021/ac504387c](https://doi.org/10.1021/ac504387c) 2\. Maranhao A, Bhadra S, Paik I, Walker D, Ellington AD. An improved and readily available version of Bst DNA Polymerase for LAMP, and applications to COVID-19 diagnostics. [https://doi.org/10.1101/2020.10.02.20203356](https://doi.org/10.1101/2020.10.02.20203356) 3\. Zhang Y, Ren G, Buss J, Barry AJ, Patton GC, Tanner NA. 2020. Enhancing colorimetric loop-mediated isothermal amplification speed and sensitivity with guanidine chloride. BioTechniques. 69(3):178-185. [https://doi.org/10.2144/btn-2020-0078](https://doi.org/10.2144/btn-2020-0078) 4\. Huang X, Tang G, Ismail N, Wang X. 2022. Developing RT-LAMP assays for rapid diagnosis of SARS-CoV-2 in saliva. eBioMedicine. 75103736. [https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2021.103736](https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2021.103736) Technickou pomoc vám poskytne naše [skupina technických služeb](mailto:oligotechserv@sial.com). __Související kategorie výrobků__ - [Oligonukleotidy a sondy pro qPCR na míru](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/molecular-biology-and-functional-genomics/oligos-and-qpcr-probes/custom-predesigned-dna-oligos-and-qpcr-probes) - [RNA oligonukleotidy na míru i předem navržené, siRNA duplexy a kontrolní vzorky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/products/molecular-biology-and-functional-genomics/oligos-and-qpcr-probes/custom-predesigned-rna-oligos-sirna-duplexes-controls) Nejvyšší __Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.__ Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet. Přihlásit__Nemáte účet?__Registrovat Toto je strojově přeložená stránka. Podpora[Zákaznická podpora](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/customer-support)[Kontaktujte nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices)[ČASTO KLADENÉ DOTAZY](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/)[Bezpečnostní listy (SDS)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=sds)[Certifikáty (COA/COO)](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/documents-search?tab=coa)[Kvalita a regulace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/quality-and-regulatory-management)[Kalkulačky a aplikace](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/support/calculators-and-apps)[Webové semináře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/webinars) Objednávky[Vyhledávání objednávek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/order-lookup)[Rychlá objednávka](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/quick-order)[Vlastní produkty](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/services/custom-products)[Řešení pro elektronické obchodování](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ecommerce/ecommerce-solutions) Společnost[O nás](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/about-us)[Odpovědnost](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/ssbi)[Události](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/events)[Tiskové zprávy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/press)[Programy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/partnership-programs)[Kariéra](https://careers.merckgroup.com/global/en)[Kanceláře](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/collections/offices) Sociální média [](https://www.linkedin.com/company/merck-life-science) [](https://x.com/Merck_lifesci) [](https://www.facebook.com/Merck.lifescience) [](https://www.instagram.com/mercklifescience/) [](https://www.youtube.com/@MerckLifeScience/featured) Merck __Výzkum. Vývoj.__ Jsme předním dodavatelem pro světový průmysl Life Science s řešeními a službami pro výzkum, vývoj a výrobu biotechnologií a vývoj a výrobu farmaceutických léčiv. [](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs) [Sigma-Aldrich® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/sigma-aldrich)[BioReliance® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/bioreliance)[Millipore® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/millipore)[SAFC® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/safc)[Milli-Q® Roztoky](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/milliq)[Supelco® Řešení](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/supelco) © 2026 Merck KGaA, Darmstadt, Německo a/nebo její pobočky. Všechna práva vyhrazena, včetně vytěžování textu a dat pro trénink umělé inteligence a podobných technologií. Reprodukce jakýchkoli materiálů z těchto stránek je bez povolení přísně zakázána. [Podmínky používání webu](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/site-use-terms)|[Zásady ochrany osobních údajů](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/privacy-statement)|[Všeobecné podmínky prodeje](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/terms-and-conditions)|[Souhlas s autorskými právy](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/life-science/legal/copyright-consent)|[Mapa stránek](https://www.sigmaaldrich.com/CZ/cs/site-map)