TAQKB

KAPA-Taq-PCR-Kit

• Synonym(e): PCR, Taq
• NACRES: NA.54
• UNSPSC Code: 41106300

Eigenschaften

• shelf life: ≤18 mo.
• feature: dNTPs included: no, hotstart: no
• packaging: pkg of 250 U (KK1014), pkg of 2500 U (BK1000), pkg of 500 U (KK1015), pkg of 5000 U (BK1002)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): PCR: suitable
• input: purified DNA
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

Application

Vorhandene Anw. – KAPA-Taq-PCR-Kit wird eingesetzt für:

• Hochdurchsatz-PCR
• Amplifikation von DNA-Templates mit niedriger Kopienzahl
• Multiplex-PCR
• Spezifische Amplifikation komplexer Templates
• RT-PCR
• zufällig vervielfältigte polymorphe DNA-Polymerase-Kettenreaktion (RAPD-PCR)

Biochem/physiol Actions

Das KAPA-Taq-PCR-Kit, das die KAPA-Taq-DNA-Polymerase enthält, basiert auf der einzelnen Untereinheit der Wildtyp-Taq-DNA-Polymerase des thermophilen Bakteriums Thermus aquaticus. KAPA-Taq- und KAPA-Taq-HotStart^® DNA-Polymerase weisen 5′→3′-Polymerase- und 5′→3′-Exonuklease-Aktivitäten auf, jedoch keine 3′ → 5′-Exonuklease-(Korrekturlese)-Aktivität. Das Enzym hat eine Fehlerrate von etwa 1 Fehler pro 2,2 x 10⁵ eingebauten Nukleotiden. In der HotStart-Formulierung wird die KAPA-Taq mit einem proprietären Antikörper kombiniert, der das Enzym bis zum ersten Denaturierungsschritt inaktiviert, wobei unerwünschte Amplifikationsprodukte eliminiert und die Reaktionseffizienz und -empfindlichkeit erhöht werden.

Features and Benefits

Hohe Leistung:

• Hohe Empfindlichkeit, Spezifität und Ausbeute
• Die neuartige Pufferformulierung erleichtert spezifisches Primer-Glühen, was zu einer höheren Ausbeute an spezifischem Produkt führt.

Einige Anmerkungen:

• KAPA-Taq-DNA-Polymerase kann jede kommerzielle Taq-DNA-Polymerase in einem bestehenden Protokoll ersetzen.
• Die endgültige MgCl₂-Konzentration muss möglicherweise optimiert werden, um Unterschiede in der Pufferformulierung zu berücksichtigen.
• KAPA-Taq-Puffer enthalten MgCl₂ in einer Endkonzentration von 1,5 mM. Puffer A wird als erster Ansatz und für Anwendungen, die hohe Erträge erfordern, empfohlen. Puffer B wird für Anwendungen empfohlen, bei denen eine hohe Sensitivität erforderlich ist (wenn z. B. das Template begrenzt ist). Beide Puffer können ausgewertet werden, um den für eine bestimmte Anwendung am besten geeigneten Puffer zu bestimmen.
• Das KAPA-Taq-PCR-System eignet sich für die Amplifikation von Fragmenten von bis zu 3,5 kb aus genomischer DNA oder von 5 kb aus weniger komplexen Targets.

Preparation Note

Stellen Sie stets sicher, dass das Produkt vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt ist. Reagenzien können kurzzeitig (bis zu 1 Monat) bei 4 °C aufbewahrt werden. Die langzeitige Lagerung sollte bei -20 °C erfolgen.

Analysis Note

Jede Charge der KAPA-Taq-DNA-Polymerase enthält nachweislich <2 % kontaminierendes Protein (Agilent-Protein-230-Assay). KAPA-Taq-Ready-Mischungen werden strengen Qualitätskontrolltests unterzogen, sind frei von kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen in Bezug auf DNA-Kontamination.

Other Notes

Nur für Forschungszwecke. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Legal Information

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

Nur Kit-Komponenten

• KAPA Taq Standard or HotStart^® DNA Polymerase 5 U/μL
• 10X KAPA Taq Buffer A
• 10X KAPA Taq Buffer B
• MgCl₂ 25 mM

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash