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Merck

A5441

Anti-β-Actin (ACTB) Antibody

mouse monoclonal, AC-15

Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse

Synonym(e):

Monoklonales Anti-β-Aktin

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
Conjugate:
unconjugated
Clone:
AC-15, monoclonal
Application:
ELISA (i), IF, IHC (p), WB
Citations:
10789

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Produktname

Monoklonales Anti-β-Aktin in Maus hergestellte Antikörper, clone AC-15, ascites fluid

biological source

mouse

conjugate

unconjugated

antibody form

ascites fluid

antibody product type

primary antibodies

clone

AC-15, monoclonal

mol wt

antigen 42 kDa

contains

15 mM sodium azide

species reactivity

sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig

should not react with

Dictyostelium discoideum

technique(s)

immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, indirect ELISA: suitable, indirect immunofluorescence: 1:1,000-1:2,000 using cultured human or chicken fibroblasts, western blot: 1:5,000-1:10,000 using cultured human or chicken fibroblast cell extracts

isotype

IgG1

UniProt accession no.

application(s)

research pathology

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

target post-translational modification

unmodified

Quality Level

Gene Information

human ... ACTB(60)
mouse ... Actb(11461)
rat ... Actb(81822)

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F3777T5168T4026
conjugate

unconjugated

conjugate

FITC conjugate

conjugate

unconjugated

conjugate

unconjugated

clone

AC-15, monoclonal

clone

1A4, monoclonal

clone

B-5-1-2, monoclonal

clone

TUB 2.1, monoclonal

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

mouse

Gene Information

human ... ACTB(60)
mouse ... Actb(11461)
rat ... Actb(81822)

Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

Gene Information

human ... TUBA4A(7277)
mouse ... Tuba1a(22142)
rat ... Tuba1a(64158)

Gene Information

human ... TUBB(203068), TUBB1(81027), TUBB1(81027), TUBB1(81027), TUBB1(81027), TUBB2A(7280), TUBB2A(7280), TUBB2A(7280), TUBB2A(7280), TUBB2C(10383), TUBB2C(10383), TUBB2C(10383), TUBB2C(10383)
mouse ... Tubb1(104068), Tubb1(104068), Tubb1(104068), Tubb1(104068), Tubb2a(22151), Tubb2a(22151), Tubb2a(22151), Tubb2a(22151), Tubb2c(227613), Tubb2c(227613), Tubb2c(227613), Tubb2c(227613)
rat ... Tubb2(29212), Tubb2(29212), Tubb2(29212), Tubb2(29212), Tubb2c(296554), Tubb2c(296554), Tubb2c(296554), Tubb2c(296554)

antibody form

ascites fluid

antibody form

purified from hybridoma cell culture

antibody form

ascites fluid

antibody form

ascites fluid

species reactivity

sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig

species reactivity

human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

species reactivity

mouse, chicken, Chlamydomonas, African green monkey, human, rat, bovine, sea urchin, kangaroo rat

species reactivity

human, rat, frog, moth, mouse, plant, rabbit, chicken, bovine, wheat, sea urchin, hamster

General description

Beim Anfärben von ultradünnen Kryo-Gewebeschnitten von Hühner-Kaumagen markiert der Antikörper die Verdichtungszonen (Dense Bodies) und Intermediärfilamente aus Desmin, die aufeinanderfolgende Dense Bodies verbinden, sowie die membranassoziierten Anheftungsplaques (Dense Plaques). Er färbt keine adulten Herz- und Skelettmuskeln an, außer in Spuren, wenn Kontaminationen der Probe mit anderen als Muskelzellen vorhanden sind, oder wenn embryonales Gewebe verwendet wird.
Monoklonales Anti-β-Aktin (Maus-IgG1-Isotyp) stammt aus dem AC-15-Hybridom, das durch die Fusion von Maus-Myelomzellen und Splenozyten einer immunisierten Maus hergestellt wird. Aktin ist eines der am stärksten konservierten eukaryotischen Proteine und wird als mindestens sechs Isoformen in Säugetieren und Vögeln exprimiert. Vier von ihnen repräsentieren die Differenzierungsmarker von Muskelgewebe und zwei sind in fast allen Zellen zu finden. Es gibt drei α-Aktine (α-Skelett-, α-Herz- und α-Glattmuskel), ein β-Aktin (β-Nichtmuskel) und zwei γ-Aktine (γ-Glattmuskel und γ-Nichtmuskel). Die Aktinisoformen weisen insgesamt > 90 % Sequenzhomologie auf, jedoch nur 50−60 % Homologie in ihren 18 NH2-terminalen Resten. Die NH2-terminale Aktinregion scheint eine Haupt-Antigenregion zu sein und ist möglicherweise an der Interaktion von Aktin mit anderen Proteinen wie Myosin beteiligt. Der Antikörper kann zum Anfärben von Aceton-fixierten Gefrierschnitten und EM-Präparaten sowie in Mikroinjektionsexperimenten verwendet werden. Als Fixiermittel können B5, Ethanol, Methacam oder Bouin′sche Lösung verwendet werden. Das vom Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung.

Immunogen

leicht modifiziertes β-zytoplasmatisches N-terminales Aktin-Peptid, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, konjugiert mit KLH.

Application

Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper der Maus wurde in folgenden Anwendungen eingesetzt:
  • bei der Immunfluoreszenzfärbung
  • beim Immunblotting
  • in der Immunhistochemie
  • als Kontrolle für Protein-Arrays
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von Leberproteinlysaten aus Ratten verwendet.
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von immungefällten Proteinen aus Ratten-Spinalganglien-Co-Kulturen verwendet.

Biochem/physiol Actions

Aktin und Myosin sind Bestandteile vieler Zelltypen und an unzähligen Zellvorgängen beteiligt, darunter Fortbewegung, Zytokinese, Zytoplasmaströmung, Sekretion und Phagozytose. Das Aktin in Zellen verschiedener Spezies und aus unterschiedlichen Geweben weist sehr ähnliche immunologische und physikalische Eigenschaften auf.
Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper erkennt ein Epitop im N-terminalen Bereich der β-Isoform von Aktin. Bei Immunblots (42 kDa), der Immunfluoreszenzfärbung kultivierter Zelllinien und bei der Immunhistochemie markiert der Antikörper spezifisch β-Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies.

Physical form

Wird als Aszitesflüssigkeit mit 15 mM Natriumazid als Konservierungsmittel geliefert.

Disclaimer

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Fragen

1-8 von 8 Fragen  
  1. species of antigen

    1 Antwort
    1. This is not a species specific antigen, it is a slightly modified β-cytoplasmic actin N-terminal peptide, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugated to KLH. It has multi-species reactivity as it is a highly conserved region of the protein among species.

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  2. Why do I have 3 bands on my western blot when using Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?

    1 Antwort
    1. While actin should run as a 42 kDa band when detected by Western blotting, there are recent observations that cleavage products can be seen in cells undergoing apoptosis. Initial cleavage gives a band at 41 kDa, which may appear as a doublet on the blot. In addition, further cleavage results in a major band at 30 kDa and a small band at 14 kDa which have been shown to be cleavage products due to the action of interleukin 1 -converting enzyme. This may explain the detection of smaller bands when blotting with this antibody. This banding pattern may be detected with other actin antibodies as well. Kayalar, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:2234-2238, (1996).

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  3. Can I use Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse, to detect mouse beta actin?

    1 Antwort
    1. This antibody will detect mouse beta actin.  When used for western blotting, the secondary antibody may react with mouse IgG from the sample resulting with a bands at 50 kDa and 25 kDa (reducing conditions) or approximately 150 kDa (non-reducing conditions).  It is best to use a directly conjugated antibody for immunohistochemistry or immunofluorescent assays.  We offer Product numbers A3854, peroxidase conjugated.

      Hilfreich?

  4. What is the antibody concentration of Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?

    1 Antwort
    1. This antibody is ascities fluid.  The amount of protein present and the amount of IgG1 present is indicated on the Lot-specific Certificate of Analysis.

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  5. What is the molecular weight of Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?

    1 Antwort
    1. Beta Actin has a molecular weight of 42 kDa.

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  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 Antwort
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Hilfreich?

  7. What IgG light chain (kappa or lambda) is associated with Clone AC-15 for Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?

    1 Antwort
    1. We have not determined the light chain used by monoclonal antibody AC-15.  95% of mouse antibodies have kappa light chains.

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  8. What peroxidase-conjugated secondary antibody should I use with Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?

    1 Antwort
    1. We recommend using Product No. A9044, rabbit anti-mouse IgG, peroxidase conjugate as a secondary antibody. We also offer this same antibody directly conjugated to peroxidase as Product No. A3854.

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