Dulbeccos modifiziertes Eagle-Medium (DMEM)
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ist eines der am besten geeigneten Medien für viele adhärente Zellphänotypen unter den definierten Medien für die Zell- und Gewebekultur. Dazu gehören Säugetierzellen, Insektenzellen und Pflanzenzellen. Das ursprüngliche Eagle's Medium wurde in den 1950er Jahren entwickelt und war für die Kultivierung von Hühnerzellen bestimmt. Bei der Dulbecco's-Modifikation handelt es sich jedoch um eine verbesserte Zusatzformulierung, die den Gehalt an ausgewählten Aminosäuren und Vitaminen im Vergleich zum ursprünglichen Eagle's Medium um das bis zu Vierfache erhöht. In der Zellkultur wird DMEM als Medium zur Unterstützung des Wachstums verschiedener Zelltypen verwendet, darunter Primärzellen, Stammzellen und transformierte Zellen. Die modifizierte Version von DMEM kann auch für verschiedene Forschungsanwendungen wie die Entdeckung von Arzneimitteln, die Gewebezüchtung und die Untersuchung von Zellsignalwegen verwendet werden.
DMEM ist für sich genommen kein vollständiges Medium, da ihm notwendige Nährstoffe wie Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren fehlen. Daher muss es mit anderen Komponenten ergänzt werden, wie z.B. fötales Rinderserum (FBS), Aminosäuren und andere Nährstoffe, um eine vollständige und ausgewogene Wachstumsumgebung für die Zellen in der Kultur zu schaffen.
Unser Angebot umfasst eine Reihe von Glukosekonzentrationen sowie Formulierungen mit und ohne L-Glutamin. Für östrogenempfindliche Anwendungen sind Produkte ohne den pH-Indikator Phenolrot erhältlich, und unser umfassendes Angebot umfasst bequeme, gebrauchsfertige Flüssigformate sowie wirtschaftliche Medien in Pulverform für eine einfachere Lagerung und längere Haltbarkeit.
DMEM - hohe Glukose vs. niedrige Glukose
DMEM ist in verschiedenen Zusammensetzungen erhältlich, je nach den spezifischen Bedürfnissen der zu kultivierenden Zellen und den Zielen der experimentellen Arbeit. Das ursprüngliche Medium wurde mit einem niedrigen Glukosegehalt von 1 g/L formuliert und eignet sich für die Kultivierung von Zellen, die empfindlich auf hohen Glukosegehalt reagieren und in Medien mit hohem Glukosegehalt nicht gedeihen können. DMEM mit hohem Glukosegehalt enthält jedoch 4,5 g/L Glukose und wird normalerweise für die Kultivierung von Zellen verwendet, die für ein optimales Wachstum einen hohen Glukosegehalt benötigen.
Serumfreie Medien (SFM)
Serum ist ein Bestandteil vieler Zellkulturmedien und wird häufig verwendet, um die Medien mit Hormonen, Wachstumsfaktoren und anderen Nährstoffen zu ergänzen, die für das Wachstum und die Vermehrung von Zellen erforderlich sind. Serum kann jedoch Verunreinigungen und Schadstoffe enthalten, die die Versuchsergebnisse beeinträchtigen können, und seine Verwendung kann ethische Bedenken aufwerfen.
Serumfreie Medien sind frei von tierischem Serum oder anderen aus Tieren gewonnenen Komponenten. Diese Medien bestehen aus geeigneten Nährstoff- und Hormonformulierungen, die das Wachstum und die Vermehrung von Zellen in der Kultur unterstützen.
Zu den Vorteilen der Verwendung serumfreier Medien für die Zellkultur gehören eine höhere Produktivität, eine bessere Konsistenz und eine einfachere Reinigung und Weiterverarbeitung. Serumfreie Medien können auch mit spezifischen Kombinationen von Wachstumsfaktoren für bestimmte Zelltypen und Forschungsziele formuliert werden. Diese Medien eignen sich für ein breites Spektrum von Zellkulturanwendungen, einschließlich der Herstellung rekombinanter Proteine, der Untersuchung von Zellwachstum und -differenzierung, der Untersuchung zellulärer Signalwege, der Herstellung viraler Impfstoffe sowie der Entdeckung und Entwicklung von Arzneimitteln.
Ein solches serumfreies Medium ist DMEM mit Ham's F-12, das für das Wachstum von Säugetierzellen wie MDCK, Gliazellen, Fibroblasten, menschlichen Endothelzellen und Rattenfibroblasten verwendet wird. DMEM enthält hohe Konzentrationen an Aminosäuren, Glukose und Vitaminen und Ham's F12 liefert Zink, Putrescin, Hypoxanthin und Thymidin. Puffer wie FBS und HEPES können hinzugefügt werden, um den Verlust an Pufferkapazität auszugleichen.
DMEM mit und ohne Phenolrot
Phenolrot ist ein pH-Indikator, der bei verschiedenen pH-Werten die Farbe ändert und üblicherweise DMEM in einer Konzentration von 0,01-0,03% zugesetzt wird. Er ist nützlich, um den pH-Wert des Mediums zu überwachen und sicherzustellen, dass er innerhalb des für das Zellwachstum und den Zellstoffwechsel geeigneten Bereichs bleibt.
Einige Zellen können empfindlich auf Phenolrot reagieren oder durch dessen Anwesenheit im Medium beeinträchtigt werden, daher ist auch DMEM ohne Phenolrot erhältlich. Bei einigen nachgeschalteten Anwendungen wie der Proteinanalyse oder der Genexpressionsanalyse könnte das Vorhandensein von Phenolrot im Medium störend wirken. Für einige bildgebende Verfahren, wie z. B. die Fluoreszenzmikroskopie, kann die Verwendung von DMEM ohne Phenolrot ebenfalls erforderlich sein, um genaue Ergebnisse zu erzielen. Phenolrot absorbiert Licht im sichtbaren Spektrum und kann daher die Genauigkeit dieser Verfahren beeinträchtigen. Die Wahl zwischen DMEM mit und ohne Phenolrot hängt von den spezifischen Bedürfnissen und Anforderungen der zu kultivierenden Zellen und den Zielen der experimentellen Arbeit ab.
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