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Die Komponenten in der angegebenen Reihenfolge in ein sauberes Röhrchen geben:      1 µl DNA (Konzentration 1 µg/µl) 2 µl 10x-Puffer 1 µl Restriktionsenzym 16 µl steriles Wasser 2. Die Reaktion eine Stunde bei Verdautemperatur (üblicherweise 37 °C) inkubieren. 3. Den Verdau durch Wärme-Inaktivierung (65 °C über 15 Minuten) oder Zugabe von 10 mM EDTA-Endkonzentration beenden. 4. Die verdaute DNA kann für Forschungszwecke verwendet werden. Wenn zwei Restriktionsenzyme gleichzeitig verwendet werden, zunächst die Enzymaktivitäten in jedem Puffer anhand der Tabelle in der Pufferreferenz für Restriktionsenzyme prüfen. Wenn beide im gleichen Puffer eine Aktivität von 100 % aufweisen, kann mit dem Doppelverdauungsprotokoll in diesem Puffer fortgefahren werden. Alternativ kann der optimale Puffer auch anhand der Tabelle der üblichen Doppelverdauungen ermittelt werden. In einigen Fällen wird ein sequenzieller Verdau aufgrund von Pufferunverträglichkeiten (Zusammensetzung oder Temperatur) empfohlen. ## Protokoll für den DNA-Verdau mit zwei Restriktionsenzymen 1. Die Komponenten in der angegebenen Reihenfolge in ein sauberes Röhrchen geben:      1 µl DNA (Konzentration 1 µg/µl) 2 µl 10x-Puffer je 1 µl Restriktionsenzym 15 µl steriles Wasser 2. Die Reaktion eine Stunde bei Verdautemperatur (üblicherweise 37 °C) inkubieren. 3. Den Verdau durch Wärme-Inaktivierung (65 °C über 15 Minuten) oder Zugabe von 10 mM EDTA-Endkonzentration beenden. 4. Die verdaute DNA kann für Forschungszwecke verwendet werden. ## Protokoll für den sequenziellen DNA-Verdau 1. Die Komponenten in der angegebenen Reihenfolge in ein sauberes Röhrchen geben:      1 µl DNA (Konzentration 1 µg/µl) 2 µl 10x-Puffer 1 µl Restriktionsenzym 16 µl steriles Wasser 2. Die Reaktion eine Stunde bei Verdautemperatur (üblicherweise 37 °C) inkubieren. 3. Den Verdau durch Wärme-Inaktivierung (65 °C über 15 Minuten) oder Zugabe von 10 mM EDTA-Endkonzentration beenden. 4. Wiederherstellen der DNA mit einem Aufreinigungskit: Die DNA resuspendieren und auf 1 µg/µl verdünnen. 5. Einen zweiten Verdau gemäß Schritt 1 vorbereiten. Mit Schritt 3 fortfahren. 6. Die verdaute DNA kann für Forschungszwecke verwendet werden. __Zugehörige Artikel__ - [Blau-Weiß-Screening und Protokolle für die Kolonieauswahl](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/blue-white-screening) - [Protokolle zur Bakterientransformation](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/competent-cells) - [Klonierung von Zielgenen in einen Plasmidvektor](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-cloning-manual-cloning) - [T7-Promoter-System](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/t7-promoter-system) - [Fehlerbehebung in der molekularen Klonierung](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/troubleshooting-for-molecular-cloning) - [Introduction to Cell Transfection](https://www.sigmaaldrich.com/DE/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/transfection-reagents) - [Reverse Transfection of Plasmid DNA](https://www.sigmaaldrich.com/DE/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/xtg-reverse-transfect-pdna) - [3xFLAG® System Expression Vectors for Ultra-Sens](https://www.sigmaaldrich.com/DE/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/3x-flag) - [Mehr anzeigen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) __Zugehörige Produktkategorien__ - [Nachweissubstrate & Enzyme](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/products/protein-biology/proteins-and-enzymes/detection-substrates-and-enzymes) - [Biologische Puffer](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) Oben __Melden Sie sich an, um fortzufahren.__ Um weiterzulesen, melden Sie sich bitte an oder erstellen ein Konto. 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Entwicklung. Produktion.__ Wir sind ein führender Anbieter für die globale Life Science Industrie mit Lösungen und Dienstleistungen für die Forschung, die biotechnologische Entwicklung und Produktion sowie die pharmazeutische Entwicklung und Produktion von Medikamenten. [](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de) [Sigma-Aldrich® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/sigma-aldrich)[BioReliance® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/bioreliance)[Millipore® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/millipore)[SAFC® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/safc)[Milli-Q® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/milliq)[Supelco® Lösungen](https://www.sigmaaldrich.com/DE/de/life-science/supelco) © 2026 Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland und/oder ihre Tochtergesellschaften. Alle Rechte vorbehalten, einschließlich Text und Data Mining für KI-Training und ähnliche Technologien. 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