Merck

Citología y citodiagnóstico

Tinción citológica para diagnóstico de frotis de Pap

La citología es el estudio de la estructura y la función de las células, mientras que el citodiagnóstico es el uso de la citología como una herramienta de diagnóstico. El citodiagnóstico depende de tinciones y protocolos muy específicos y bien establecidos para facilitar la identificación de anomalías de las células al microscopio. En citodiagnóstico humano, hay dos áreas de citología (ginecológica y no ginecológica) en las cuales las muestras se examinan para determinar la presencia de células malignas o premalignas. 

Muestreo citológico

En el citodiagnóstico, las células se extraen de la masa de tejido o del líquido de muestra y se transfieren a un portaobjetos para citología, se tiñen, se examinan y se evalúan. La arquitectura del tejido original queda irreconocible y no puede ayudar en el proceso de evaluación. Los materiales de muestra, como el esputo, la orina, los derrames de la cavidad corporal y el material de lavado, se centrifugan, y el sedimento se extiende en un portaobjetos microscópico. El material obtenido mediante biopsia simple con aguja fina (FNAB) o con ayuda de técnicas de imagen de la mama, el tiroides, los ganglios linfáticos, la próstata, el líquido cefalorraquídeo y otras ubicaciones se extiende con cuidado en los portaobjetos. Dependiendo del método de tinción, los frotis extendidos o bien se fijan de inmediato (tinción de Papanicolaou) o bien se dejan secar completamente al aire antes de la tinción hematológica o de otro tipo. 

Fijación para citología

Tinción citológica para diagnóstico de frotis de Pap

Una condición previa para un diagnostico citológico exacto es la fijación perfecta del material de muestra. Las muestras deben fijarse inmediatamente después de su recogida para evitar que se sequen y se encojan. La fijación inmediata retiene las características estructurales de la muestra para una tinción y una diferenciación claras. Los artefactos de la tinción pueden interferir en el diagnóstico si las muestras se fijan demasiado tarde. El método clásico de fijación consiste en sumergir el portaobjetos microscópico en etanol al 96 % durante 30 minutos. Una forma más eficiente de fijar las células es utilizar un fijador pulverizable. Los fijadores pulverizables son disoluciones hidroalcohólicas que contienen polietilenglicol (PEG). Son adecuados para todos los tipos de materiales citológicos teñidos por el método de Papanicolau.

Métodos de tinción para citodiagnóstico

La elección del colorante depende en gran medida del origen de la muestra y de la experiencia y la preferencia del investigador. Por ejemplo, la técnica de tinción de Papanicolaou no sólo se utiliza para los frotis ginecológicos, como los PAP, sino que también se utiliza de manera sistemática para el material no ginecológico, como los esputos, el líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial y la orina. La tinción de Giemsa se utiliza mucho para las muestras obtenidas mediante FNAB de los ganglios linfáticos. La tinción de Pappenheim se utiliza para los sedimentos urinarios, los derrames, el material de lavado bronquial y el material obtenido mediante FNAB de diversas ubicaciones (mama, tiroides líquido cefalorraquídeo). La tinción de Wright es una tinción hematológica que puede utilizarse para diferenciar los tipos de células sanguíneas. Las células teñidas se preparan para microscopia utilizando deshidratación convencional con alcohol/xileno, aclarado y montaje. Además de los métodos de tinción manuales, pueden utilizarse tinciones mecánicas y automatizadas para preparar un gran número de muestras. A continuación puede utilizarse un sistema de evaluación completamente automatizado para cribado, donde las muestras teñidas son evaluadas, las células o grupos de células anómalas son marcadas y las imágenes guardadas en una galería para su recuperación y ulterior investigación.

Interpretación del citodiagnóstico

Dependiendo de las técnicas de fijación, preparación y tinción empleadas, el examen microscópico del material puede realizarse inmediatamente. Esta característica hace que el citodiagnóstico sea adecuado para el cribado de grandes volúmenes, como los de cuello uterino. Un punto crucial en el citodiagnóstico es que los resultados de las investigaciones citológicas se relacionan directamente con la ubicación dónde se recogió la muestra. En relación a la eficacia, deben dominarse y controlarse por completo las técnicas de muestreo y de preparación. Deben utilizarse controles adecuados con cada aplicación para evitar un resultado incorrecto.

El éxito y la eficacia de la citología diagnóstica se miden por su capacidad para detectar cambios tempranos en la enfermedad (sensibilidad) evitando a la vez diagnósticos falsos positivos (especificidad). La sensibilidad y la especificidad dependen de la recogida, fijación, tinción e interpretación adecuadas de la muestra. Junto con las técnicas de diagnóstico por imagen, como los rayos X, la tomografía computarizada (CT), los ultrasonidos, la tomografía por espín nuclear y la tomografía de emisión de positrones (PET), la citología es una parte indispensable del diagnóstico. 


Artículos técnicos relacionados

  • Las metástasis son el resultado acumulativo de múltiples cambios en las células tumorales. Explore las metástasis tumorales empleando varios ensayos de migración e invasión celular, como el ensayo en la cámara Boyden, el ensayo de µ-migración Millicell® y el ensayo de raspado in vitro.
  • Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
  • For good cell attachment the hydrophobic polystyrene surface must be modified to a more hydrophilic surface. This allows cell attachment proteins (vitronectin and fibronectin) found in the serum containing culture medium to adhere and spread on the vessel bottom providing a better surface for cells to attach
  • For microbiologists the most fundamental stain was developed in 1884 by the Danish bacteriologist Hans Christian Gram.
  • What are primary cells? A comprehensive overview of animal and human primary cell lines and media and how they are used in biomedical cell culture applications. Primary cultures are less homogeneous relative to cell lines.
  • Ver todo (9)

Protocolos relacionados

Encuentre más artículos y protocolos





Inicie sesión para continuar.

Para seguir leyendo, inicie sesión o cree una cuenta.

¿No tiene una cuenta?