Electroforesis en gel de ácidos nucleicos
La electroforesis en gel de ácidos nucleicos es una técnica de biología molecular que permite separar, identificar y purificar fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño y carga. En esta técnica, las moléculas de ADN y ARN se separan aplicando un campo eléctrico que hace que los ácidos nucleicos con carga negativa se desplacen a través de una matriz de gel de agarosa o poliacrilamida.
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La matriz de gel actúa como un tamiz, lo que permite que las moléculas más cortas se desplacen más rápidamente a través de los poros del gel que las moléculas más largas.
- Los geles de agarosa se utilizan con mayor frecuencia para la electroforesis de ADN y ARN, y pueden separar fragmentos de ADN que oscilan entre 50 pares de bases (50 pb) y 50 000 pb mediante técnicas electroforéticas estándar.
- Los geles de poliacrilamida tienen un rango de separación más reducido y pueden separar fragmentos de ADN de menos de ~500 pb con una resolución muy alta.
- Tanto los geles de agarosa como los de poliacrilamida también pueden utilizarse en ensayos de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA) para caracterizar las interacciones entre proteínas y ácidos nucleicos.
Tras la electroforesis, las moléculas de ADN y ARN pueden visualizarse mediante el uso de colorantes o luz UV, extraerse y purificarse del gel, o transferirse para el blotting. Estos métodos son técnicas preparativas habituales en clonación, PCR, espectrometría de masas, secuenciación de nueva generación (NGS) y aplicaciones y flujos de trabajo de Northern y Southern blot.
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