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Purificación FLAG®

Primer plano de un laboratorio. El foco principal se centra en una pipeta azul que dispensa una gota en un pequeño recipiente de cristal parcialmente lleno de un líquido de color rosa. El fondo, aunque borroso, sugiere la presencia de otros instrumentos o recipientes de laboratorio.

Las etiquetas FLAG® permiten una detección superior y una purificación robusta de proteínas de fusión recombinantes, con una utilidad demostrada en numerosas aplicaciones posteriores, desde ensayos de unión y actividad hasta análisis estructurales. La etiqueta epitópica FLAG® es un péptido corto, hidrófilo, de ocho aminoácidos (etiqueta DYKDDDDK) que es fácilmente escindible por la enteroquinasa (EK). Debido a su pequeño tamaño y naturaleza hidrofílica, la etiqueta FLAG® suele residir en la superficie de la proteína de fusión, minimizando los efectos sobre la función, secreción o transporte de la proteína de fusión. Independientemente de su aplicación final, disponemos de las herramientas necesarias para expresar, purificar y detectar proteínas de fusión FLAG®.

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F1804
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
1 mg/mL, clone M2, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)
A2220
Gel ANTI-FLAG® M2 Affinity
purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
M8823
Microesferas magnéticas anti-FLAG® M2
affinity isolated antibody
F3165
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)
F4799
3xFLAG™ Peptide
≥90% (HPLC/MS), lyophilized powder
A8592
ANTI-FLAG® M2-Peroxidasa (HRP) monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
F7425
ANTI-FLAG® antibody produced in rabbit
affinity isolated antibody, buffered aqueous solution
F3290
Péptido FLAG®
≥85% (HPLC), lyophilized powder
F2426
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2
F4049
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution
B3111
ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
Clone M2, purified from hybridoma cell culture in bioreactor
F9291
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
A4596
ANTI-FLAG® M1 Agarose Affinity Gel
FLAGIPT1
FLAG® Immunoprecipitation Kit
F2555
Rabbit Monoclonal ANTI-FLAG® Clone SIGI-25
clone SIG1-25, ascites fluid
F3040
Monoclonal ANTI-FLAG® M1 antibody
clone M1, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution
A9594
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution (Supplied as a solution in 10 mM sodium phosphate)
A9469
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
P7582
Amino-terminal FLAG-BAP™ Fusion Protein
CELLMM2
FLAG® M Purification Kit
For Mammalian expression systems.
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Representación gráfica de un patrón de círculos y líneas morados interconectados sobre fondo amarillo. El diseño se asemeja a una estructura molecular simplificada o a un diagrama de red, lo que sugiere temas de interconectividad o relaciones.

FLAG® Tag Protein Expression

Nuestra cartera de FLAG® tag protein expression incluye vectores para la expresión eficiente de proteínas de fusión recombinantes en sistemas bacterianos y de mamíferos. La tecnología de vectores SnapFast™ le permite mover fácilmente el gen de interés de un vector a otro para una clonación más eficiente y rentable.

  • El péptido estándar FLAG® (secuencia: DYKDDDDK) es una etiqueta pequeña que puede incorporarse con un riesgo mínimo de impedimento estérico o impacto negativo en la solubilidad de la proteína
  • La etiqueta 3xFLAG® fusiona tres epítopos FLAG® en tándem para mejorar (hasta 200 veces) la detección de proteínas de fusión
un fondo amarillo vibrante con un cuadrado morado centrado que tiene las esquinas redondeadas. Dentro del cuadrado hay un diseño simétrico con tres flechas horizontales: una en la parte superior que apunta a la izquierda y a la derecha, una en el centro que apunta a ambos lados desde el centro y una en la parte inferior que refleja la flecha superior. Una línea vertical desciende desde la flecha superior a la inferior a través de sus puntos de simetría. Alrededor de estas flechas hay formas geométricas: círculos y rombos.

Purificación de proteínas marcadas con FLAG® 

Purificación de proteínas marcadas con FLAG® .Ofrecemos una variedad de geles de purificación por afinidad de agarosa, perlas magnéticas, kits de purificación y placas recubiertas para el aislamiento y la purificación de proteínas marcadas con FLAG®.

  • Geles de afinidad de agarosa permiten la purificación de proteínas etiquetadas por fusión utilizando anticuerpos anti-FLAG® reticulados a agarosa en microesferas, y son adecuados para la purificación a pequeña y gran escala, estas resinas son adecuadas para la purificación en columna de flujo por gravedad.
  • Anti-FLAG® M2 Magnetic Beads se utilizan para purificar proteínas recombinantes etiquetadas por fusión utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas y aislar la proteína para un procesamiento rápido.
  • Anti-FLAG® Placas de 96 pocillos recubiertas con M2 de alta sensibilidad son adecuadas para el cribado de expresión, el estudio de interacciones proteína-proteína y ensayos ELISA.
  • Las placas de 96 pocillos recubiertas con M2 de alta sensibilidad son adecuadas para el cribado de expresión, el estudio de interacciones proteína-proteína y ensayos ELISA.
Un dibujo lineal morado sobre fondo amarillo que parece una representación abstracta de la letra "K". El diseño es sencillo, de líneas limpias y sin adornos ni texturas adicionales.

Detección de etiquetas FLAG®

Las etiquetas FLAG® y 3xFLAG™ incluyen sitios de unión para etiquetas anti-FLAG® anticuerpos monoclonales así como anticuerpos policlonales y conjugados para ELISA, aplicaciones de blotting, inmunofluorescencia, inmunocitoquímica, inmunohistoquímica (IHC), blotting y citometría de flujo.

  • El M2 anti-FLAG® anticuerpo se une a FLAG N-terminal®, FLAG® C-terminal, y Met-FLAG® proteínas de fusión.
  • La unión del anticuerpo anti-FLAG® M1 es dependiente del calcio y específica para el extremo N-terminal de la etiqueta FLAG® .
  • El anticuerpo M5 anti-FLAG® se une a las proteínas de fusión FLAG® y Met-FLAG® N-terminal.
     Anticuerpo monoclonal anti-FLAG®./sup> M1 producido en ratónAnticuerpo monoclonal anti-FLAG® M2
    producido en ratón    		Anticuerpo monoclonal anti-FLAG® M5 producido en ratón
    Número de catálogoF3040F1804F3165F4042
    CloneM1M2M2
    FormaSolución acuosa tamponadaSolución acuosa tamponada de glicerol (sin azida sódica)Solución acuosa tamponada (contiene azida sódica)Solución acuosa tamponada
    Secuencia del inmunógenoDYKDDDDKDYKDDDDKDYKDDDDKDYKDDDDK
    Método de purificación de anticuerposPurificado en sefarosa de proteína APurificado en FLAG® patentado péptido-agarosaPurificado en Proteína A SefarosaPurificado en Proteína A Sefarosa
    KD53.4 nM9,3 nM9.3 nMNo disponible
    EspecificidadAltamente específico. Reconoce únicamente el epítopo FLAG® cuando se localiza en el N-terminal libre.Reconoce la secuencia FLAG® en el N-terminal, Met-N-terminal,
    C-terminal o en cualquier sitio interno de la proteína de fusión FLAG® .    		Reconocimiento fuerte de la proteína de fusión FLAG® Met-N. Unión débil con proteína de fusión N- o C-terminal.
    SensibilidadDetecta 1 ng de proteína de fusión FLAG-BAP™ en un dot blot.Detecta 2 ng de proteína en un dot blotDetecta <1 ng de proteína de fusión Met-FLAG® en un dot blot
    Recomendado para:Recomendado para la detección de proteínas de fusión FLAG® en sistemas de expresión de mamíferos, plantas y bacterias. Muy útil para la purificación por afinidad. No se recomienda para la detección de proteínas expresadas citoplasmáticamente.Detección Western blot de proteínas diana expresadas en E. coli,
    plantas o lisado de células brutas de mamíferos.    		Detección por Western blot de proteínas diana expresadas en lisado de células de mamíferos y drosófilas. Especialmente útil para la detección de proteínas de fusión Met-FLAG expresadas citoplasmáticamente. No se recomienda para la detección de proteínas de fusión expresadas en E. coli
    Aplicaciones*IP, IC, WB, EIAIP, IC, WB, EIAIP, IC, WB, EIAIP, IC, WB, EIAWB
    Requisitos especialesLa unión requiere calcio. (El complejo se disociará en ausencia de iones de calcio)N/AN/AN/A
    *IP=inmunoprecipitación; IC=inmunoquímica, WB=western blot, EIA=ensayo inmunoenzimático (ELISA).

    Características anticuerpo y de unión

    ANTI-FLAG M1

    Ratón
    IgG2b MAb/p>

    ANTI-FLAG M1

    Ratón
    IgG2b MAb

    ANTI-FLAG M2

    Ratón
    IgG1 MAb

    ANTI-FLAG
    M5
    Ratón
    IgG1 MAb

    Proteína de fusión FLAG N-terminal sin procesar:
    Péptido señal - FLAG - Proteína    		-+No determinado
    Proteína de fusión Met-N-terminal FLAG:
    Met - FLAG -Proteína    		-+++
    Proteína de fusión FLAG N-terminal:
    FLAG - Proteína    		++Débil
    Péptido FLAG interno:
    Proteína - FLAG - Proteína    		-+No determinado
    Proteína de fusión FLAG C-terminal:
    Proteína - FLAG    		-+Débil
    Unión dependiente del calcio
    (el complejo se disocia en un tampón que contiene EDTA)    		+--

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      Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.

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