Merck

Clonage moléculaire et expression protéique

Enzymes de restriction et vecteurs d'expression protéique

L'objectif du clonage moléculaire est d'insérer le gène d'intérêt dans un vecteur plasmidique, fragment d'ADN circulaire contenant différents éléments pour faciliter le clonage, la sélection des clones et l'expression des protéines. Les chercheurs utilisent souvent des enzymes de restriction de l'ADN et une ligase pour insérer le gène d'intérêt "en phase" dans le vecteur d'expression en vue d'une expression protéique ultérieure. Ce vecteur est ensuite inséré dans une cellule qui exprimera la protéine codée par le gène d'intérêt. L'expression de la protéine peut également être réalisée au moyen de systèmes de synthèse protéique acellulaires.

Une fois la protéine exprimée, sa fonction peut être étudiée selon ses effets sur la signalisation ou la morphologie cellulaire ou tout autre aspect au sein de la cellule. La protéine peut également être exprimée en grandes quantités, purifiée et utilisée dans de nombreuses applications en aval. Pour de plus amples informations, nous vous invitons à découvrir notre offre complète de ressources et de réactifs fiables, adaptés à chaque étape de la procédure de clonage et d'expression, pour les systèmes d'expression en cellules d'insectes, en bactéries et en cellules de mammifères.



Produits

Sort by Relevance
Showing 1-20 of 192
Page 1 of 10
Page 1 of 10
Showing 1-20 of 192
Compare
Product Number
Product Description
Pricing
Page 1 of 10
Page 1 of 10

Enzymes de restriction et enzymes de modification de l'ADN

En clonage moléculaire, les chercheurs utilisent souvent deux types d'enzymes : des enzymes de restriction pour couper l'ADN et des enzymes de modification pour modifier les acides nucléiques, souvent avant l'étape de ligature. Découvrez notre large éventail d'enzymes de restriction et d'autres enzymes de modification, comme la phosphatase alcaline, les protéases, l'ARN polymérase de T7, la ribonucléase A et l'ADN ligase de T4, pour tous vos besoins de recherche.

Systèmes d'expression acellulaires et vecteurs d'expression utilisant des promoteurs du cytomégalovirus (CMV) et la technologie de marquage FLAG®

Nos produits de clonage et d'expression rendent le génie génétique plus abordable et plus efficace. Nous proposons en effet une collection de vecteurs polyvalents à protocole simplifié et de kits de clonage. Faites votre choix parmi notre large gamme de systèmes de clonage et d'expression, notamment nos systèmes de synthèse ou d'expression protéique acellulaires comme le kit d'expression protéique acellulaire de dernière génération (germe de blé) (réf. CFPS700) et le kit ALiCE® (réf. AL0103000). Découvrez également nos vecteurs d'expression FLAG® en bactéries ou en cellules de mammifères pour une expression périplasmique ou cytoplasmique dans des systèmes de transfection stable ou transitoire, et ayez la garantie d'exprimer votre séquence FLAG® ou 3×FLAG® à l'extrémité N ou C-terminale avec un site de clivage par entérokinase (Ek) pour supprimer, si nécessaire, l'étiquette de la protéine de fusion.

Systèmes d'expression protéique Novagen® pET, Simplicon™, UCOE™ et vecteurs SnapFast

Tous les vecteurs d'expression pour E. coli ou pour cellules d'insectes confèrent une résistance à l'ampicilline pour faciliter la sélection des transformants positifs. Découvrez le système Novagen® pET, référence absolue en matière de clonage et d'expression de protéines recombinantes dans les bactéries. Conçue par Oxford Genetics, la famille de vecteurs SnapFast™ permet de transférer un gène d'intérêt d'un vecteur à un autre de manière simple et rapide, au moyen des sites de clivage SnapFast™, produisant ainsi des vecteurs compatibles avec les systèmes d'expression en cellules d'insectes, en levures, en bactéries et en cellules de mammifères. Avec notre technologie de vecteurs d'expression UCOE™ ("Ubiquitous Chromatin Opening Element", élément ubiquitaire d'ouverture de la chromatine), vous pouvez obtenir plusieurs grammes de protéine en moins de 30 jours dans des cellules de mammifères transfectées de façon stable. La technologie d'expression UCOE™ évite que le transgène reste silencieux et assure une expression uniforme, stable et de haut niveau (jusqu'à 20 fois plus élevée qu'avec les vecteurs classiques), indépendamment du site d'intégration chromosomique. Le système d'expression protéique in vivo Simplicon™ est un système d'expression à base d'ARN autorépliquant, synthétique, modifiable et sans intégration génomique qui permet l'expression protéique immédiate et soutenue de plusieurs gènes dans des cellules humaines transfectées, sans risque d'intégration dans le génome hôte. Pour en savoir plus, nous vous invitons à regarder notre vidéo : Simplicon™ technology utilized for efficient human iPSCs generation.

Ressources et réactifs pour la transformation de bactéries et de levures

La transformation bactérienne est un procédé qui consiste à insérer de l'ADN étranger dans une bactérie par des techniques telles que le choc thermique ou l'électroporation. Notre gamme de cellules compétentes est conçue pour une expression optimale des protéines recombinantes, même les plus difficiles. Consultez notre guide de sélection de cellules compétentes et faites votre choix parmi une multitude de nouvelles cellules bactériennes compétentes pour diverses applications (expression de protéines, clonages de routine ou difficiles, constitution de banques…). De plus, l'expression de protéines recombinantes dans Saccharomyces cerevisiae présente de nombreux avantages, notamment la simplicité des protocoles, l'utilisation de réactifs standards et la transposabilité. Découvrez les nombreux produits que nous proposons pour la transformation de levures dans le cadre de la procédure d'expression protéique. Nos cellules compétentes NovaBlue®, optimisées pour l'efficacité de la transfection et la préservation des plasmides, permettent la préparation de banques de grande qualité tout en favorisant la stabilité des plasmides. Enfin, les cellules compétentes Novagen® sont conçues pour faciliter le bon repliement des protéines et augmenter la solubilité ou l'expression exprimer de protéines cytotoxiques. Les marques les plus prisées sont Rosetta™, Origami™ et Overnight Express™.