Les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont couramment utilisés dans la recherche fondamentale et la découverte de nouveaux médicaments. Les biothérapies faisant appel à des anticorps représentent également une proportion croissante des nouveaux traitements. La chromatographie d'affinité réalisée sur des supports couplés à de la protéine A, de la protéine G et de la protéine L joue un rôle crucial dans les procédures d'isolement et de production d'anticorps purifiés, à l'échelle du laboratoire, à l'échelle de production et à l'échelle industrielle.
Les billes d'agarose et les gels d'affinité permettent de purifier les anticorps grâce à de la protéine A ou de la protéine G greffée sur l'agarose en billes. Adaptées à la purification à petite ou grande échelle, ces résines conviennent à la purification sur colonne gravitaire, à la centrifugation à faible vitesse en traitement discontinu ("batch processing") et à la chromatographie basse pression. Les gels d'affinité EZview™ intègrent un colorant rouge qui permet à l'utilisateur de différencier facilement le culot du surnageant, minimisant ainsi la perte de protéines lors d'une purification en mode "batch". Les kits d'immunoprécipitation comprennent des gels d'affinité, des mini-colonnes de centrifugation et un réactif de lyse. Ils sont spécialement conçus pour une récupération maximale des protéines contenues dans les immunoprécipités.
La Sepharose™ à haut débit et l'agarose à haut débit utilisent des gels ou des billes d'agarose hautement greffées capables de supporter des pressions plus élevées que les billes d'agarose classiques. Ces résines sont donc adaptées aux méthodes de purification par chromatographie liquide rapide des protéines (FPLC pour "Fast Protein Liquid Chromatography"). Ces résines sont recommandées pour la purification d'anticorps à moyenne et grande échelles.
Les billes magnétiques PureProteome™ revêtues de protéine A, de protéine G et de protéines A/G constituent un moyen rapide et reproductible de purifier les immunoglobulines contenues dans des mélanges complexes tels que les échantillons de sérum, de plasma ou de surnageant de culture. Les anticorps sont purifiés à l'aide d'une plateforme ou d'un rack magnétique afin de séparer les billes des fractions de lavage et d'élution. Cette méthode est adaptée aux techniques à bas débit utilisant des microtubes à centrifuger individuels ou aux techniques à haut débit automatisées.
Il existe un large choix de supports de chromatographie Amersham™ de Cytiva pour la purification d'anticorps monoclonaux et polyclonaux provenant de différentes sources.
Tableau : Affinité des immunoglobulines pour la protéine A, la protéine G et la protéine L |
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