细胞学与细胞学诊断

巴氏涂片样本的诊断细胞学染色

细胞学是研究细胞结构和功能的学科,而细胞学诊断则是细胞学在诊断上的应用。细胞学诊断利用显微镜并依靠完善、高度特异性的染色和实验方案来实现细胞异常鉴定。人类细胞学诊断主要分为妇科和非妇科细胞学两个领域,两者都通过检查标本来确定是否存在恶性病变和恶性细胞。

细胞学取样

在细胞学诊断中,科学家将细胞从组织块或样品液中提取出来,然后转移到细胞载玻片上进行染色、检查和评估。这会导致原始组织的结构无法识别,无助于评估过程。正确的做法是先将痰液、尿液、体腔积液和灌洗物质等样本材料进行离心,然后将沉淀物涂在显微镜载玻片上进行分析。而来自乳腺、甲状腺、淋巴结、前列腺、脑脊液和其他部位的图像辅助或简易细针穿刺活检(FNAB)材料只需小心地涂在载玻片上即可。根据染色方法的不同,有的涂片样本需立即进行固定(帕帕尼科拉乌氏染色),有的则需要在进行血液学或其他染色前在空气中彻底干燥。

细胞学固定

巴氏涂片样本的诊断细胞学染色

完美固定好的样本材料有助于精准的细胞学诊断。样本在收集后必须立即进行固定以防止细胞干燥和收缩,从而有利于保留样本的结构特征,实现清晰的染色和区分,否则样本固定不及时,会产生染色伪影干扰诊断。传统的固定方法是将显微镜载玻片浸入96%的乙醇中30分钟。而使用喷雾固定剂固定细胞则是另一种更有效的方法。喷雾固定剂是一种含有聚乙二醇(PEG)的水-醇溶液,适用于经帕帕尼科拉乌氏染色的所有类型的细胞学材料。

细胞学诊断的染色方法

染色剂的选择很大程度上取决于样本的来源以及研究者的经验和偏好。例如,帕帕尼科拉乌氏染色技术不仅用于诸如PAP涂片的妇科涂片,也常用于痰液、脑脊液、滑液和尿液等非妇科材料。姬姆萨染液广泛应用于取自淋巴结的FNAB样本。帕彭海姆氏染液可用于取自乳腺、甲状腺、脑脊液等不同位置的尿沉渣、积液、支气管灌洗材料和FNAB材料。赖特氏染剂是一种可用于区分血液细胞类型的血液学染料。用于显微镜检查的染色细胞可使用标准的乙醇/二甲苯脱水、清除和固定来制备。除手动的染色方法外,还可使用机械和自动的染色系统来大批量样本制备,然后可使用全自动的评估系统评估染色的样本、标记异常细胞或对细胞组进行筛选,并将图像保存在图库中以供检索和进一步研究。

细胞学诊断的解读

由于样本材料可根据所使用的固定、制备和染色技术直接进行显微镜检查,因此细胞学诊断非常适合子宫颈筛查等大规模筛查。细胞学研究结果与标本收集位置的直接相关性是细胞学诊断的关键。因此,为了提高效率,研究人员必须熟练掌握取样和制备技术及其过程,合理控制每次实验以避免结果错误。

能否对疾病状态早期变化的进行检测(灵敏度),同时防止假阳性诊断(特异性)是评估细胞学诊断成功率和效率的基本指标,两者取决于样本的收集、固定、染色和解读方法。因此,除了X射线成像、计算机断层扫描(CT)、超声、核自旋断层扫描和正电子发射断层扫描(PET)等成像技术外,细胞学也是必不可少的诊断环节。


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