MAB3420

Sigma-Aldrich

抗Tau-1抗体,克隆PC1C6

clone PC1C6, Chemicon®, from mouse

eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
价格与库存信息目前不能提供

Quality Level

biological source

mouse

clone

PC1C6, monoclonal

species reactivity

rat, bovine, human

packaging

antibody small pack of 25 μg

mfr. no.

Chemicon®

application(s)

immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable

isotype

IgG2a

UniProt accession no.

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

General description

Tau是一种微管结合蛋白,可稳定生长中的轴突中的微管,其会在成对的螺旋丝(PHF)中被过度磷酸化,成对的螺旋丝(PHF)是与阿尔茨海默症’相关的神经原纤维病变的主要纤维成分。Tau的过度磷酸化被认为是导致PHF组装的关键事件。已经鉴定出六种Tau蛋白同工型,所有这些同工型都可被糖原合酶激酶3(GSK 3)磷酸化。细胞和亚细胞定位:原位抗tau-1抗体对神经元轴突具有严格的特异性。该抗体不会对细胞体或神经元树突进行染色,也不会对任何其他细胞类型进行染色(4)。但是,这种体内细胞内特异性在培养中并未得到维持:抗tau-1抗体可染色培养中生长的大鼠海马神经元的轴突、细胞体和树突(5)。最初认为抗tau-1抗体的特异性代表了tau对轴突的限制性表达。后来的研究表明,这种特异性取决于磷酸化的状态。在去磷酸化的样品(用碱性磷酸酶处理的样品)中,抗tau-1抗体可对星形胶质细胞、神经胶质细胞和神经元的轴突、细胞体和树突进行染色,而在未处理的样品中,抗tau-1抗仅会染色轴突(6)。(抗tau-1抗体识别的表位可能位于磷酸化位点或附近。)

Specificity

可与人、大鼠和牛脑中各种已知tau电泳形式结合(一维SDS-PAGE)。然而,克隆PC1C6存在一些未磷酸化的偏差,原因是其似乎只能识别195、198、199和202处的去磷酸丝氨酸位点(Szendrei等,1993; http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi-cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=7680727)。另请参阅Billingsley & Kincaid, 1997 Biochem J 323:577-591中有关PC1C6的其他信息。

Immunogen

纯化的变性牛微管相关蛋白。

Application

研究类别
神经科学
抗Tau-1抗体,克隆PC1C6,是一种抗Tau-1的抗体,可用于IH和&WB,其已有超过65次产品引用。
研究子类别
神经退行性疾病
蛋白质印迹:牛脑微管蛋白通过两个组装和拆卸循环(9)进行纯化,并溶解于SDS-PAGE样品缓冲液中。每个泳道将五微克微管样品沿着分子量标记(14.3-200 kD)一侧加上样至4%至20%SDS-PAGE梯度凝胶上。通过电泳分离后,将蛋白质印迹至硝酸纤维素上。利用大约5 ng/mL的抗tau1抗体,Tau被检测为一系列5条带(52-68 kD)。

免疫荧光:该抗体以1:1000的稀释度可在小鼠原代神经元中检测到Tau。(Basnet, N., et al. (2018).Nat. Cell Biol. 20(10); 1172-1180.

免疫组织化学: 5 μg/mL;在组织中主要染色轴突,但是在培养物中Tau的表达不仅限于轴突。

最佳工作稀释度必须由最终用户确定。

免疫组织化学实验方案

组织切片的去磷酸化(可选)

建议使用碱性磷酸酶去磷酸化以通过抗tau-1抗体对阿尔茨海默症′脑组织中神经原纤维缠结进行染色含有(6)。这种处理方法改变了抗tau-1抗体的染色模式,使其可染色包括神经元的细胞体、树突和轴突。在未经处理的样品中,抗tau-1抗仅可对轴突染色。

1.以+32°C孵育组织切片2.5小时,并在以下溶液中不断搅拌:100 mM Tris-HCl(pH 8.0);130单位/mL碱性磷酸酶、1 mM PMSF、10 μg/mL胃抑素和10 μg/mL亮肽素。

2.使用100 mM Tris-HCl(pH 8.0)洗涤切片两次,每次洗涤3分钟。

抗tau-1抗体染色

1.在含有1%(v/v)正常动物血清和0.03%(w/v)Triton X-100的PBS中孵育切片,以阻断非特异性结合。动物血清应与二抗来自同一物种。

2.用PBS洗涤3次,每次洗涤3分钟。

3.用约5 μg/mL的抗tau-1抗体孵育切片,并在含1%(v/v)正常动物血清的PBS中进行稀释。

4.用PBS洗涤,在3分钟内更换溶液3次。

5.使用标准的二抗检测系统进行含量(10-13)。

Target description

5条带(52–68 kDa)

Linkage

替代品:AB1512

Physical form

形式:纯化
纯化的蛋白 A
0.02M磷酸盐缓冲液(pH 7.6)、0.25M NaCl和0.1%叠氮化钠

Storage and Stability

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。避免反复冻融。为了最大程度地回收产品,在融化后和取下盖子之前,将原始样品瓶进行离心。

Analysis Note

对照
阿尔兹海默症′脑组织(建议在碱性磷酸酶中进行去磷酸化以对阿尔茨海默症’脑组织中的神经原纤维缠结进行染色)或人T98G胶质母细胞瘤细胞

Other Notes

浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

Flash Point(F)

Not applicable

Flash Point(C)

Not applicable

SynCAM 1 participates in axo-dendritic contact assembly and shapes neuronal growth cones.
Stagi M, Fogel AI, Biederer T
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Soluble guanylyl cyclase inhibitor prevents Sema3F-induced collapse of axonal and dendritic growth cones of dentate granule cells.
Ryuji X Yamada, Norio Matsuki, Yuji Ikegaya
Biological & Pharmaceutical Bulletin null
Interaction of nonreceptor tyrosine-kinase Fer and p120 catenin is involved in neuronal polarization.
Lee, Seung-Hye
Molecules and Cells, 20, 256-262 (2005)
Gradients of substrate-bound laminin orient axonal specification of neurons.
Dertinger, SK; Jiang, X; Li, Z; Murthy, VN; Whitesides, GM
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Reversible paired helical filament-like phosphorylation of tau is an adaptive process associated with neuronal plasticity in hibernating animals.
Arendt, Thomas, et al.
The Journal of Neuroscience, 23, 6972-6981 (2003)
技术文章
Derivation and characterization of functional human neural stem cell derived oligodendrocyte progenitor cells (OPCs) that efficiently myelinate primary neurons in culture.
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