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分散酶^®II (中性蛋白酶, II级)

lyophilized, from bacterial, Roche, pkg of 5 × 1 g

• Synonym(s): 中性蛋白酶, 组织解离, 解离酶
• Enzyme Commission number: 3.4.24.4 (BRENDA, IUBMB)

Properties

• 生物来源: bacterial
• 质量水平: 100
• 无菌性: non-sterile
• 形式: lyophilized
• specific activity: ≥0.8 units/mg protein (37 °C, casein as substrate, pH 7.5)
• 包装: pkg of 5 × 1 g
• manufacturer/tradename: Roche
• 最佳pH: 6.0-8.5
• application(s): sample preparation

Description

一般描述

分散酶是一种中性、快速反应、温和的蛋白酶，能将表皮从真皮中完整分离。它还能将培养的上皮细胞从基质中完整分离出来。其可分裂基底膜区，使上皮细胞保持完整。

特异性

分散酶是一种非特异性的金属蛋白酶。

应用

分散酶^®用于从多种不同的组织和器官制备细胞。该酶已经证实是一种快速、有效但温和破坏组织胞外基质的制剂，可释放用于细胞培养的单细胞（原代细胞培养）或收集培养细胞以转至新底物中（继代培养）。此外，它还可用来防止细胞悬浮培养过程中形成不必要的团块。

特点和优势

• 快速有效又温和的试剂，在最小的细胞损伤下释放细胞
• 维持细胞膜完整性
• 非哺乳动物来源-无支原体和动物病毒污染
• 对温度、pH 值和血清成分干扰的影响非常稳定
• 易被螯合剂或稀释液灭活
• 提供更高的活性和便利性

单位定义

一单位是指在pH 7.5、+37 °C反应条件下，在1分钟内释放出对应1 μmol (181 μg)酪氨酸的Folin-阳性的氨基酸和肽类所需的酶量。
Roche分散酶^®II单位与日本文献中引用的分散酶单位（其中分散酶^®浓度为1，000到2，000单位/ml的情况不常见）的实际比较结果表明，Roche的1单位分散酶大致相当于日本的600单位。
Roche Applied Science的1单位^®相当于181蛋白酶单位（PU），其中PU为在pH 7.5和+37 °C条件下，在1分钟内释放相当于1 μg酪氨酸的氨基酸所需的酶量。

制备说明

激活剂：最佳Ca²⁺ 浓度为2mM。酶制剂含有维持最佳活性所需的足量Ca²⁺。
抑制剂：EDTA、EGTA、Hg²⁺、其他重金属。分散酶不受血清抑制。
工作浓度：0.6至2.4 U/ml
工作溶液：储备溶液和工作溶液制备：

制备10mg/ml的储备溶液，将分散酶^®II冻干粉溶于HEPES-缓冲盐溶液中（50 mM HEPES/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl）。制备工作溶液，将上述储备溶液用分离细胞培养基稀释至终浓度为0.6到2.4U/ml。请注意，建议浓度不要高于2.4U/ml。为实现最佳结果，用0.22μm滤膜过滤工作溶液。
储存条件（工作溶液）：-15 至 -25 °C
复溶的储备溶液在2至8℃下可稳定保存2周。如需保存2个月以上，储备溶液需分装冻存。避免反复冻融! 采用PBS稀释的工作溶液在2至8℃下可稳定保存3天。

储存及稳定性

2至8 °C储存。（干燥储存！）

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Safety Information

• 象形图: GHS07,GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H315 - H319 - H334 - H335
• 预防措施声明: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• 危险分类: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• 靶器官: Respiratory system
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 闪点(F): does not flash
• 闪点(C): does not flash