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Roche

Liberase TL研究级

low Thermolysin concentration

质量水平

100

形式

lyophilized

包装

pkg of 10 mg (2x5 mg)

mfr. no.

Roche

参数

35-37 °C optimum reaction temp.

最佳pH

7.4

运输

dry ice

一般描述

去细胞化过程最常用的方法,如组织解离和细胞收集等,都基于蛋白水解酶。蛋白酶可破坏组织的细胞外基质以释放单个细胞或收集以转移培养细胞。细胞分离的目的在于最大限度提高具有活性和功能活性的解离细胞。

Liberase纯化酶混合物
Liberase酶是一系列高度纯化酶的混合物,可提高组织解离的质量和可重复性,并提高分离细胞的活力和功能性。Liberase纯化酶混合物可取代传统的酶,后者不过是溶组织棱酶的粗提取物以及多变的发酵副产物

Liberase酶技术
Liberase酶技术包括将梭菌胶原酶异构体纯化为高特异性活性的方法,并将它们与高特异活性中性蛋白酶以最佳比例混合,以有效解离原代组织和培养细胞。
有关其他信息,如制造、技术或储存等相关的信息,可参考Liberase研究级Insight文档。关于该主题的更多读物可在文档选项卡中找到。
Roche可提供专为满足GMP的要求而生产的Liberase纯化酶混合物特殊质量制剂。如需关于GMP级制剂的更多信息。
重要提示:
  • 该产品仅可用于生命科学研究和体外应用。这些产品不可用于诊断或临床用途,例如人的胰岛移植。
  • 所有的第一代Liberase及Liberase混合酶产品(Liberase HI、CI、RI、PI、Liberase 混合莓1、2、3、4)都已被第二代Liberase研究级以及Liberase GMP级酶混合物产品线所取代。如需关于之前使用的Liberase酶的转换指南。

应用

Liberase TL (低嗜热菌蛋白酶)研究级可用于广泛类型的组织解离,而其中高纯度的酶混合物是实现高细胞产量和活性所必需的。细菌性副产物(如内毒素),可降低数千倍。
该产品已用于小鼠胰岛细胞分离。

特点和优势

Liberase TL研究级含有高度纯化的胶原酶I和胶原酶II。这两种胶原酶异构体以精确的比例相互混合,并含有低浓度的嗜热菌蛋白酶(一种非梭菌中性蛋白酶)。
  • 通过利用含有较少梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性,以及更低的内毒素含量的酶混合物,实现分离细胞活力和产量的最大化
  • 因胶原酶I+II纯度(由HPLC分析测定)更高,有助于实现酶混合物的更高特异性活性
  • 更高的批次间一致性,可获得更高的实验可重复性。
  • 通过一种不含任何哺乳动物或禽类组织来源原材料的酶,提高安全性。

制备说明

稳定剂:
工作浓度:Liberase研究级酶工作浓度

Liberase酶相对于传统的胶原酶具有明显更高的特异性活性。即Liberase研究级纯化酶的工作浓度(mg/ml)将会低于传统的胶原酶。

当相应的应用存在于www.collagenase.com上Roche的应用列表中时,可使用针对该应用推荐的Liberase研究级浓度。

当列表中不含有相应的应用时,首次需使用0.08–0.28 Wünsch 单位/ml的Liberase TM研究级浓度。

目的是确定Liberase研究级酶混合物的最佳起始浓度。这仅是一个起点,而最终的浓度可能会随着不同的过程以及传统胶原酶的批次间差异而发生变化。

胶原酶工作浓度

将您之前的胶原酶工作浓度(mg/ml)乘以其特定的活性(Wünsch 单位/mg,按上述方法测定),以获得Wünsch 单位/ml。为确定需要使用的Liberase研究级酶量,首先将您的胶原酶工作浓度(Wünsch 单位/ml)乘以您工作酶溶液的总体积,获得所需的总胶原酶活性(Wünsch单位)。除以由Liberase研究级储备浓度所需的总胶原酶活性(“复溶及储备”?)。这将得到您工作酶溶液中所用的Liberase研究级酶混合物储备溶液毫升数。


储存条件(工作溶液):将未使用的储备溶液按单次使用量进行分装并-15至-25 °C储存。如需关于产品稳定性的更多信息,请访问Roche Liberase酶网站www.collagenase.com。

注意:避免反复冻融!

重悬

使用注射级质量的无菌水或组织解离缓冲液重悬冻干酶。请勿向解离缓冲液中加入血清或其他可能影响酶活性的成分,如白蛋白或蛋白酶抑制剂。酶的稳定性会在随着浓度和温度(4 °C)升高而降低。请注意避免发生上述两种情况。

请重瓶复溶。请勿对分装的单独冻干酶进行称重。样品瓶引入湿气会导致酶活性下降。

在进行冻干酶重悬时将小管置于冰上。

在2至8 °C轻轻晃动样品瓶直至酶完全溶解(最高30分钟)。

在使用溶解Liberase研究级纯化酶混合物的不同类型组织解离液时,可能会看到轻微的沉淀并在稀释的工作溶液中会立即发生溶解,这对于酶活并不会产生影响。

吸取一份储备溶液来制备工作溶液

重悬体积

2 ml(1瓶5mg-10mg装)、10 ml(1瓶50 mg-100 mg装)

胶原酶Wünsch(单位/ml)

13(1瓶5 mg–10 mg装)、26 (1瓶50 mg–100 mg装)

总胶原酶浓度mg/ml

2.5(1瓶5 mg–10 mg装)、5.0(1瓶50 mg–100 mg装)

储存及稳定性

-15至-25 °C储存。(干燥储存。请注意,过期日期未印在单个小瓶上。)

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

Liberase is a trademark of Roche

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Danger

RIDADR

NONH for all modes of transport

闪点(F)

does not flash

闪点(C)

does not flash

分析证书

原产地证书 (CofO)

Christine M Kusminski et al.
Diabetes, 65(6), 1534-1555 (2016-02-21)
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实验方案

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