Merck
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Roche

DIG RNA标记混合物

greener alternative

sufficient for 20 reactions, solution

Synonym(s):
核酸标记

形式

solution

质量水平

100

用途

sufficient for 20 reactions

包装

pkg of 40 μL

manufacturer/tradename

Roche

环保替代产品特性

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

环保替代产品分类

储存温度

−20°C

一般描述

标记效率:来自1μg 线性模板DNA的约10μg的全长地高辛标记RNA被转录。
检测时间:135分钟
样本材料
线性化质粒DNA:
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成,质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用;3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化,以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物:
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。  DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
通过这种方法,特定长度的DIG标记单链RNA探针通过体外转录被生成。在标准条件下,DIG-11-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中。DIG RNA标记混合物专门设计用于优化转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记

内含物
10x 溶液带有:
10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.

特异性

热灭活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。

应用

利用SP6,T7及T3 RNA聚合酶通过体外转录而使用地高辛-11-UTP进行RNA标记。DIG标记RNA已用于多种杂交技术:
  • Northern blots[1]
  • Southern blots
  • 斑点印迹
  • 菌斑或克隆提升
  • RNase保护实验
  • 染色体, 细胞, 及组织切片原位[2][3]

特点和优势

DIG RNA标记混合物专门设计用于来自Roche并配以优化的转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。

质量

经DIG RNA标记试剂盒和DIG核酸检测试剂盒检测的功能。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

象形图

Exclamation mark

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

Acute Tox. 4 Oral

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(F)

does not flash

闪点(C)

does not flash

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