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RPROTKSOL-RO

Roche

蛋白酶K,重组,PCR级

Solution from Pichia pastoris

质量水平

100

形式

buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5)

specific activity

~2.5 units/mg protein (Approximately 2.5 U/mg (Chromozym assay); ≥30 U/mg hemoglobin assay. Refer to the Certificate of Analysis for specific values for the present lot.)

包装

pkg of 1.25 mL (03115887001)
pkg of 25 mL (03115844001)
pkg of 5 mL (03115828001)

manufacturer/tradename

Roche

最佳pH

6.5 and 9.5

pH范围

4.0 - 12.5

运输

wet ice

储存温度

2-8°C

一般描述

重组酶与最初从白色念球菌(Tritirachium album)中分离出来的天然蛋白酶相同。重组酶的规格与天然蛋白酶的规格相同。氨基酸序列(分子量)和分子结构相同。但是,重组酶比天然酶的纯度更高,因为根据当前质量控制程序,重组酶不含DNA,因此它非常适用于分离PCR和RT-PCR模板。
蛋白酶K是枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,无明显的切割特异性。
该酶还具有冻干形式。

应用

  • 这款PCR级蛋白酶K对天然蛋白质非常有效,因此,可快速灭活内源核酸酶,如RNA酶和DNA酶。这种特性使蛋白酶K特别适用于从组织或细胞中分离天然RNA和DNA。
  • 该酶通过激活细菌自溶因子而促进细胞裂解。
  • 该酶通过修饰细胞表面的蛋白质和糖蛋白来分析膜结构。
  • 该酶特别适用于分离核酸以用于扩增反应。
  • 蛋白酶K可在菌落转移准备过程中用于去除细胞碎片,以及用于处理组织切片以确保在原位杂交过程中实现有效的探针浸润。

特点和优势

蛋白酶K能够切割氨基酸X和Y(X--Y)之间的蛋白质,其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸,Y = 任何氨基酸。该酶对天然蛋白质非常有效,因此,可快速灭活内源核酸酶,如RNA酶和DNA酶。
  • 选择一种有效的模板制备工具。可灭活大多数物种的DNA酶和RNA酶。
  • 注重一致的质量和性能。严格的质量测试确保了最佳的稳定性和高水平的批次间性能一致性。
  • 适用于各种条件下的样品制备。这款强大的酶可在很广的pH范围内保持稳定,是各种应用的理想选择。
  • 受益于无污染的酶。该酶经过测试,不含RNA酶和DNA酶,并且几乎不含DNA。它特别适用于PCR模板的分离。

质量

根据当前的质量控制程序,该制剂不含RNA酶、DNA酶和DNA。
不含核酸酶:每一批次均在各种底物上经过测试,确保不含核酸内切酶、核酸外切酶、核糖核酸酶和开口活性。
DNA含量:≤10pg/mg酶(由Threshold测定)
生物负载:≤5cfu/g(由《欧洲药典》中最严格的测试确定,该测试能确定活的需氧菌、酵母和真菌的总数)

单位定义

体积活度:约50 U/ml溶液(chromozyme测定);约600 U/ml溶液(血红蛋白测定)。一个酶活性单位是指在+25 °C条件下在1分钟内切割18 mmol Chromozym TRY所需的酶量(相当于在血红蛋白测定中使用600 U/ml)。有关当前批次的具体值,参见分析证书。

制备说明

激活剂:加入变性剂(SDS和尿素),可刺激蛋白酶K的活性。例如,使用终浓度为2%的SDS可以显著提高蛋白酶K的活性。使用变性剂进行优化,可使蛋白酶活性提高七倍。

工作溶液:建议缓冲液:
蛋白酶K的最佳缓冲液取决于具体应用。应始终遵循参数部分中的pH和温度指南。一般来说,蛋白酶K在含有尿素、十二烷基硫酸钠(SDS)和胍盐等变性试剂的缓冲液中可保持稳定且活性非常高。

抑制剂:该酶可被Pefabloc® SC灭活。但是,它不会被金属离子、螯合剂(如EDTA)、巯基试剂或胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂灭活。

其他说明

用于快速灭活RNA酶和DNA酶。
当过量使用且长时间孵育时,该酶可将蛋白质分解成游离氨基酸。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

危险分类

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(F)

No data available

闪点(C)

No data available

分析证书

原产地证书 (CofO)

Gerard Honig et al.
Journal of biomedical science, 17, 82-82 (2010-10-19)
Multicellular organisms are characterized by a remarkable diversity of morphologically distinct and functionally specialized cell types. Transgenic techniques for the manipulation of gene expression in specific cellular populations are highly useful for elucidating the development and function of these cellular
Anna Cäcilia Ingham et al.
Applied and environmental microbiology, 87(18), e0122521-e0122521 (2021-07-01)
Drivers of pig trucks constitute a potential route of human transmission of livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus clonal complex 398 (LA-MRSA CC398). In this study, we determined MRSA prevalence in pig truck drivers (n = 47) and monitored the nasal microbiota of 9
Sungjae Hwang et al.
Cancer, 119(24), 4249-4258 (2013-10-12)
Epigenetic reprogramming of the methylome has been implicated in all stages of cancer evolution. It is now well accepted that cancer cells exploit epigenetic reprogramming, a mechanism that regulates stem/progenitor cell renewal and differentiation, to promote cancer initiation and progression.
Astrid Haaskjold Lossius et al.
Dermatology (Basel, Switzerland), 1-12 (2021-04-23)
The pathophysiology in atopic dermatitis (AD) is not fully understood, but immune dysfunction, skin barrier defects, and alterations of the skin microbiota are thought to play important roles. AD skin is frequently colonized with Staphylococcus aureus (S. aureus) and microbial
Caroline Meyer Olesen et al.
Microorganisms, 9(7) (2021-08-08)
Investigation of changes in the skin microbiome following treatment of atopic dermatitis (AD) with dupilumab may provide valuable insights into the skin microbiome as a therapeutic target. The aim of this study is to assess changes in the AD skin

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