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CAS9D10AGFPP

Sigma-Aldrich

CMV-CAS9D10A-2A-GFP 质粒

Synonym(s):
CAS9D10A 质粒
NACRES:
NA.51

重组

expressed in E. coli

质量水平

200

形式

liquid

包装

vial of 50 μL

浓度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

启动子

Promoter name: CMV

报告基因

GFP

selection

kanamycin

运输

dry ice

储存温度

−20°C

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一般描述

共表达GFP的Cas9-D10A切口酶表粒使用CMV启动子,可获得较强的Cas9-D10A 瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时,使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化,得到基于T7的mRNA产物。

应用

功能基因组
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于:

  • 在多种细胞系中进行基因敲除
  • 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
  • 建立基因敲入细胞系,将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
CMV-CAS9D10A-2A-GFP Plasmid has been used in CRISPR-Cas9 mutagenesis to truncate the forkhead box O3 (FOXO3) gene in the mammalian cell.

组分

每管包含1μg的 Cas9-D10A 切口酶-GFP质粒。

请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。

外形

1μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-GFP 质粒

其他说明

来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。GFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对基因组编辑活性进行富集。

法律信息

CRISPR专利正在申请中

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

nwg

闪点(F)

Not applicable

闪点(C)

Not applicable

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