Merck
All Photos(1)

CAS9GFPP

Sigma-Aldrich

CMV-CAS9-2A-GFP 质粒

Synonym(s):
Cas9 质粒
NACRES:
NA.51

重组

expressed in E. coli

质量水平

200

包装

vial of 50 μL

浓度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

启动子

Promoter name: CMV

报告基因

GFP

selection

kanamycin

运输

dry ice

储存温度

−20°C

Looking for similar products? Visit Product Comparison Guide

Related Categories

一般描述

Cas9表达质粒使用CMV启动子,以实现Cas9的强瞬时表达。可以使用MluI和NheI替换CMV来进行启动子替换。此外,Cas9表达质粒可以使用XbaI进行线性化,从而用于基于T7的mRNA生成。添加与Cas9核酸酶平移共表达的荧光团可以容易地实现成功转染的可视化。

应用

CMV-CAS9-2A-GFP 质粒已被用于诱导人类U937白血病细胞中的额外性梳样1( sex combs-like1 )突变。它也已用于CRISPR/Cas9分析。
CMV-CAS9-2A-GFP质粒适用于以下功能基因组学/靶点验证:
  • 在多种细胞系中创建基因敲除
  • 完全敲除不适合RNAi的基因
  • 通过整合到内源基因中的启动子、融合标签或报告基因创造基因敲入细胞系

组分

1管含1μg 的Cas9-2A-GFP质粒。

请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。

原理

CRISPR/Cas被细菌和古细菌用作防御入侵病毒和质粒的防御系统。最近,来源于化脓性链球菌 的II型CRISPR/Cas系统已被设计为在真核系统中起作用,其使用两种分子组分:单一Cas9蛋白和非编码向导RNA(gRNA)。可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行编程,从而将DNA双链断裂(DSB)导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB类似,细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)],以愈合目标DSB。

其他说明

为了介导DNA双链断裂,必须与U6-gRNA质粒一起使用。

文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

nwg

闪点(F)

Not applicable

闪点(C)

Not applicable

Certificate of Analysis

Enter Lot Number to search for Certificate of Analysis (COA).

Certificate of Origin

Enter Lot Number to search for Certificate of Origin (COO).

Product Information Sheet

SDS

Our team of scientists has experience in all areas of research including Life Science, Material Science, Chemical Synthesis, Chromatography, Analytical and many others.

Contact Technical Service